DB22-T 3386-2022 小球藻发酵培养技术规范

65.150CCS

B

5222 DB

22/T

3386—2022小球藻发酵培养技术规范The

technical

specification

of

chlorella

吉林省市场监督管理厅 发

布DB

22/T

3386—2022 本文件按照GB/T

1.1—2020《标准化工作导则

第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省农业农村厅提出并归口。本文件起草主要单位：吉林农业大学，吉林省水产技术推广总站、通化师范学院。本文件主要起草人：张东鸣、陈玉珂、蔺丽丽、王秋举、郭志欣、刘洪建、赵云龙、高永生。DB

22/T

3386—20221 范围Chlorella

vulgaris物量和采收。本文件适用于淡水小球藻设施发酵培养。2 规范性引用文件文件。GB

11607 渔业水质标准3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。扩大培养

浓度后，一次性采收或作进一步扩大培养的过程。发酵培养

fermentation

culture小球藻通过生物氧化反应获得能量以维持藻细胞生长的过程。4 仪器设备与耗材仪器设备小球藻发酵培养仪器设备应满足下列要求：a)

发酵罐,容量不低于

50

L；b)

恒温干燥箱，不低于

2000

W；c)

高压灭菌器,

50

L；d)

高速离心机，转速不低于

5000

r/min，离心体积不小于

；e)

充气泵，功率大于

W。耗材玻璃三角烧瓶，培养皿，离心管。mLmLa1000NaNO3

(+N)

(-N)30/20.65024

20.80Na2CO30.40b1000.300.30EDTA-Na20.05100CaCl221.80100MgSO423.751000332.86MnCl221.81CuSO420.079Na2420.391Co(NO3220.04947ZnSO4·7H20.222c1000

119.1540a

pH

b

c

41.53

4.14

KH2PO40.7

MgSO420.7

Na2421.84

CaCl2

15

mL1.84

mL表2表2 发酵培养基组成DB

22/T

3386—20225培养基扩大培养用

BG-11

培养基，主要成分见表

1。表1 BG-11表1 BG-11

培养基组成200

mL

密度达到

10

ind/mL

的小球藻接种于

200

mL

密度达到

10

ind/mL

的小球藻接种于

培养基中。6 培养水质水质符合

11607

的要求。扩大培养6.2.1 藻种小球藻纯度

≥

99.99

%。6.2.2 接种无菌环境下，将已无菌的

600

mL

BG-11

培养基装入

1

L

66.2.3 培养条件pH

6.5，培养温度

℃，充气量

培养时间为

h。发酵培养6.3.1 接种在

50

L

发酵罐中进行发酵培养，接种量为

3

L

扩大培养的小球藻藻种接入

27

L

发酵培养基中。6.3.2培养条件装料体积

L，温度

℃，搅拌速度

r/min

~

r/min，发酵时间

h。6.3.3补料在发酵培养达

36

h

时向发酵罐内补充

30

g/L

葡萄糖；在发酵培养达

60

h

时向发酵罐内补充10

g/L

尿素，培养至满

h

结束。7 测定生物量取

8

藻液装入

10mL

离心管中以

8000

离心

10，弃上清，再用蒸馏水混悬藻泥，离

80