分子生物学课后习题答案培训资料

第一章绪论

□DNA重组技术和基因工程技术。

DNA重组技术又称基因工程技术，目的是将不同DNA片段（基因或基因的一局部）按照

人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体

细胞的新的遗传性状。

DNA重组技术是核酸化学、蛋白质化学、酶工程及微生物学、遗传学、细胞学长期深入研

究的结晶，而限制性内切酶DNA连接酶及其他工具酶的发现与应用那么是这一技术得以建

立的关键。

DNA重组技术有着广泛的应用前景。首先，DNA重组技术可以用于大量生产某些在正常细

胞代谢中产量很低的多肽，如激素、抗生素、酶类及抗体，提高产量，降低本钱。其次，

DNA重组技术可以用于定向改造某些生物的基因构造，使他们所具有的特殊经济价值或功

能成百上千倍的提高。

□请简述现代分子生物学的研究内容。

1、DNA重组技术（基因工程）

2、基因表达调控（核酸生物学）

3、生物大分子构造功能（构造分子生物学）

4、基因组、功能基因组与生物信息学研究

第二章遗传的物质根底及基因与基因组构造

□核小体、DNA的半保存复制、转座子。

核小体是染色质的根本构造单位。是由H2A、H2B、H3、H4各两分子生成八聚体和由大约

200bp的DNA构成的。核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一步。

DNA在复制过程中，每条链分别作为模板合成新链，产生互补的两条链。这样新形成的两

个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样。因此，每个子代分子的一条链来自亲

代DNA,另一条链那么是新合成的，这种复制方式被称为DNA的半保存复制。

转座子是存在染色体DNA上的可自主复制和移位的根本单位。转座子分为两大类：插入序

列和复合型转座子。

□DNA的一、二、三级构造特征。

DNA的一级构造是指4种脱氧核昔酸的连接及其排列顺序，表示了该DNA分子的化学构

成。

DNA的二级构造是指两条多核甘酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋构造。分为左手螺旋和

右手螺旋。

DNA的高级构造是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间构造。超螺旋构造是

DNA高级构造的主要形式，可分为正超螺旋与负超螺旋两大类。

□DNA复制通常采取哪些方式？

1、线性DNA双链的复制：复制经过起始、延伸、终止和别离三个阶段。复制是从5,端向3,

端移动，前导链的合成是连续的，后随链通过冈崎片段连接成完整链。

2、环状DNA双链的复制

（1）0型：是一种双向复制方式。复制的起始点涉及DNA的结旋和松开，形成两个方向相

反的复制叉，复制从定点开场双向等速进展。

（2）滚环型：是单向复制的一种特殊方式，发生在噬菌体DNA和细菌质粒上，首先对正链

原点进展专一性的切割，形成的5,端被单链结合蛋白所覆盖，3,端在DNA聚合酶的作用下

不断延伸。

（3）D-环复制：也是单向复制的一种方式。是在线粒体DNA中发现的。两条链的合成是高

度不对称的，最初只以一条母链为模版合成，迅速合成互补的新链，另一条那么成为游离的

单链环（即D环）。

□真核生物DNA的复制在哪些水平上受到调控？

1、细胞生活周期水平调控：决定细胞停留在G1期还是进入S期。

2、染色体水平调控：决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S期起

始复制。

3、复制子水平调控：决定复制的起始与否，并且是高度保守的。

□DNA修复包括哪几种？

1、错配修复：识别新合成链中的错配并加以校正，保证子链的正确性。

2、切除修复

1）碱基切除修复：切除突变的碱基

2）核昔酸切除修复：修复被破坏的DNA

3、DNA直接修复：修复喀咤二聚体或者甲基化DNA

第三章生物信息的传递--RNA转录与加工

□定义：Pribnowbox,编码链，上升突变，增强子。

在原核生物启动子被保护区内有一个由5个核甘酸组成的保守序列TATATT,是聚合酶结合

位点，称为Pribnow区，其中央大约位于起点上游lObp处，所以又称为-10区。

在DNA的两条链中与mRNA序列一样的那条DNA链是编码链或称有意义链。

如果增加Pribnow区的共同序列，将乳糖操纵子的启动子中的TATGTT变成TATATT,就会

提高启动子的效率，称为上升突变。

在一些转录单元上发现其转录起始位点上游约200bp处有两段72bp长的重复序列，它们不

是启动子的一局部，但能增强或促进转录的起始，因此，称这种能强化转录起始的序列为增

强子或强化子

□简述生物体内RNA的种类和功能。

生物体内拥有三种RNA,即：

编码特定蛋白质序列的mRNA；

能特异性解读mRNA中的遗传信息并将其转化成相应氨基酸后参加多肽链中的IRNA；

直接参与核糖体中蛋白质合成的rRNAo

□什么是DNA模板与mRNA及蛋白质产物之间的共线性关系？

核甘酸特异性的组成和排列顺序决定了贮存在DNA上的遗传信息，并通过转录mRNA传

递遗传信息，此过程是从起始核甘酸开场，一个脱氧核甘酸对应一个核甘酸，不重叠，不跳

跃，一一对应。mRNA上每3个核甘酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这个过程也

是连续的，而且没有发生重叠现象。因此，什么是DNA模板与mRNA及蛋白质产物之间

的共线性关系。

□转录一般被分为哪几个步骤？

无论是原核还是真核细胞，转录的根本过程都包括：

1、模板识别：模板识别阶段主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合

的过程。

2、转录起始：转录起始就是RNA链上第一个核甘酸键的产生。

3、通过启动子：RNA聚合酶成功地合成9个以上核甘酸并离开启动子区，转录就进入正常

的延伸阶段。

4、转录的延伸和终止：RNA聚合酶离开启动子，沿DNA链移动并使新生RNA链不断伸

长的过程就是转录的延伸。当RNA链延伸到转录终止位点时，RNA聚合酶不再形成新的磷

酸二酯键，RNA-DNA杂合物别离，

□转录终止子与翻译终止密码的构造特点？

转录终止子：1、不依赖于P因子的终止

终止位点上游一般有一个富含GC碱基的二重对称区，由这段DNA转录产生的RNA容易

形成发夹式构造。新生RNA中出现发夹式构造会导致RNA聚合酶的暂停，破坏RNA-DNA

杂合链5,端的正常构造。

在终止位点前面有一段由4-8个A组成的序列，所以转录产物的3,端为寡聚U,这种构造

特征的存在决定了转录的终止。寡聚U的存在使杂合链的3,端局部出现不稳定的rU-dA区

域，两者共同作用使RNA从三元复合物中解离出来。

2、依赖p因子的终止

p因子：六聚体蛋白，水解各种核甘三磷酸，通过催化NTP的水解促使新生RNA链从三元

转录复合物中解离出来，从而终止转录。

翻译终止密码：肽链延伸过程中，终止密码子出现在核糖体A位时，没有相应的AA-tRNA

与之结合，而释放因子能识别这些终止密码子并与之结合，水解P位上多肽链与tRNA之间

的二脂键。接着，新生的肽链和tRNA从核糖体上释放出来，核糖体大小亚基解体，蛋白质

合成完毕。

□什么是RNA编辑？其生物学意义？

编辑(editing)是指转录后的RNA特别是mRNA在编码区发生碱基的突变、参加或丧失等

现象。

RNA编辑的生物学意义

校正作用：RNA的编辑可以恢复丧失的遗传信息。

调控翻译：构建或者去除起始密码子和终止密码子，是基因表达调控的一种方式。

扩大遗传信息：使基因产物获得新的构造和功能，有利于生物进化。

第四章生物信息的传递--蛋白质的翻译

□定义：SD序列，信号肽。

SD序列：存在于原核生物起始密码子上游7-12个核昔酸的一段富含喋吟保守区域，它与

16SrRNA3'端反向互补，在mRNA与核糖体结合中起重要作用。

信号肽：在蛋白质多肽链的氨基端，有一段疏水性氨基酸序列，它负责把蛋白质引导到细胞

内不同膜构造的亚细胞器内。

□简述tRNA的构造。

IRNA一级构造是四种核糖核甘酸的组成和排列顺序，单链。

tRNA二级构造是三叶草形的，由于小片段碱基互补配对所形成。三叶草形的tRNA分子上

有4条根据它们的构造或功能命名的手臂。

tRNA的三级构造，都呈L形折叠式，而这种构造是靠二级构造中未配对碱基间所形成的氢

键来维持的。IRNA的三级构造与氨酰-IRNA合成酶对IRNA的识别有关。

□简述核糖体的组成及其功能。

核糖体是由几十种蛋白质和几种核糖体RNA(ribosomalRNA,rRNA)组成的亚细胞颗粒。

核糖体是一个致密的核糖核蛋白颗粒，可以解离为大小两个亚基。每个亚基都含有一个分子

质量较大的rRNA和许多蛋白质分子。这些大分子rRNA能在特定位点与蛋白质结合，从而

完成核糖体不同亚基的组装。

核糖体小亚基负责对模板mRNA进展序列特异性识别，如起始局部的识别、密码子与反密

码子的相互作用等，mRNA的结合位点也在小亚基上。

大亚基负责携带AA-tRNA、肽犍的形成、AA-tRNA与肽链的结合。A位、P位、转肽酶中

心等在大亚基上。

□简述肽链合成过程的生物学机制。

蛋白质的生物合成包括氨基酸活化、肽链的起始、伸长、终止以及新合成多肽链的折叠、加

工。

氨基酸是生物合成蛋白质的原料，氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的作用下生成活化氨基酸一一

AA-tRNA才能被准确地运送到核糖体中，参与多肽链的起始或延伸。

翻译的起始是核糖体小亚基、信使RNA、核糖体大亚基以及氨酰-tRNA和几十种蛋白质因

子的相互结合，形成起始复合物。

肽链的延伸：当第一个氨基酸与核糖体结合以后，按照mRNA模板密码子的排列，氨基酸

通过新生肽键的方式被有序地结合上去。每加一个AA是一个循环，每个循环包括AA-tRNA

与核糖体结合、肽键的生成和移位。

肽链在延伸过程中，当终止密码子出现在核糖体的A位时，没有相应的AA-tRNA能与之结

合，而释放因子具有GTP酶活性能识别终止密码子并与之结合，水解P位上多肽链与tRNA

之间的酯键。新生的肽链和IRNA从核糖体上释放，核糖体解体，蛋白质合成完毕。释放因

子RF催化GTP水解促使肽链与核糖体解离。

□蛋白质加工的种类和意义。

新生多肽链大多数是没有功能的，必须经过加工修饰才能转变为有活性的蛋白质。

1.N端fMet或Met的切除：细菌蛋白质N端的甲酰基能被脱甲酰化酶水解，原核生物和

真核生物N端的甲硫氨酸在多肽链合成完毕之前被切除。

2.二硫键的形成二硫键是蛋白质合成后通过两个半胱氨酸的氧化作用生成的。

3.特定氨基酸的修饰氨基酸侧链的修饰包括磷酸化（如核糖体蛋白质）、糖基化（如各种糖

蛋白）、甲基化（如组蛋白、肌肉蛋白质）、乙基化（如组蛋白）、羟基化（如胶原蛋白）和峻基化

等。

4、切除新生链中非功能片段。

□简述蛋白质转运的种类和机制。

蛋白质运转可分为两大类：1、翻译运转同步机制：蛋白质的合成和运转同时发生；分泌蛋白

质大多是以同步机制运输的。a、蛋白质合成起始首先合成信号肽，b、信号识别蛋白SRP

与信号肽结合，翻译停顿；c、SRP和SRP受体结合，核糖体与膜结合，翻译重新开场；d、

信号肽进入膜构造；e、蛋白质过膜，信号肽被切除，翻译继续进展；f、蛋白质完全过膜，

核糖体解离

2、翻译后运转机制：蛋白质从核糖体上释放后才发生运转。

在细胞器发育过程中，由细胞质进入细胞器的蛋白质大多是以翻译后运转机制运输的

此类蛋白在细胞质游离的核糖体中翻译，翻译产物在N端都含有信号序列。

第五章基因表达与调控

□定义：基因家族。

真核细胞中许多相关的基因常按功能成套组合，被称为基因家族。

□简述操纵子学说。

操纵子是原核生物基因表达和调控的最重要的形式。组成操纵子的最根本原件包括四个局部:

启动子，操纵基因，构造基因和相关的调节基因。

启动子是指能够被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。

构造基因是能够编码蛋白质的基因序列。

操纵基因能被蛋白特异性结合的一段序列，常与启动子相邻或者与启动子序列重复，当调节

蛋白结合在操纵子上，会影响其下游基因的表达。

调节基因编码能有操纵基因结合的蛋白。

整个操纵子模型就是通过调节基因表达的调节蛋白与操纵基因的结合和别离，来控制启动子

序列，从而调节基因的转录。

□简述乳糖操纵子的调控模型。

大肠杆菌乳糖操纵子包括三个构造基因：Z、Y、A以及启动子、控制子和阻遏子等，转

录时RNA聚合酶从启动子区开场，通过操纵区向右转录。转录的调控是在启动区和操纵区

进去的。mRNA的启动区P位于阻遏基因I和操纵区0之间，不能单独起始构造基因的表

达。阻遏基因I表达阻遏蛋白，可与操纵区0结合，当阻遏物与操纵区相结合时，mRNA

的转录起始受到抑制。诱导物通过和阻遏物结合，改变它的三维设想，使之不能和操纵区结

合，从而激发mRNA的合成。

□简述顺式作用元件与反式作用因子。

顺式作用元件：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。例：启动子、增强子、沉默

子等

反式作用因子是能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基

因转录效率的蛋白质。

□DNA甲基化的方式及其作用。

DNA甲基化主要形成5-甲基胞口密咤，N6-甲基腺口密咤和7-甲基鸟喋吟。

甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化那么能诱导基因的重新活化和表达。DNA甲基化

能够引起染色体构造，DNA设想，DNA稳定性和DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从

而控制基因表达。

□简述真核基因转录的过程和调控方式。

在真核生物中，DNA的转录在细胞核中进展。转录的根本过程包括模板识别、转录起

始、通过启动子和转录的延伸和终止.

1、模板识别：模板识别阶段主要指RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合