【高中生物】动物细胞融合技术与单克隆抗体+课件+高二下学期生物人教版选择性必修3

第2章

细胞工程2第2节动物细胞工程二

动物细胞融合技术与单克隆抗体目录/CONTENTS0102动物细胞融合技术单克隆抗体及其应用一

动物细胞融合技术1、概念：使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。2、原理：细胞膜具有一定的流动性3、诱导方式物理法：电融合法化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活病毒诱导法——动物细胞融合特有与植物原生质体融合的方法相同4、结果：形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞

一

动物细胞融合技术知识延伸动物细胞融合时，一般将多个细胞混合进行处理，因为就目前常用的细胞融合方法来看，不管是用物理、化学方法，还是用生物方法，其融合率都不可能是100%。若仅有少数细胞进行融合，则不一定能得到融合细胞，更重要的是，即使两个细胞已发生融合，也并不一定是研究者期望得到的细胞类型。动物细胞融合技术最有价值的应用就是制备单克隆抗体。一

动物细胞融合技术5、过程:动物细胞融合动物细胞培养细胞膜的流动性细胞增殖一

动物细胞融合技术（1）“灭活病毒”中灭活的具体含义是什么？相关信息灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。仙台病毒紫外线灭活丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）（2）灭活病毒诱导细胞融合的原理是什么？病毒表面的糖蛋白和一些酶与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。一

动物细胞融合技术相关信息（3）灭活病毒诱导细胞融合过程：

病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。一

动物细胞融合技术6、意义：细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。7、应用：至今，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。为制造单克隆抗体开辟了新途径。正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞（1）受精作用：是在同种生物之间进行的，精子与卵细胞的融合不需要任何诱导剂，受精卵内具备同种生物的两个亲本的遗传物质（2）动物细胞融合可在不同物种间进行，由于物种间存在生殖隔离，所以自然条件下不能融合成杂交细胞，必须有诱导剂才能融合。形成的杂交细胞具备两个亲本细胞的遗传物质，从而体现两个亲本的遗传特性注意：一

动物细胞融合技术动物细胞融合与受精作用的区别小结：动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理步骤诱导方法结果意义细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒形成杂种植株形成杂种细胞克服远缘杂交不亲和障碍一

动物细胞融合技术二

单克隆抗体及其应用1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。

抗体抗体体液免疫2.抗体的分布：1）血清（主要）2）组织液及外分泌液（如乳汁中）1）每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体2）体内产生的特异性抗体种类多达百万种以上抗原传统抗血清（所有抗体混合）免疫1

1234二

单克隆抗体及其应用1、传统抗体制备方法及缺陷动物体内1抗原注射浆细胞1抗体

1B淋巴细胞增殖分化（不能无限增殖）缺陷：产量低、纯度低，特异性差。二

单克隆抗体及其应用（1）概念：由单一的B淋巴细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体(2)基本原理①每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，但不能在体外无限增殖②小鼠骨髓瘤细胞能在体外无限增殖，但不能产生抗体③利用动物细胞融合技术产生的杂交瘤细胞可以保持亲代双方的特性，既能迅速大量增殖，又能产生专一抗体(3)来源：单克隆抗体是由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交形成的单一杂交瘤细胞增值产生的高度专一的抗体①B淋巴细胞：能产生特异性强的抗体②骨髓瘤细胞：在体外能无限增殖2、单克隆抗体的制备过程二

单克隆抗体及其应用注射特定抗原多种已免疫B淋巴细胞小鼠的脾脏中获取骨髓瘤细胞从患骨髓瘤的小鼠体内取骨髓瘤细胞的培养2、单克隆抗体的制备过程二

单克隆抗体及其应用融合的细胞BB132B置于选择性培养基上培养

第一次筛选√B瘤2杂交瘤细胞(多种)13瘤瘤瘤2、单克隆抗体的制备过程杂交瘤细胞(多种)克隆化培养第二次筛选抗体检测(抗原-抗体杂交技术)阳性细胞能分泌所需抗体的杂交瘤细胞二

单克隆抗体及其应用2、单克隆抗体的制备过程能分泌所需抗体的杂交瘤细胞体内或体外培养注射到小鼠腹腔体外培养单克隆抗体二

单克隆抗体及其应用2、单克隆抗体的制备过程二

单克隆抗体及其应用筛选原理：①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但不能分裂增殖。

③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，但能不断分裂增殖。筛选出杂交瘤细胞方法？培养基中加入氨基嘌呤B淋巴细胞及同型融合细胞骨髓瘤细胞及同型融合细胞杂交瘤细胞不能无限增殖，死亡D途径被阻断，无法增殖死亡能无限增殖，生长二

单克隆抗体及其应用1、诊断试剂——最广泛应用抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体在妊娠第8天就可以作出诊断，比原来诊断方法提前了10d左右，准确率在90﹪以上。诊断优点：具有准确、高效、简易、快速特点3、单克隆抗体的应用二

单克隆抗体及其应用乙肝测定试剂艾滋病检测试剂新冠病毒检测试剂3、单克隆抗体的应用血型检测试剂二

单克隆抗体及其应用3、单克隆抗体的应用2021年12月8日晚，由清华大学张林琦教授团队及其他公司共同研发的抗新冠病毒抗体组合药物——安巴韦单抗注射液及罗米司韦单抗注射液，正式被中国药监局批准上市，成为我国首个自主研发的抗新冠病毒抗体药物。注入体内后马上起效，可以降低80%新冠患者的住院率与死亡率”2、作为药物治疗疾病张林琦教授团队二

单克隆抗体及其应用3、单克隆抗体的应用3、运载药物

ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成。阅读教材50页思考：ADC的抗体和药物各具有什么作用？

抗体主要发挥靶向运输作用；药物发挥治疗效应，如杀伤靶细胞。二

单克隆抗体及其应用3、单克隆抗体的应用对点训练√下列有关动物细胞融合与植物体细胞杂交比较的叙述，错误的是（）A.它们的原理都涉及细胞膜的流动性

B.都可以用电融合法或PEG融合法诱导融合C.融合前都需用纤维素酶或果胶酶处理细胞D.前者主要为了获得细胞产品，后者主要为了获得杂种植株对点训练科研人员将抗癌药物连接在单克隆抗体上制成“生物导弹”用于癌症治疗。“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是“杀伤性弹头”。分析下列有关描述，其中不正确的是A.“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成B.“弹头”由放射性同位素、化学药物或毒素等物质构成C.“弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能D.“生物导弹”的制备应用了细胞工程√对点训练为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体—药物偶联物(ADC)，过程如图1所示。请回答下列问题：(1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_______________。(2)步骤①常用方法包括_____融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等