2020-2021大学《酶工程》期末课程考试试卷A（含答案）

总是暴露在分子表面上，形成一些亲水区。（）

2020-2021《酶工程》期末课程考试试卷A

而

治三、选择题（共5小题，每小题1分，共5分）

试卷所需时间：120分钟闭卷试卷总分：100分

.邠

1.对于竞争性抑制剂，当有I存在时，下述叙述正确的是（）

（答案全部写在答题纸上）

AKm增大，Vm不变，Km/Vm增大。

名词解释（共10小题，每题3分，共30分）

BKm增大，Vm减小，Km/Vm增大

1.核酶2.模拟酶3.诱导契合学说4.酶活回收率5.易错PCR6.pH记忆

7.固定化细胞8.大分子结合修饰9.分子印迹10.催化常数（Kcat）CKm减小，Vm不变,Km/Vm减小

判断题（共10小题，每小题1分，共10分）DKm减小，Vm减小，Km/Vm增大

1.如果某种酶有几种底物，则对每一种底物各有一个特定Km值，其中Km值最大2.抗体酶制备中（）,方法是通过两次免疫动物获得的。

的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。（）A引入法B拷贝法C诱导法D化学修饰

2.酶作用机制的“锁钥理论”无法解释酶催化反应中的可逆反应。（）3.世界上最早实现工业化生产的固定化酶是（）

3.有机相酶催化必需微量的水，这对于维持酶活性结构非常重要。（）A纤维素酶B果胶醐C氨基酰化酶D淀粉酶

4.在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲4.利用蛋白质颗粒带电荷性质进行的操作技术有（）

和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。（）A电泳和薄层层析B电泳和离子交换

5.虽然米氏方程对许多酶提供了很好的实验数据模式，但少数酶与米氏方程不相C亲和层析和凝胶过滤D超速离心和超滤

符合，如诱导酶。（）5.下列关于化学修饰剂聚乙二醇（PEG）描述错误的是（）

操

6.从最佳的抽提效果着眼，最好接近待抽提酶的等电点。也就是说，酸性蛋白质APEG既溶于水，也溶于有机溶剂；

宜用酸性溶液抽提，碱性蛋白质宜用碱性溶液。（）BPEG免疫原性和毒性很低；

7.若酶促反应持续时间缩短，则此条件下测得的最适反应温度往往偏高。（）CPEG作为化学修饰剂一般需要先活化；

8.膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过,I）PEG修饰剂与酶分子的作用属于非共价结合

而把大于其孔径的颗粒截留。（）四、填空题（每空1分，共10分）

9.固定化酶的活力在多数情况下比天然酶高，其底物专一性可能发生改变。（）1.1926年，萨姆纳（Sumner）首先制得___结晶，并指出酶的本质是蛋白质。

10.在球蛋白分子中，非极性侧链总是埋藏在分子内部，形成疏水核，而极性侧链他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。

2.专一性不可逆抑制剂通常可分为——和两种类型。

3.酶催化反应机理主要包括一、、、、等。

4.组I内含子催化的自我剪接反应必需—和参与才能实现。

五'问答题（共8小题，共45分）

n|r,

1.酶分子修饰的常用方法包括哪些？（5分）

然

2.简述酶分子定向进化的概念及定向进化的主要策略。（5分）

3.酶分离纯化过程中，为了避免酶变性失效，应注意哪些事项？（5分）

4.简述海藻酸钙包埋法固定化细胞的原理及基本过程。（6分）

5.固定化酶的制备应遵循哪些基本原则？（6分）

6.何谓手性药物？手性药物对映体所表现出的作用可能存在哪些差异？（6分）

7.有机相酶促反应有哪些优点？（6分）

8.酶的可逆抑制作用常见的有哪几种类型？请用双倒数作图法比较几种酶抑制动

力学参数的变化，并加以简要说明。（6分）

1.X2.73.J4.5.X

2020-2021《酶工程》期末课程考试试卷A答案6.X7.V8.79.X10.X

三、选择题（共5小题，每题1分，共5分）

名词解释（共10小题，每题3分，共30分）

1.A2.B3.C4.B5.D

1.核酶：是指具具有催化活性的RNA分子。四、填空题（每空1分，共10分）

2.模拟酶：是指吸收酶中那些起主导作用的因素，利用有机化学、生物化学等方1.服酶

法设计和合成一些较天然前简单的非蛋白质或蛋白质分子。2.Kcat型不可逆抑制剂、K型不可逆抑制剂。

3.诱导契合学说：是一种酶催化作用原理的假说，其观点认为：当酶分子与底物3.酸碱催化、共价催化、邻近及定向效应、变形或张力、微环境效应

分子相互靠近时，酶分子构象或底物分子结构发生改变，或者两者同时改变，4》/'或加”、鸟昔或鸟甘酸

使两者的构象能够相互契合，降低反应活化能，加速反应过程。五.问答题（共8小题，共45分）

4.酶活回收率；是指提纯前与提纯后酶的总活力之比。1.酶的分子修饰的常用方法包括哪些？（5分）

5.易错PCR：是指在扩增目的基因的同时引入碱基错配，导致目的基因随机突变。（1）金属离子置换修饰

6.pH记忆：是指有机溶剂中的酶能够保持它冷冻干燥前或沉淀前所在缓冲液中的（2）大分子结合修饰

pH时状态。（3）肽链有限水解修饰

7.固定化细胞：固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固（4）酶蛋白侧链基团修饰

定化细胞.该细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢，又称固定化活细胞或固（5）氨基酸置换修饰

定化增殖细胞。（6）物理修饰

（7）酶交联晶体修饰

8.大分子结合修饰：是指利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生某些

（8）酶的亲和修饰

精细的改变，从而改变酶的特性与功能的方法。

2.简述酶分子定向进化的概念及定向进化的主要策略。（5分）

9.分子印迹：是指制备对某一化合物具有选择性的聚合物的过程。

所谓酶分子定向进化，即人为创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制，在体

10.催化常数Kcat：是指单位时间内每个酶分子（或活性部位）转换底物为产物的

外对基因进行随机突变，从一个或多个已经存在的亲本前出发，经过基因的突变和

数目。

重组，构建一个人工突变酶库，通过一定的筛选或选择方法最终获得预先期望的具

二、判断题（对打“J”，错打“X”。共10小题，每小题1分，共10分）

有某些特性的进化酶。

定向进化的主要策略：易错PCR技术、DNA改组技术(DNAshuffling)、外显(5)固定化酶应有最大的稳定性。

子改组、体外随机引发重组、交错延伸技术。(6)固定化酶成本低，以利于工业使用。

3.酶分离纯化过程中，为了避免酶变性失效，应注意哪些事项？(5分)(7)固定化酶应能回收储藏，利于反复使用。

(1)除了少数例外，所有操作都应在低温条件下进行。6.何谓手性药物？手性药物对映体所表现出的作用可能存在哪些差异？(6分)

手性药物是指药物分子属于手性分子，而手性分子存在两种对映异构体其

(2)必须控制整个系统不要过酸过碱及调整酸碱值时避免产生局部酸碱过量的

药物作用可能存在差异。

现象。

手性药物立体异构体所表现出的作用可能存在以下差异：

(3)操作中应尽量减少泡沫的形成。

1)一种异构体有显著的治疗作用，另一种异构体无或有很弱的作用。

(4)重金属离子对某些酶有破坏作用，可在提取液中加入少量金属螯合剂

EDTA«2)一种异构体有治疗作用，另一种异构体有副作用。

3)两种异构体都有治疗作用，但其中一种异构体有副作用或另外一些辅助作

(5)为了防止内源性蛋白醐对前的水解，在提取液加入少量蛋白酶抑制剂。

用。

4.4.简述海藻酸钙包埋法固定化细胞的原理及基本过程。(6分)

4)两种异构体的作用有互补性。

包埋法固定化细胞的原理是；将微生物或细胞截流在水不溶性的凝胶聚合物孔

7.有机相酶促反应有哪些优点？(6分)

隙的网格空间中，凝胶聚合物的网格可以阻止细胞的泄漏，同时能让基质渗入和产

(1)有利于疏水性底物的反应。

物扩散出去。

(2)可提高酶的热稳定性。

海藻酸钙包埋法固定化细胞的基本过程：

(3)可改变反应平衡移动方向。

(1)将海藻酸钠加热溶于水。

(4)可控制底物专一性

(2)将海藻酸钠溶液与细胞混合均匀，使海藻酸钠最终浓度为2-4%

(5)可防止由水引起的副反应。

(3)将混合液用针形管滴入5-10%的CaC12溶液中，固定化7-8小时。