尼达尼布自微乳的制备及其体内外评价

尼达尼布自微乳的制备及其体内外评价尼达尼布（Nintedanib,NDNB）是一种酪氨酸激酶抑制剂,可以防治肿瘤生长和扩散,是美国FDA批准的首个用于治疗特发性肺纤维化（Idiopathicpul-monaryfibrosis,IPF）的药物。但是尼达尼布在肠道环境下溶解度低、不易被吸收的特点,导致其生物利用度只有4.7%。自微乳药物传递系统（Selfmicroemulsifyi-ngdrugdeliverysystem,SMEDDS）是一种难溶性药物的载体,该系统可以通过提高药物的溶解度增加其体外释放;通过在药物表面形成易通过胃肠壁的水化层增加其渗透性;通过改善药物的吸收程度和吸收速率提高其生物利用度。本文旨在通过SMEDDS体系增加尼达尼布溶解度,提高尼达尼布体内外释放,肠道吸收及体内血药浓度,以达到改善其口服吸收利用度的效果。本论文共分为以下五个章节:第一章综述本章主要概述了特发性肺纤维化、尼达尼布、自微乳给药传递系统这三个方面的研究进展。了解特发性肺纤维化病情概况及现今治疗手段,阐述尼达尼布的理化性质、治疗特发性肺纤维化的作用机制及其体内药动研究,总结自微乳传递给药系统技术及其在药剂学中的应用。本章为尼达尼布自微乳的制备提供了的理论基础。第二章处方前研究本章建立了紫外分光光度法作为尼达尼布体外含量检测测定方法。通过紫外全波长扫描发现于391nm波长处尼达尼布有最大吸收波长,且无溶出介质及辅料干扰,确定尼达尼布检测波长为391nm。建立尼达尼布体外含量测定的标准曲线,并对建立的测定方法进行方法学验证,结果表明尼达尼布体外含量测定方法符合方法学要求。考察尼达尼布在0.1mol?L^-11HCl、水、pH6.8PBS、pH6.8PBS（0.5%吐温80）、pH7.4PBS、pH7.4PBS（0.5%吐温80）中的平衡溶解度和油水分配系数,结果表明尼达尼布在pH6.8、pH7.4PBS中溶解度低,分别为11.982μg·mL^-1、5.134μg·mL^-1,亲水亲油平衡值分别为2.4、2.85。人体小肠段pH接近中性,提示尼达尼布在肠道环境中具有亲脂性且溶解度低,导致其吸收率低,生物利用度低。处方前研究为尼达尼布自微乳的制备与研究奠定了基础。第三章尼达尼布自微乳的制备及其体外表征本章通过伪三元相图,以自微乳乳化状态、乳化时间及粒径为指标,对尼达尼布自微乳处方中各辅料和配比进行筛选,确定尼达尼布自微乳的最优处方:MCT为油相,RH40为表面活性剂,乙二醇为助表面活性剂,Km为1.5,MCT的含量为10%,尼达尼布载药量为10%。确定尼达尼布自微乳最佳制备工艺:37℃,搅拌速度200r·min^-1,磁力搅拌时间20min。最优处方制备的尼达尼布自微乳乳化后外观呈淡黄色透明液体,平均粒径为23nm左右,Zeta电位为25.5mv。以尼达尼布自微乳乳化后的外观、粒径大小及药物含量为指标,对其进行稳定性考察,结果表明尼达尼布自微乳稳定性良好。采用MTT法考察空白载体SEMDDS对Caco-2细胞的毒性,结果表明空白自微乳载体安全性较好。考察尼达尼布原料药和尼达尼布自微乳软胶囊的体外释放,结果表明尼达尼布原料药在0.1mol?L^-1HCl、水、pH6.8PBS（0.5%吐温80）、pH7.4PBS（0.5%吐温80）的溶出介质中12h时累计释放率分别是91.21%、54.01%、40.64%、9.10%,尼达尼布自微乳软胶囊在对应的溶出介质中的累计释放率分别为92.30%、75.02%、65.03%、57.90%,表明尼达尼布自微乳可以明显改善药物在中性介质中的释放。第四章尼达尼布自微乳在体肠吸收研究本章采用大鼠在体肠循环实验,研究尼达尼布及自微乳制剂的肠吸收特点及吸收位点,探讨其吸收机制。考察尼达尼布溶液组、尼达尼布自微乳组大鼠在体肠吸收参数,结果表明尼达尼布溶液组在十二指肠、空肠、回肠、结肠循环3h的吸收速率常数Ka分别为0.050±0.011、0.050±0.019、0.045±0.009、0.037±0.007,吸收百分率（%）分别为12.841±1.88、13.814±2.00、12.009±1.32、9.560±1.02,尼达尼布自微乳组在十二指肠、空肠、回肠、结肠循环3h的吸收速率常数Ka分别为0.141±0.016、0.149±0.022、0.130±0.014、0.120±0.013,吸收百分率（%）分别为31.229±1.55、34.401±2.37、29.210±1.85、26.978±2.23,尼达尼布在各肠段均有吸收,无显著性差异（P>0.05）,表明NDNB为全肠段吸收;尼达尼布自微乳组在各肠段的吸收明显高于尼达尼布溶液组（P<0.01）,3h全肠段尼达尼布自微乳总累计吸收率比溶液组高73.59%,表明制备成自微乳制剂可提高其吸收速率;考察浓度为10μg·mL^-1、40μg·mL^-1、80μg·mL^-1的尼达尼布自微乳在吸收相对较高的空肠段的吸收情况,吸收速率常数Ka和吸收百分率（%）与药物浓度无关,无显著性差异（P>0.05）,表明药物浓度在10⁸0μg?mL^-1的范围内,肠段对尼达尼布自微乳的吸收量与浓度呈正相关,确定尼达尼布自微乳的吸收机制为被动扩散。第五章尼达尼布自微乳体内药动学研究本章建立高效液相色谱法尼达尼布体内分析方法。建立尼达尼布体内含量测定的标准曲线,并对建立的测定方法进行方法学验证,结果表明尼达尼布体内含量测定方法符合方法学要求。本章节采用灌胃方式对SD大鼠进行口服给药后,考察尼达尼布溶液组、尼达尼布自微乳组给药后的血药浓度随时间的变化曲线。通过非隔室模型拟合得到两组的体内药动学参数,结果显示尼达尼布溶液和尼达尼布自微乳对应的T_max分别为3h、2h,C_max分别为2.6505μg·mL^-1、6.084μg·mL^-1,AUC_0-12值分别为12.7