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文档简介
第二十章金免疫技术教学目标掌握胶体金免疫渗滤技术及免疫层析技术的基本原理及技术要点。熟悉胶体金免疫技术的方法学评价。了解金免疫技术试剂盒的组成。知识目标技能目标掌握金免疫技术的操作方法、正确判读和分析结果。思政-素质目标临床免疫学思维、生物安全、质控意识、责任意识。胶体金免疫渗滤技术的检测原理、方法类型和关键技术。胶体金免疫层析技术的检测原理、方法类型和关键技术。金免疫技术的方法学评价及临床意义。本章要点胶体金免疫层析技术二三一胶体金免疫渗滤技术金免疫技术的评价与应用目录免疫渗滤试验始创于1985年,最初以酶作为标记物。20世纪90年代初金免疫渗滤技术得到了快速发展,用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标志物等。目前临床中用于检测尿液HCG的“金标”早孕诊断试剂就是应用这种方法。一胶体金免疫渗滤技术将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素膜上,制成抗原或抗体包被的微孔滤膜并贴置于吸水材料上,依次在膜上滴加标本、免疫金及洗涤液等,液体很快渗入吸水材料中,阳性反应即在膜上呈现红色斑点。一、检测原理二、方法类型双抗体夹心法测抗原
间接法测抗体
胶体金反应板胶体金标记物洗涤液抗原参照品或抗体阳性对照品
三、关键技术(一)试剂盒组成1将反应板平放于实验台面上,于小孔内滴加含待测抗原的标本1~2滴,待完全渗入,待测抗原与膜上的抗体反应而结合在膜上。2于小孔内滴加胶体金标记抗体试剂1~2滴,待完全渗入,使胶体金标记抗体与结合在膜上的待测抗原反应。
(二)技术要点3于小孔内滴加洗涤液2~3滴,待完全渗入,洗去未结合的胶体金标记抗体。4在膜中央有清晰的淡红色或红色斑点显示者判定为阳性反应;反之则为阴性反应。斑点呈色
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