生物信息学及其在环境微生物研究中的应用及生物安全量值溯源传递实验室环境控制

-生物信息学及其在环境微生物研究中的应用摘要生物信息学的快速发展，推动了微生物信息学的建立。模式微生物基因组学的研究,极大地丰富了生物信息学的内容。微生物结构基因组学和功能基因组学研究试图揭示基因结构与功能的内在联系，绘制出基因调控网络图。基因组功能注释是功能基因组学研究的主要目的。基因芯片技术的运用，成为环境微生物生态研究和功能酶基因定位的有力工具。生物信息学为环境微生物的研究和发展提供了一个崭新的信息平台和技术手段。介绍了一些相关数据库和专业网站。关键词生物信息学微生物信息学环境微生物基因芯片

随着人类基因组计划（HGP）的实施，生物信息学应运而生，成为21世纪自然科学的核心领域，同时推动微生物信息学的建立。微生物因其分布广、种类多、易繁殖和变异、遗传基因多样性等特点，被广泛用作“模式生物”来研究，极大地促进了生物信息学的发展。人们在深入研究自然环境中微生物的群落、结构、功能与动态［1］，研究污染环境中的微生物生态［2］、通过环境微生物学方法和原理进行环境监测与评价［3］、研究并阐明微生物、污染物与环境三者间的相互关系与作用规律，对保护环境、造福人类社会具有十分重要的意义。生物信息学的快速发展,为这一研究领域注入了新的活力［4］。通过生物信息学研究平台,能够实时在线检索丰富的微生物资源,可以共享环境微生物基因组信息。基因芯片技术为快速全面准确地分析检测和鉴定各种环境微生物，充分挖掘自然界丰富的微生物资源提供了一种新的方法［5］。通过环境微生物降解有机污染物，消除大气、土壤和水体污染，为污染物生物修复开辟了一条有效途径。很多专业网站提供相关的资源信息［6］。1微生物资源数据库近年来,高度发展的互联网为微生物学的信息交流、资源共享和国际合作带来了前所未有的机遇。很多大型网站和一些微生物专业网站提供了丰富而又详实的微生物资源实时在线信息。借助强大的搜索引擎,在庞大的电子期刊数据库中，可以很方便地实时查找所需的文献。虚拟图书馆则提供了丰富的有关微生物方面的文档、音像素材、软件以及其它各种数据库等。在网上虚拟实验室，可进行电子Northern、电子PCR分析等。通过全球共享的生物信息学专业数据库（GeneBank/EMBL/DDBJ）很方便地提交和检索微生物基因序列。尽管微生物学的发展只有短短的100多年,但新发现的微生物却层出不穷。据《国际微生物学会联盟通讯》有关专家估计，全球约有50~60万种微生物，至今已被研究和记载的约为10%，包括3500多种细菌，9万多种真菌，10万多种藻类和原生动物及4千多种病毒等。如此丰富的微生物资源是大自然赐给人类的一笔宝贵财富。为共享这些资源,世界各国均已建立了各自相应的菌种数据库（表1）。用户根据菌种的部份特征，检索所要查找的微生物，获得如生化鉴定指标、分类依据和培养条件等详细信息。2微生物信息学的建立和发展自人类基因组计划(HGP)实施以来,生物信息学得到了飞速发展,并有力地推动了环境微生物学的研究，促进了微生物基因组学、微生物功能基因组学和微生物结构基因组学的建立和发展。HGP的主要目标是表1微生物菌种资源及分类数据库Table1Dataofmicrobialstrainsandcategoryresources名称〖〗网址美国菌种保藏中心(ATCC)〖〗/中国典型培养物保藏中心(CCTCC)〖〗/中国一般微生物典藏中心(CGMCC)〖〗/typecc/junzhong/en.html国际纯培养联盟(WFCC)〖〗/国际微生物数据中心(WDCM)〖〗http://wdcm.nig.ac.jp/国际微生物性状计算机编码系统(RKC)〖〗/RKC.html国际微生物菌种数据网络(MSDN)〖〗/msdn.shtml日本微生物保藏中心（JCM）〖〗http://www.jcm.riken.go.jp/JCM/catalogue.html比利时微生物典藏协会（BCCM）〖〗http://www.belspo.be/bccm/澳大利亚微生物典藏中心(ACM)〖〗/database/catalogsc.html测定人类基因组全部序列,进而阐明基因所处的位置、结构、功能、表达调控方式以及重大疾病的致病机理。为完成人类基因组特别是功能基因组计划,相继启动了模式生物基因组计划。一些微生物如埃希氏大肠杆菌(Escherichiacoli)、嗜血流感菌(HaemophilusInfluenzae)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)等模式微生物研究发挥了重要作用。对这些模式微生物基因组的研究，不仅是微生物自身研究领域的重大突破和发展，也是对生物信息学内容的丰富和补充。2.1微生物基因组学基因组序列测定使微生物研究手段发生了革命性改进。由于细菌基因组规模较小,因此完成测序的也较多。自全长1.8Mb的嗜血流感菌(Haemophilusinfluenzae,Rd)基因组序列于1995年发表以来，已有229种微生物基因组部分或全序列完成测序（/genomes/MICROBES/Complete.html），包括21种古细菌，208种真细菌。其中,包括大肠杆菌、酿酒酵母等模式微生物在内的10多种微生物全基因组序列完成测序。TIGR微生物基因组数据库（/tdb/mdb/mdbinprogress.html）显示，2005年预期将有超过40种微生物基因组完成测序。表2列出了已完成测序的微生物基因组数据库网站。2005,25(12)郑永良等：生物信息学及其在环境微生物研究中的应用中国生物工程杂志ChinaBiotechnologyVol.25No.122005表2微生物基因组学及模式微生物基因组学数据库Table2Microbialgenomicsandmodelmicrobialgenomicsdata名称〖〗网址〖〗说明EMGLIB〖〗http://pbil.univlyon1.fr/emglib/emglib.html〖〗完成测序的细菌和酵母基因组NRsub〖〗http://pbil.univlyuonl.fr/nrsub/nrsub.html〖〗枯草芽胞杆菌（Bacillussubtilis）基因组RsGDB〖〗http://www/sphaeroids〖〗Rhodobactersphaeroides基因组SGD〖〗〖〗酵母基因组EcoCyc〖〗/ecocyc〖〗大肠杆菌（K12）基因组、基因产物及代谢通路CyanoBase〖〗http://www.kazasa.or.jp/cyano/〖〗Synechocystissp.基因组2.2微生物结构基因组学与功能基因组学微生物结构基因组学和功能基因组学以结构和功能为出发点，通过测定出全部蛋白质分子与其他生物分子复合体的精细三维结构，以获得一幅完整的、能够在细胞中定位以及在各种生物学代谢途径、生理途径、信号传导途径中全部蛋白质在原子水平的三维结构全息图。利用结构基因组学所提供的信息，以高通量、大规模实验方法与计算机分析相结合，全面系统地分析全部基因的功能。通过比较基因组学研究，揭示基因、基因家簇的起源和功能及其在进化过程中复杂化和多样化的机制。一些微生物结构基因组学及功能基因组数据库相关网站见表3。功能基因组学的研究主要包括以下几个方面的内容：（1）进一步识别基因及其基因转录调控信息，分析遗传语言；（2）基因组功能注释；（3）基因的表达调控机制，绘制基因调控网络图；（4）比较基因组学研究，在基因组水平对各个生物进行对照比较，揭示生命的起源和进化、发现蛋白质功能。其中基因调控网络则试图从系统角度，通过基因之间相互作用规律来揭示复杂的生命现象。这是功能基因组学研究的重要内容。其研究的目的和内容主要有：从基因表达谱识别和推断基因网络的结构、特性和调控关系；认识复杂分子的调控过程；理解支配基因表达和功能的基本原则；揭示基因表达过程中的信息传输规律；从整体框架研究基因的功能等［8］。表3一些微生物结构基因组学及功能基因组数据库Table3Dataofmodelmicrobestructuralgenomicsandfunctionalgenomics名称〖〗网址〖〗说明AresLabIntronSite〖〗/research/compbio/yeast_introns.html〖〗酵母剪接体和内含子DBTBS〖〗http://elmo.ims.utokyo.ac.jp/dbtbs〖〗枯草杆菌反式作用因子和启动子PromEC〖〗http://bioinfo.md.huji.ac.il/marg/promec〖〗位于转录起始位点的大肠杆菌mRNA启动子RRNDB〖〗〖〗原核生物核糖体RNA操纵子中的变化DPinteract〖〗/dpinteract〖〗大肠杆菌DNA结构蛋白的结合位点TRIPLES〖〗/triples/triples.html〖〗酵母中转座子插入表型、表位和表达GenProtEC〖〗/〖〗大肠杆菌（K12）基因组、基因产物和同源性SignalP〖〗http://www.cbs.dtu.dk/servics/signalp〖〗细菌和真核生物蛋白质的信号肽及剪切位点应用生物信息学方法，高通量地注释基因组所有编码产物的生物学功能，进行基因组功能注释是功能基因组学的主要研究目标。序列同源性分析、生物信息关联分析、生物数据挖掘是进行基因功能注释的主要生物信息学手段。其研究内容主要涉及基因组组成元素的识别、全部ORF产物功能注释、基因相互作用和比较基因组学研究等三个层次［9］。很多数据库可通过相应软件或在线平台进行基因功能注释提交或查询（表4）。值得一提的是，国内也相继建立了基因组功能注释系统研究平台，并提供WEB形式服务。赵贵军等［10］建立的微生物基因信息平台可以按照基因序列号、功能和种属名查询基因序列，根据美国国家信息中心(NCBI)的功能代码表对每个基因进行自动和手工分类，可查询分类情况，并在此基础上建立了几种亲缘关系相近的种属的同源基因相互注释功能。禹胄等［11］建立的微生物基因组注释系统（MGAP）由基因组注释系统和基于Web的用户接口程序两部分组成。基因组注释系统整合多个基因识别、功能预测和序列分析软件,以及蛋白质序列数据库、蛋白质资源信息系统和直系同源蛋白质家族数据库等,并应用于蓝细菌基因组的注释。表4基因组功能注释相关网站Table4Websofgenomefunctionannotation名称〖〗网址〖〗说明MGA〖〗http://www.dkfz.de/mga/〖〗大规模基因组注释系统COG〖〗/cgibin/COG〖〗直系同源体簇分析数据库AAT〖〗/aat〖〗基因组分析和注释工具EcoCyc〖〗/ecocyc/ecocyc.html〖〗大肠杆菌的基因与代谢CMR〖〗/tigrscripts/CMR2/CMRGenomes.spl〖〗来自TIGR微生物基因组注释工具SAS〖〗http://www.biochem.ucl.ac.uk/cgi2bin/sas/query.cgi〖〗结构为基础的基因组序列分析SGD〖〗/〖〗酵母基因组数据库Indigo〖〗0:1234/Indigo/〖〗E.coli和B.subtilis全基因组综合信息数据库HAMAP〖〗/sprot/hamap/index.html〖〗微生物蛋白质组自动编码注释系统ARCHAIC〖〗http://www.aist.go.jp/RIODB/archaic/〖〗古细菌核酸序列分析数据库ExPASy〖〗http://www.expasy.ch/〖〗蛋白质专家分析系统3生物信息学在环境微生物研究中的应用近年来，环境微生物学的研究不仅仅局限于自然环境中微生物生态学的研究，随着人类活动的加剧，环境污染直接威胁人类社会可持续发展，对污染生态学的研究也正在逐渐深入。建立在现代分子生物学和生物信息学基础上的基因芯片技术的运用，使环境微生物研究实现了革命性的飞跃［12］。3.1基因芯片在环境微生物研究中的应用环境微生物在自然界以群落的形式存在，多种微生物共同生活于一定区域。了解微生物群落的结构和组成以及它们对环境干扰的反应和适应性,有助于维持和恢复生态系统理想的生态功能。因为自然环境中仅有小于1%的微生物能人工培养,所以对自然环境中微生物群落的定性、定量和种群的检测是微生物学家面临的严峻挑战［13］。已经证明采用传统培养技术研究环境中的微生物群落是困难的。通过生物信息学并结合分子生物学技术进行微生物群落研究已取得了较大突破。其中基因芯片因具有高密度、高灵敏度、实时快速检测、经济、自动化和低背景水平等特点,而广泛应用于包括自然环境中微生物的基因表达分析、比较基因组分析和混合微生物群落的分析等方面。目前，应用于环境微生物研究的基因芯片主要有功能基因芯片(FGAs)、系统发育的寡核苷酸芯片(POAs)和群落基因组芯片(CGAs)［14,15］。其中，功能基因芯片（FGAs）利用寡核苷酸探针来探测一些基因的表达或编码一些重要的酶基因，包括与不同生物地理化学过程相关的基因,并根据具有特定功能且已知基因序列的微生物菌群设计寡核苷酸探针来探测未知环境样品中的微生物群落,确定该样品微生物群落的功能,并将特定微生物群落菌群与其功能联系起来。一些学者在这方面研究已取得一定成果，找到了编码氮素降解酶［16］、氨氧化酶［17］、硝化(氨单氧化酶基因,amoA)、反硝化(亚硝酸盐还原酶,nirS和nirK)［18］、氮的固定(固氮酶,nifH)，以及有机污染物降解功能酶如有机磷水解酶OPH等基因［19，20］。基因芯片将成为研究环境微生物生态的有力工具。3.2生物信息学在环境微生物降解有机污染物研究中的应用随着环境污染的不断恶化，利用微生物进行环境污染物的监测和评估，从事环境污染的微生物修复研究已日益深入。如利用石油降解微生物处理油井泄漏及海面石油污染，采用极端耐冷的微生物降解极地或寒冷环境下的污染物，利用土壤中微生物降解土壤农药残留，通过环境微生物硝化和反硝化作用净化水体等。互联网有很多污染治理与综合管理的专业数据库,目前绝大多数免费共享。如：(1)美国明尼苏达大学生物催化与生物降解数据库（http://）。从化合物、酶、降解性微生物三个层次，提供了145种代谢途径、945种酶促反应、345种功能菌株、890种化合物和604种酶，并有完整代谢过程数据和途径示意图［21］。可以很方便查询所需信息，甚至可以对可能的降解途径进行预测。(2)美国密歇根州立大学降解性菌株数据库（）。提供了约250种降解菌株的降解特性、酶促反应过程以及150种环境危险品信息［22］。(3)美国农业研究中心(ARS)的农药特性信息数据库(PPD)（/ppweb）。提供300多种正在广泛使用的杀虫剂信息，涉及它们在环境中转运和降解途径的10多种最重要的物化特性。参考文献［1］孔维栋,朱永官,傅伯杰,等．农业土壤微生物基因与群落多样性研究进展．生态学报,2004，24（12）：2894~2898KongWD,ZhuYG,FuBJ,etal.ActaEcologicaSinica,2004，24（12）：2894~2898［2］KantachoteD,NaiduR,SingletonI,etal.ResistanceofmicrobialpopulationsinDDTcontaminatedanduncontaminatedsoils.AppliedSoilEcology,2001(16):85~90［3］NikolayS,DistlerM,ShannonC,etal.Multipathogenoligonucleotidemicroarrayforenvironmentalandbiodefenseapplications.BiosensorsandBioelectronics,2004(20):684~698［4］EllisLBM.Environmentalbiotechnologyinformatics.CurrentOpinioninBiotechnology,2000,(11):232~235［5］张于光,李迪强,肖启明,等．基因芯片及其在环境微生物研究中的应用．微生物学报，2004，44(3)：406~410ZhangYG,LiDQ,XiaoQM,etal.ActaMicrobiologicaSinica,2004，44(3)：406~410［6］LyndaBM,EllisBoKH,WenJK,etal.Theuniversityofminnesotabiocatalysis/biodegradationdatabase:postgenomicdatamining.NucleiAcidRes,2003,31(1):262~265［7］ShiangMQ,BarkovskiiAL,PeterA,Microbialdechlorinationofdioxinsinestuarineenrichmentcultures:effectsofrespiratoryconditionsandprimingcompoundoncommunitystructureanddechlorinationpatterns.MarineEnvironmentalResearch,2005(59):177~195［8］雷耀山，史定华，王翼飞．基因调控网络的生物信息学研究．自然杂志，2003，26(1),6~12LeiYSH,ShiDH,WangYF.JournalofNature,2003，26(1),6~12［9］解涛,梁卫平,丁达夫．后基因组时代的基因组功能注释.生物化学与生物物理进展,2000,27(2)：166~170XieT,LiangWP,DingDF.ProgBiochemBiophys,2000,27(2)：166~170［10］赵贵军，何智良，卢阳,等．微生物基因组的生物信息学研究平台的建立．微生物学通报,2002,29（4）：22~28ZhaoGJ,HeZHL,LuY,etal.Microbiology，29（4）：22~28［11］禹胄,李涛,蔡涛,等.微生物基因组注释系统MGAP.微生物学报,2003，43（6）：805~808YuZ,LiT,CaiT,etal.ActaMicrobiologicaSinica.2003，43（6）：805~808［12］LiuWT,LiangZH.Environmentalmicrobiologyonachipanditsfutureimpacts.TrendinBiotechnology,2005,23(4):174~178［13］AmannRI,LudwigW,SchleifeKH.Phylogeneticidentificationandinstiudetectionofindividualmicrobialcellswithoutcutltivation.MicrobialRev,1995,59(3):143~169［14］WuL,ThompsonDK,LiG,etal.Developmentandevalutionoffunctionalgenearraysfordetectionofselectedgenesintheenvironmentalstudiesinmicrobiology.ApplEnvironMicrobial,2001,67(12):5780~5790［15］ZhouJ,ThompsonD.Microarrays:applicationsinenvironmentalmicrobiology.In:BittonGed.EncyclopediaofEnvironmentalMicrobiology.NewYork:JohnWiley&SonsPress,2002.1968~1979［16］BrakerG,ZhouJ,WuLY.Nitritereductasegenes(nirKandnirS)asfunctionalmarkerstoinvestigatediversityofdenitrifyingbacteriainpacificnorthwestmarinesedimentcommunities.ApplEnvironMicrobiol,2000,66:2096～2104［17］NoldSC,ZhouJZ,DevolA,etal.PacificnorthwestmarinesedimentscontainammoniaoxidizingbacteriainthesubdivisionoftheProteobacteria.ApplEnvironMicrobiol,2000,66:4532～4535［18］PriemA,BrakerG,TiedjeJM.Diversityofnitritereductase(nirKandnirS)genefragmentsinforesteduplandandwetlandsoils.ApplEnvironMicrobiol,2002,68:1893～1900［19］ZhouJ,ThompsonDK.Challengeinapplyingmicroarraystoenvironmentalstudies.CurrOpinBiotechnol,2002,13(3):204~207［20］MetheuBA,NelsonKE,EisenJA,etal.GenomeofGeobactersulfurreducens:metalreductioninsubsurfaceenvironments.Science,2003,1967～1969［21］EllisLBM，HershbergerCD，WackettLP.Theuniversityofminnesotabiocatalysis/biodegradationdatabase,specializedmetabolismforfunctionalgenomics.NucleAcidRes，1999，27:373~376［22］UrbanceJW,JamesC,PaulS,etal.BSD:Thebiodegradativestraindatabase.NucleAcidRes,2003,31(1):152~155BioinfomaticsandTheirApplicationtoEnvironmentalMicroorganismZHENGYongliang1LIPing1LIUDeli1,2(1CollegeofLifeScience,CentralChinaNormalUniversityWuhan430079,China)(2KeyLaboratoryofPesticide&ChemicalBiologyMinistryofEducation,CentralChinaNormalUniversityWuhan430079,China)AbstractThefasterdevelopmentofbioinformaticspromotedtheestablishmentofmicrobebioinformatics.Thestudyofmodelmicrobialgenomicsgreatlyenrichedthecontentsofbioinfomatics.Microbialstructuralgenomicsandfunctionalgenomicstrytoilluminatetheinnerrelationbetweengenestructureandfunction,andconstructedgeneregulatorynetworks.Toannotategenefunctionisthemainaimforfunctionalgenomicsreseach.Theapplicationofgenechipbasedonbioinfomaticsbecameastrongertoolforenvironmentalmicrobialecologicalstudyandgenedeterminationoffunctionenzyme.Anewinformationplatformandtechnologymethodforenvironmentalmicroorganismstudywasaffordedbybioinfomatics.Somerelevantdataandusefulwebsiteswerecollectedandintroduced.KeywordsBioinformaticsMicrobialBioinformaticsEnvironmentalmicroorganismGeneChip中国生物工程杂志ChinaBiotechnology,2005,25(12):97～102生物安全量值溯源传递实验室环境控制摘要本文以中国计量科学研究院生物安全量值溯源传递实验室工程项目为例，从通风空调的角度探讨了生物安全防护实验室的环境控制，并在此基础上，给出了最不利状况即送排风系统出现运行故障时避免房间出现正压，确保安全运行的具体做法，以期能对类似项目的设计、施工和运行起到一定参考和指导作用。关键词生物安全实验室通风空调排风系统故障正压EnvironmentControlofBiosafetyValueTraceabilityandDeliveryLaboratoryWangHongjunandJiangWeikangAbstractBasedonthebiosafetyvaluetraceabilityanddeliverylaboratoryinNationalInstituteofMetrology,discussesaboutenvironmentcontrolofbiosafetylaboratoryfromthepointofairconditioningandventilation.Onthisbasis,andrepresentssomedetailapproachofbiosafetylabsaferunning,toensureroomnon-positivepressureintheworstcase,namelytheexhaustsystembreakingdown.Theintroductionmightbeusefulinthedesign、constructionandrunningofsimilarprojects.KeywordsBiosafetylaboratory;Airconditioningandventilation;Exhaustsystem;Breakingdown;Non-positivepressure0.引言中国计量科学研究院生物安全量值溯源传递实验室位于昌平实验基地12号实验楼B区，单层框架钢结构，檐高10米，总建筑面积约160平方米，内部实验环境参照三级（P3）生物安全实验室控制，主要从事国家“十一五”科技支撑计划项目“生物安全量值溯源传递关键技术”课题研究，其中包括“转基因核酸量值溯源传递关键技术研究”、“病源微生物核酸量值溯源传递关键技术研究”、“转基因蛋白质量传溯源核心技术及标准物质研究”和“病原微生物蛋白质毒素计量关键技术研究”，以及国家科技重大专项课题任务“转基因产品标准物质研制技术研究”和“转基因植物分子特征检测关键技术及相关计量与校准技术研究”，科研经费多达一千多万元。该项研究成果将能够发展和完善我国生物计量技术，确保1系统设计1.1平面布置生物安全量值溯源传递实验室布局设计上从安全使用、科学管理两个方面着手，在充分借鉴国内外ABSL-3生物安全实验室的布局、分区的基础上，结合实验区内各实验室的工艺流程，确定了采用“三区一通道”布置方案[1]，将实验区划分为污染区、半污染区、清洁区。各区之间设置缓冲间进行隔离，防止病菌微生物外逸，确保各区安全、可靠运行，如图1所示。图1生物安全量值溯源传递实验室平面布置图1.2净化空调系统1.2.1温湿度和洁净度P3实验室内工作人员在工作时身穿防护服、头戴防护罩，全身上下透气性较差，因此，室内温湿度控制主要考虑工作人员的舒适度，本设计将温度定为18~26℃，湿度30~60%。另外，由于该实验室属生物洁净室范畴，既要考虑尘埃数又要计量细菌数。为保证安全运行，负压控制要求严格，而对室内洁净度要求并不甚高，经综合考虑，将主要从事细菌类生物实验的污染区和半污染区确定为洁净度7级。换气次数按照净化级别计算，但对配有生物安全柜的实验室，为保证室内压力稳定，适当扩大换气次数。1.2.2冷热源选择由于P3实验室空调系统是直流式系统，能量消耗大，运行费用高，并且在发生突发性公共卫生事件时需要24小时工作等特点，如设计冷源设备与该实验楼其它房间合用，显然不合理，因此，确定采用单独的直接膨胀式空调机作为P3实验室的冷源，而冬季和过渡季节热源则由院区区域锅炉房提供。1.2.3送排风系统P3实验室是负压洁净实验室，采用的是全新风系统。所有新风经初、中效等各功能段处理后，经系统末端高效过滤器送至实验室及辅助房间。对该实验室而言，良好的气流组织，以使室内气流从污染程度低处流向高处，尽可能减少实验室回流和涡旋，将污染空气有效地排出，确保实验人员安全尤为重要。为此，本工程采用了生物安全柜和实验室共用一个排风系统的新型排风方案，如图2，正常工作时，文丘里阀P1排风恒定，分析仪器实验室和缓冲间室内为负压，通过PID控制器调节送风文丘里阀S1和S3流量来维持室内负压恒定；当控制器得生物安全柜开机信号后，按照预置风量配方表逐渐改变文丘里阀S2、P2、P1风量，保持P2-S2+P1恒定，同时检测室内负压，通过PID控制器调节文丘里阀S1流量来维持室内负压恒定。从而解决了由于某一实验室生物安全柜的启停造成其他相邻房间负压差变化的问题[2]。图2生物安全量值溯源传递实验室送排风方案1.2.4压力控制合理的压力梯度关系到P3实验室的正常运行和