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文档简介

异叶败酱提取物DI对胃癌细胞的抑制作用及机制研究目的:异叶败酱是一种传统的中药,其根和根茎富含挥发油,具有一定的药用价值,民间用于治疗子宫癌和宫颈癌。我们的前期研究通过对异叶败酱有效成分的分离提取,得到了一种具有抗肿瘤活性的化合物单体Deacetylisovaltratum(DI)。本研究旨在探讨DI对人胃癌细胞AGS和HGC-27的作用,并对其可能的机制进行初步探讨,为抗肿瘤候选药物的筛选和研究提供实验基础和开发方向。方法:采用MTT法检测DI对不同类型的肿瘤细胞的增殖抑制作用,同时进行集落形成实验检测细胞增殖变化;采用流式细胞技术检测DI作用后细胞周期变化以及细胞凋亡率;采用Hoechst33258荧光染色法观察DI作用后细胞的凋亡情况;采用JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;采用Westernblot法检测相关蛋白的表达;以及采用Tubulin聚合实验观察细胞微管的变化。结果:DI能抑制多种实体瘤细胞的增殖,对胃癌细胞AGS和HGC-27在72h的IC50分别为5.78±0.12μM和14.07±0.55μM。随着浓度的增加也能抑制AGS和HGC-27细胞的集落形成;流式细胞技术结果表明DI能引起人胃癌细胞AGS和HGC-27的G2/M期阻滞,而Tubulin聚合实验结果显示DI能促进细胞微管聚合,抑制有丝分裂,使细胞阻滞在M期;Westernblot结果显示,一定浓度的DI作用不同时间后,AGS和HGC-27的p-Chkl蛋白表达量上升,而cdc25c和cdc2蛋白表达则逐渐下调。DI还能通过改变线粒体膜通透性,激活caspase3,引起PARP的切割,最终诱导AGS和HGC-27细胞凋亡。结论:DI可能通过调控Chkl-cdc25c-cdc2通路,促进微管聚合抑制解聚,抑制

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