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文档简介

第十单元现代生物科技专题

学案49基因工程

【考纲要求】1.基因工程诞生(I)o2.基因工程原理及技术(n)。3.基因

工程应用(n)。4.蛋白质工程(I)。

一、基因工程概念

基因工程:又叫做技术或技术,是按照人们意愿,

把一种生物某种基因提取出来,加以,然后放到另一种生物

细胞里,地改造生物遗传性状。

二、基因工程操作工具

1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀",又称为O

特点:能够识别DNA特定_____________,切开两个之间

限制酶切割DNA产生末端有两种形式:与o

2.DNA连接酶——“分子缝合针”

作用:将双链_______“缝合”起来,恢复被限制酶切开两个核甘酸

之间O

3.基因进入受体细胞载体—“分子运输车”

⑴常用载体:O

⑵质粒载体特点:①能够在细胞内并稳定保存。②具有一个

或多个,便于外源DNA片段插入其中。③具有特

殊,供重组DNA鉴定与选择。

三、基因工程根本操作程序

第1页

1.目基因获取:⑴从中获取;(2)利用

扩增目基因;⑶合成。

2.构建(核心)

⑴目:使_______基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一

代,使目基因能够表达与发挥作用。

3.将目基因导入受体细胞(转化)

⑴将目基因导入植物细胞:常用方法有法、基因枪法与

__________法。

⑵将目基因导入动物细胞:常用方法是_______法。

⑶将目基因导入微生物细胞:受体细胞飞魄-

含耳5'麟陶洲,感受态细胞吸

收DNA分子

4.目基因_______与o

探究点一基因工程概念及操作工具

1.基因工程概念是什么?

2.完成理解基因工程操作工具比拟表:

限制性核酸内切酶DNA连接酶(分

工程运载体(分子运输车)

(分子手术刀)子缝合针)

识别特定______序一般作用于两能够在宿主细胞中___

特性

列,并在条具有一样并稳定—;具有一个或

或条

__________切割______DNA分一个限制酶切位点;具

DNA分子子有―基因

第2页

提取—基因,切构建重组DNA将_______转移到宿主

作用

割—分子细胞中并大量复制

将DNA分子切成一样黏性末端

结果DNA片段,产生之间形成形成重组_______

___末端_______键

思维拓展

1.对基因工程概念理解

基因拼接技术或DNA重

别名

组技术

操作环境生物体外

操作对象基因

操作水平DNA分子水平

剪切一拼接一导入一表

根本过程

结果人类需要基因产物

与杂交育种克制远缘杂交不亲与障

相比碍

与诱变育种

定向改造生物性状

相比

原理基因重组

2.在切割目基因与载体时要求用同一种限制酶,目是产生一样黏性末

辆,kill。

第3页

3.将一个基因从DNA分子上切割下来,需要2个限制酶,同时产生

4个黏性末端。

4.不同DNA分子用同一种限制酶切割产生黏性末端都一样,同一个

DNA分子用不同限制酶产生黏性末端可能一样。

避究例如1](2021•全国理综D,5)以下表达符合基因工程概念是

()

A.B细胞与肿瘤细胞融合,杂交瘤细胞中含有B细胞中抗体基因

B.将人干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌,获得能产生人干扰

素菌株

C.用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,通过筛选获得青霉素

高产菌株

D.自然界中天然存在噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌

DNA上

听课记录:

探究点二基因工程根本操作程序

1.完成基因工程根本操作流程图:

2.完成目基因检测与鉴定表,并加以理解、掌握:

类型步骤检测内容方法

分目基因是否插入受体_______________(D

第一步

子细胞染色体DNA上NA与DNA之间)

水目基因是否转录出_______杂交技术

第二步

平mRNA(DNA与mRNA之间)

第4页

蛋白质分子杂交

目基因是否翻译出蛋

第三步(_____________杂交

白质

法)

___水

——法或—法

平鉴定

思维拓展

1.在整个工程中,只有第三步将目基因导入受体细胞过程中不发生

碱基互补配对,其他步骤均发生配对。

2.切割质粒与目基因限制酶必须是同一种酶,以获得一样黏性末端,

利于基因表达载体构建。

3.插入目基因只是构造基因局部,其表达需要调控序列,因而用作

载体质粒插入部位前须有启动子,后须有终止子。

4.PCR技术与DNA复制比拟

PCR技术DNA复制

DNA双链复制(碱基互补配对)

同四种游离脱氧核甘酸

模板、ATP、酶等

不解

DNA在高温下变性解旋解旋酶催化

同旋

第5页

点方

体外复制主要在细胞核内

热稳定DNA聚合酶(Taq细胞内含有DNA聚

酶)合酶

结在短时间内形成大量

形成整个DNA分子

果DNA片段

豚究例如2](2021•浙江卷,6)将ada(腺甘酸脱氨酶基因)通过质

粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺甘酸脱氨酶。以下表达错误是

()

A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒

B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点

C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada

D.每个插入ada至少表达一个腺甘酸脱氨酶分子

听课记录:

探究点三基因工程应用

完成基因工程应用表格,了解应用成果。

转基因生物目基因成果举例

植抗虫基因:Bt毒蛋

抗虫转基因植抗虫水稻、抗虫棉、

物白基因、蛋白酶抑

物抗虫玉米

基制剂基因、淀粉酶

第6页

因抑制剂基因、植物

工凝集素基因

程抗——基因:病毒

外壳蛋白基因、病

抗病毒烟草、抗病

抗病转基因植毒复制酶基因;抗

毒小麦、抗病毒番

物——基因:几丁质

茄、抗病毒甜椒

酶基因、抗毒素合

成基因

抗逆转基因:渗透

抗盐碱与抗干旱烟

抗逆转基因植压调节基因、抗冻

草、抗寒番茄、抗

物蛋白基因、抗除草

______大豆与玉米

剂基因

优良性状基因:提

高必需氨基酸含量

高______玉米、耐

蛋白质编码基因、

储存番茄、新花色

转基因植物控制番茄成熟基

矮牵牛

因、与花青素代谢

有关基因

动提高生长速度转基因绵羊、转基

基因

物转基因动物因鲤鱼

基生产药物药用蛋白基因+乳

—生物反响器

因转基因动物腺蛋白基因启动子

第7页

工改善畜产品品质乳汁中含乳糖较少

________基因

程转基因动物转基因牛

外源抗原决定基因

利用克隆技术培育

作器官移植供体表达——因子或除

没有免疫排斥反响

转基因动物去供体——决定基

猪器官

基治疗______免疫缺

体外基因治疗腺甘酸脱氨酶基因

因陷症

治治疗囊性纤维化病治疗______囊性纤

体内基因治疗

疗基因维化病

思维拓展基因治疗是治疗人类遗传病根本方法,但由于尚未全面了

解基因调控机制与疾病分子机理,基因治疗只处于初期临床试验阶段。

【探究例如3](2021•上海综合能力测试)运用转基因技术培养单细

胞“工程硅藻”,可把光合作用合成有机物以脂质形式储存起来。科

学家方案在海水中大量培养“工程硅藻",捕捞后从中提炼“生物柴

油"。与矿物柴油相比,使用这种“生物柴油”优点是()

①可再生②不显著增加碳排放③不排放含硫废气

④不会对生态环境造成负面影响

A.①②③B.①③④

C.①②④D.②③④

听课记录:

探究点四蛋白质工程

第8页

1.蛋白质工程概念

蛋白质工程是指以蛋白质分子构造规律及其与生物功能关系作为根

底,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋

白质进展改造,或制造一种新蛋白质,以满足人类生产与生活需求。

2.蛋白质工程过程填充

蛋白质工程过程:其根本途径是从预期蛋白质功能出发一设计预期蛋

白质-推测应有序列一找到相对应

序列()o其流程图如下:

思维拓展

1.对蛋白质工程概念应从以下几个方面理解

⑴蛋白质工程根底:蛋白质分子构造规律及其与生物功能关系;⑵

蛋白质工程实质:改造控制该蛋白质合成基因;⑶蛋白质工程产物:

产生新蛋白质,是自然界所没有。

2.蛋白质工程是在基因工程根底上,延伸出来第二代基因工程。因

为对现有蛋白质改造或制造新蛋白质,必须通过基因修饰或基因合成

实现。

【探究例如4】以下关于蛋白质工程说法正确是()

A.蛋白质工程以基因工程为根底

B.蛋白质工程就是酶工程延伸

C.蛋白质工程就是用蛋白酶对蛋白质进展改造

D.蛋白质工程只能生产天然蛋白质

听课记录:

第9页

题组一基因工程及根本操作

1.(2021•四川卷,5)北极比目鱼中有抗冻基因,其编码抗冻蛋白具

有11个氨基酸重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强。以

下图是获取转基因抗冻番茄植株过程示意图,有关表达正确是()

A.过程①获取目基因,可用于基因工程与比目鱼基因组测序

B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达新基因,不能得到抗冻

性增强抗冻

蛋白

C.过程②构成重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进展筛

D.应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目基因存

在及其完全表达

2.以下图为DNA分子在不同酶作用下所发生变化,图中依次表示限

制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用正确顺序是()

A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②

3.以下关于基因工程表达,不正确是(多项选择)()

A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目基因

B.细菌质粒是基因工程常用运载体

C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目基因DNA,用另一种处理

运载体DNA

D.为培育成抗除草剂作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精

卵为受体

第10页

题组二基因工程应用及蛋白质工程

4.(2021•镇江质检)科学家将干扰素基因进展定点突变导入大

肠杆菌表达,使干扰素第十七位半胱氨酸,改变成丝氨酸,结果

大大提高了B-干扰素抗病毒活性,并且提高了储存稳定性。该生物

技术为()

A.蛋白质工程B.基因工程

C.基因突变D.细胞工程

5.以下关于基因工程及其应用表达正确是()

A.假设要生产转基因抗病水稻,可先将目基因导入大肠杆菌中,再

转入水稻细胞

B.用氨基酸序列推测合成目基因与原基因编码区中外显子一致

C.用DNA探针能检测饮用水中重金属物质含量

D.作为运载体要有多种限制酶切点,但对一种限制酶而言,最好只

有一个切点

6.(2021•南师大附中学情分析)蛋白质工程中,直接需要进展操作

对象是()

A.氨基酸构造B.蛋白质空间构造

C.肽链构造D.基因构造

7.科学家将动物体内能够合成胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重

组,并且在大肠杆菌体内表达成功。请据图答复以下问题:

(1)图中①DNA是以为模板,形成单链DNA,在酶

作用下合成双链DNA,从而获得了所需要基因。

第11页

⑵图中②代表是____________,在它作用下将质粒(DNA)切

出________末端。

⑶图中④表示将o⑤表示DNA随大肠杆

菌繁殖而进展________o

⑷采用蛋白质工程可以对胰岛素进展改造,使之起效时间缩短,保证

餐后血糖顶峰与血液中胰岛素顶峰一致。如果你是科研工作者,请写

出研制速效胰岛素思路。

⑸以下关于蛋白质工程说法不正确是()

A.蛋白质工程能将人抗体某些区段替代鼠单克隆抗体区段,降低鼠

单克隆抗体免疫原性

B.蛋白质工程可对酶催化活性、底物专一性、抗氧化性、热变性、

碱变性等加以改变

C.理论上通过对关键氨基酸置换与增删是进展蛋白质工程唯一方法

D.蛋白质工程崛起主要是工业生产与根底理论研究需要

题组三综合题

8.(2021•安徽理综,31II)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。

将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可提取干扰素用于制药。

⑴进展转基因操作前,需用酶短时处理幼蚕组织,以便获得

单个细胞。

⑵为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库干

扰素基因片段正确插入表达载体与之间。

⑶采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR

第12页

反响体系主要成分应包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖

核甘酸、模板DNA、与

⑷利用生物反响器培养家蚕细胞时,贴壁生长细胞会产生接触抑制。

通常将多孔中空薄壁小玻璃珠放入反响器中,这样可以

增加培养细胞数量,也有利于空气交换。

9.干扰素是病毒侵入人体后由淋巴细胞产生一种免疫活性物质,它

具有广谱抗病毒作用。利用现代生物技术生产干扰素流程如下:

⑴过程①产生物质A是_____,cDNA文库(大于/小于)人基

因组文库。

⑵过程④用到工具酶是,过程⑤需先用

处理受体细胞,过程⑥通常采用技术o

⑶过程⑧与⑨关键技术分别是_______、o

⑷基因工程核心步骤是图中(填标号)。

学案49基因工程

课前准备区

一、基因拼接DNA重组修饰改造定向

二、L限制酶核昔酸序列核甘酸磷酸二酯键黏性末端平末

场上山

2.DNA片段磷酸二酯键3.(1)质粒(2)①自我复制②限制酶切

割位点③标记基因

三、1.⑴基因文库(2)PCR技术(3)人工

第13页

2.基因表达载体⑴目⑵标记RNA聚合终止鉴别筛选

3.⑴农杆菌转化花粉管通道⑵显微注射⑶感受态4.检测

鉴定

课堂活动区

探究点一

1.按照人们愿望,进展严格设计,并通过体外DNA重组与转基因等

技术,赋予生物以新遗传特性,从而创造出更符合人们需要新生物类

型或生物产品,又叫DNA重组技术。

2.核甘酸特定位点黏性末端复制保存多标记目运

载体目基因黏性磷酸二酯DNA

探究例如1B[基因工程是指按照人们愿望,进展严格设计,并通

过体外DNA重组与转基因等技术,赋予生物以新遗传特性,进而创

造出更符合人们需要新生物类型与生物产品。B细胞与肿瘤细胞融合,

属于细胞工程;用紫外线照射青霉菌,使其DNA发生改变,进而筛

选出青霉素高产菌株,属于人工诱变;自然界中天然存在噬菌体自行

感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上,并没有进展人为加工,不属

于基因工程。]

探究点二

1.mRNAPCR基因组文库cDNA文库构建基因表达载体

目基因

2.DNA分子杂交技术核酸分子抗原一抗体个体侵染感染

探究例如2C[大肠杆菌成功表达出腺甘酸脱氨酶,说明这些大肠

第14页

杆菌都至少含有一个重组质粒,A项正确;作为载体条件为至少含有

一个或多个酶切位点,所以作为载体质粒至少含有一个限制性核酸内

切酶识别位点,B项正确;作为基因表达载体应包括目基因、启动子、

终止子、标记基因四局部,但并不是每个酶切位点都至少插入一个

ada,C项错误;由于这些目基因成功表达,所以每个ada至少表达

一个腺甘酸脱氨酶分子,D项正确。]

探究点三

病毒真菌除草剂改进品质赖氨酸外源生长激素乳腺肠

乳糖酶调节抗原复合型遗传性

探究例如3A

探究点四

2.构造氨基酸脱氧核昔酸基因转录翻译氨基酸分子

设计

探究例如4A[蛋白质工程以基因工程为根底,又称为第二代基因

工程。蛋白质工程不仅能生产天然蛋白质,还可以定向改造控制蛋白

质合成相应基因中脱氧核甘酸序列或人工合成所需要自然界原本不存

在基因片段,从而合成自然界中原本不存在蛋白质。]

构建知识网络

DNA连接酶基因表达载体检测鉴定

课后练习区

1.B[因为一种氨基酸可能对应多种密码子、真核生物体内基因含

有内含子等因素,导致逆转录合成目基因与原基因有较大差异,所以

第15页

人工合成目基因不能用于比目鱼基因组测序,A选项错误;抗冻蛋白

11个氨基酸重复序列重复次数越多,抗冻能力越强,并不是抗冻基因

编码区重复次数越多抗冻能力越强,抗冻基因编码区依次相连形成新

基因已不是原来抗冻基因,因此不能得到抗冻性增强抗冻蛋白,B选

项正确;农杆菌转化法是将目基因导入植物细胞最常用方法,不是为

了筛选含有标记基因质粒,C选项错误;应用DNA探针技术,可以

检测转基因植物中目基因存在,但不能完成对目基因表达检测,D选

项错误。]

2.C[限制酶可在特定位点对DNA分子进展切割;DNA聚合酶在

DNA分子复制时将脱氧核甘酸连接成脱氧核甘酸链;DNA连接酶可

将限制酶切开磷酸二酯键连接在一起;解旋酶作用是将DNA双链解

开螺旋,为复制或转录提供模板。]

3.ACD[基因工程经常以抗菌素抗性基因为标记基因;质粒是基因

工程常用运载体;通常用同一种限制酶切割目基因与运载体,以获得

一样黏性末端;受体细胞可以是受精卵,也可以是体细胞。]

4.A[基因工程是通过对基因操作,将符合人们需要目

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