2023年高考生物试题发酵工程解析

发酵工程

一、单选题

1.（2023・山东•高考真题）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（）

A.不含氮源的平板不能用于微生物培养

B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒

C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃

D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成版酶的微生物

1.D

【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微

生物培养的物质基础。

2、按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化

学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。

3、消毒和灭菌是两个不同的概念，消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物的方法杀死物体表面或内部

的一部分微生物。灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽抱和抱子。

【详解】A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误；

B、平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，

B错误；

C、使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；

D、JR酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氮源的平板上，能合成胭酶的微生物可以分解尿素获得氮源而

进行生长繁殖，但是不能合成版酶的微生物因缺乏氮源而无法生长，因此以尿素为唯一氮源的平板能分离

出合成JR酶的微生物，D正确。

故选D。

2.（2023•山东•高考真题）以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；

②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含

量。下列说法正确的是（）

A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死

B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌

C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入

D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低

2.C

【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。

（1）泡菜的制作流程是：选择原料、配置盐水、调味装坛、密封发酵。

（2）选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。

（3）原料加工：将新鲜蔬菜修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状。

（4）配制盐水：按照比例配制盐水，并煮沸冷却。原因是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌

等微生物的生命活动不受影响。

（5）泡菜的制作：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡菜坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其

他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。在坛盖边沿的

水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常补充水槽中的水。

【详解】A、盐水煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响，A

错误；

B、②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误；

C、③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，是排气减压、隔绝空气、防止杂菌污染等，C正确；

D、④检测泡菜中亚硝酸盐的含量，腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。

故选C。

3.（2023•广东・统考高考真题）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜

热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件

组合是（）

08

H-

A.a点时取样、尿素氮源培养基

B.b点时取样、角蛋白氮源培养基

C.b点时取样、蛋白豚氮源培养基

D.c点时取样、角蛋白氮源培养基

3.D

【分析】筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，要用角蛋白氮源培养基。

【详解】研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够

高效降解角蛋白，所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养，所以D正确，ABC错误。

故选Do

4.（2023・浙江•统考高考真题）某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品,

划线接种于一定NaCI浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（）

A.培养基pH需偏碱性

B.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种

C.需在无氧条件下培养

D.分离得到的微生物均为乳酸菌

4.C

【分析】泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等发酵制成的。这些微生物一般

为厌氧、兼性厌氧或微好氧菌。它们的发酵产物不仅有乳酸，还会有醇、酯等，因而使泡菜具有特殊的风

味。

【详解】A、因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸，故其生活的环境是酸性，培养基pH需偏酸性，A错误；

B、平板划线接种时不需要稀释，B错误；

C、乳酸菌是厌氧型微生物，所以需在无氧条件下培养，C正确；

D、参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离得到的微生物除了乳酸菌，还会有

其他耐高盐的微生物，D错误。

故选Co

二、多选题

5.（2023•山东•高考真题）果酒的家庭制作与啤酒的工业化生产相比，共同点有（）

A.都利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理

B.都需要一定的有氧环境供发酵菌种繁殖

C.发酵前都需要对原料进行灭菌

D.发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期

5.AB

【分析】果酒与啤酒的发酵原理均是酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精。

【详解】A、二者均利用了酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，A正确；

B、发酵前期，均需要一定的有氧环境，使酵母菌大量繁殖，B正确；

C、果酒的家庭制作不需对原料进行灭菌，C错误；

D、果酒的家庭制作不需要进行消毒，D错误。

故选AB。

（2023•浙江•统考高考真题）阅读下列材料，完成下面小题。

小曲白酒清香纯正，以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成。小曲中所含的微生物主

要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌。酿酒的原理主要是酵

母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。传统酿造工艺流程如图所示。

6.小曲白酒的酿造过程中，酵母菌进行了有氧呼吸和无氧呼吸。关于酵母菌的呼吸作用，下列叙述正确的

是（）

A.有氧呼吸产生的［H］与。2结合，无氧呼吸产生的［H］不与Ch结合

B.有氧呼吸在线粒体中进行，无氧呼吸在细胞质基质中进行

C.有氧呼吸有热能的释放，无氧呼吸没有热能的释放

D.有氧呼吸需要酶催化，无氧呼吸不需要酶催化

7.关于小曲白酒的酿造过程，下列叙述簿送的是（）

A.糖化主要是利用霉菌将淀粉水解为葡萄糖

B.发酵液样品的蒸储产物有无酒精，可用酸性重铭酸钾溶液检测

C.若酿造过程中酒变酸，则发酵坛密封不严

D.蒸熟并摊晾的原料加入糟酷，立即密封可高效进行酒精发酵

6.A7.D

【分析】有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第

一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和［H］,合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和［H］,合成

少量ATP；第三阶段是氧气和［H］反应生成水，合成大量ATP。

【详解】6.A、有氧呼吸产生的［H］在第三阶段与5结合生成水，无氧呼吸产生的［H］不与。2结合，A正确；

B、有氧呼吸的第一阶段在细胞质基质中进行，第二和第三阶段分别在线粒体基质和线粒体内膜中进行，无

氧呼吸的两个阶段都在细胞质基质中进行，B错误；

C、酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸过程中释放的能量均大多以热能散失，但无氧呼吸是不彻底的氧化分解过程,

大部分能量存留在酒精，C错误；

D、有氧呼吸和无氧呼吸过程都需要酶的催化，只是酶的种类不同，D错误。

故选Ao

7.A、由于酿酒酵母不能直接利用淀粉发酵产生酒精（乙醇），故糖化过程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶将

淀粉分解为葡萄糖，以供发酵利用，A正确；

B、发酵液样品的蒸储产物有无酒精，可用酸性重铝酸钾溶液检测，若存在酒精，则酒精与酸性的重铭酸钾

反应呈灰绿色，B正确；

C、酿造过程中应在无氧条件下进行，若密封不严，会导致醋酸菌在有氧条件下发酵产生醋酸而使酒变酸,

C正确；

D、蒸熟并摊晾的原料需要冷却后才可加入糟酷，以免杀死菌种，且需要在有氧条件下培养一段时间，让酵

母菌大量繁殖，此后再密封进行酒精发酵，D错误。

故选Do

四、综合题

8.（2023・北京・统考高考真题）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，

能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。

（1）用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白膝和琼脂等成分，其中蛋白膝主要为细菌提供

和维生素等。

（2）A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形

成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明。

⑶为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样

后,依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现o

采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。

⑷为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证（主要实验

材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱）o

8.⑴氮源、碳源

（2）A菌能在培养平板中生长繁殖

⑶稀释溶菌圈

⑷假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂

【分析】微生物的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等。微生物的培养基按其特殊用途可分为选择

性培养基和鉴别培养基，培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。

【详解】（1）蛋白膝主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等。

（2）将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变

浑浊，表明A菌能在培养平板中生长繁殖。

（3）将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌

的菌落周围会出现溶菌圈。

（4）根据实验实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心机可用于分离菌体和细菌分泌物，

为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。

9.（2023・全国•统考高考真题）某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤

是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T,培养一段时间后，再用清

水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发

酵）。实验流程如图所示。

回答下列问题。

⑴在粉碎的秸秆中接种菌T,培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是

⑵采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分,

氮源的主要作用是（答出1点即可）。通常，可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。在

使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有（答出2点即可）。

⑶将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是

o但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是。发酵液中的乙醇可用

溶液检测。

⑷本实验收集的淋洗液中的可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相

比，本实验中乙醇生产方式的优点是。

9.（1）菌T能够分泌纤维素酶

（2）为合成微生物细胞结构提供原料（微生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂）①把锅内

的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除；②为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为

121国的条件下，维持15~30min；③无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透

到包裹中央，有利于蒸汽流通；④灭菌完成后，应使锅内蒸气压力缓慢降低，排气时间不少于10—12分

钟。

⑶制造无氧环境排出二氧化碳酸性的重铭酸钾溶液

⑷葡萄糖节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本低、原料来源广

【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大

量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌

无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18〜30回；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重

铭酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。

【详解】（1）菌T能够分泌纤维素酶，纤维素酶能将纤维素最终分解为葡萄糖，因此在粉碎的秸秆中接种

菌T,培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解。

（2）培养基的主要成分：水、碳源、氮源、无机盐，其中氮源主要为合成微生物的细胞结构提供原料（微

生物细胞中的含氮物质，如核酸、蛋白质、磷脂）。高压蒸汽灭菌法的注意的事项有①把锅内的水加热煮

沸，将其中原有的冷空气彻底排除后，将锅密闭，如果高压锅内的空气未排除或未完全排除，则蒸汽不能

达到饱和，蒸汽的温度未达到要求的高度，结果导致灭菌的失败；②为达到良好的灭菌效果，一般在压力

为100kPa,温度为121回的条件下，维持15~30min；③无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，

使蒸汽能对流易渗透到包裹中央，有利于蒸汽流通；④灭菌完成后，应使锅内蒸气压力缓慢降低，排气时

间不少于10—12分钟，否则锅内蒸气压力突然降低，液体突然沸腾，冲走瓶盖，使液体喷出或使容器破

裂。

（3）果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，将酵母菌接种到灭菌后的培养基中进行酒精发酵，酒精

发酵需要在无氧的条件下进行，此时拧紧瓶盖的主要目的是制造无氧环境。酵母菌进行无氧呼吸产生酒精

和二氧化碳，在发酵过程中密闭，所以需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放出二氧化碳，酒精可用酸性重铭

酸钾溶液来检测，该物质与酒精反应呈现灰绿色。

（4）与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，利用纤维素为原料生产乙醇具有节约粮食、废物利用、清洁环保、

不污染环境、生产成本低、原料来源广等优点。

10.（2023•湖南•统考高考真题）某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答

下列问题：

⑴若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括水和—o

（2）现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽抱杆菌H,其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌

肽对的抑制效果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需在

Hg-mI/】浓度区间进一步实验。

抗菌肽浓度/（咫・mL-i）

测试菌

55.2027.6013.806.903.451.730.86

金黄色葡萄球菌-----++

枯草芽抱杆菌-----++

禾谷镰抱菌-++++++

假丝酵母-++++++

注："+"表示长菌，表示未长菌。

⑶研究人员利用解淀粉芽抱杆菌H的淀粉酶编码基因M构建高效表达质粒载体，转入大肠杆菌成功构

建基因工程菌A。在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代

菌株不再产生淀粉酶M。分析可能的原因是（答出两点即可）。

（4）研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。

肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH以及（答出两点）等基本条件。肺类

装配体形成过程中是否运用了动物细胞融合技术（填"是"或"否"）。

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图称

“大*配体IMDMKtM

⑸耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是一种耐药菌，严重危害人类健康。科研人员拟用MRSA感染

肺类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽抱杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。

以下实验材料中必备的是o

①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体②MRSA感染的肺类装配体③解淀粉芽泡杆菌H抗菌

肽④生理盐水⑤青霉素（抗金黄色葡萄球菌的药物）⑥万古霉素（抗MRSA的药物）

10.⑴无机盐、淀粉

（2）金黄色葡萄球菌和枯草芽抱杆菌1.73-3.45

⑶淀粉酶编码基因M发生突变；重组质粒在大肠杆菌分裂过程中丢失

⑷无菌、无毒环境，含95%空气和5%CO2的气体环境否

⑸②③④⑥

【分析】动物培养的条件：

1、营养：在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。

2、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作:定期更换培养液，

以便清除代谢产物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。

3、适宜温度、pH和渗透压：哺乳动物细胞培养的温度多为（36.5±0.5）团；pH多为7.2~7.4；动物细胞培养还

需要考虑渗透压。

4、气体环境：。2：细胞代谢所必需的；CO2：维持培养液pH。

【详解】（1）由题意可知，根际促生菌具有固氮作用，可利用空气中的氮气作为氮源，因此用于筛选根际

促生菌的培养基的主要营养物质包括水、无机盐和淀粉。

（2）由题表可知，在抗菌肽浓度为3.45-55.20ng-mL1范围内,金黄色葡萄球菌和枯草芽抱杆菌均不能生长，

表明该抗菌肽对它们的抑菌效果较好；因为抗菌肽的浓度为1.73咫-mL-i时，它们均能生长，所以要确定抗

菌肽抑菌效果的最低浓度，应在1.73~3.45ngmL1的浓度区间进一步实验。

（3）在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产生淀粉

酶M,可能的原因是淀粉酶编码基因M发生突变；或者是重组质粒在大肠杆菌分裂过程中丢失。

（4）肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH以及无菌、无毒环境，含95%空气和5%CO2

的气体环境等基本条件；由图示可知，肺类装配体形成的过程中没有运用动物细胞融合技术，只涉及了细

胞的分裂和分化等内容。

（5）科研人员拟用MRSA感染肺类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽抱杆菌H抗菌肽是否对MRSA引

起的肺炎有治疗潜力，必备实验材料为：②MRSA感染的肺类装配体、③解淀粉芽抱杆菌H抗菌肽、④

生理盐水（设置对照实验使用）、⑥万古霉素（抗MRSA的药物，比较解淀粉芽抱杆菌H抗菌肽的疗效）,

故选②③④⑥。

11.（2023•全国,统考高考真题）为了研究蛋白质的结构与功能，常需要从生物材料中分离纯化蛋白质。某

同学用凝胶色谱法从某种生物材料中分离纯化得到了甲、乙、丙3种蛋白质，并对纯化得到的3种蛋白

质进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳，结果如图所示分别代表电泳槽的阳极和阴极）。己知甲的相

对分子质量是乙的2倍，且甲、乙均由一条肽链组成。回答下列问题。

⑴图中甲、乙、丙在进行SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳时，迁移的方向是（填"从上向下"或"从下向

上”）。

（2）图中丙在凝胶电泳时出现2个条带，其原因是o

⑶凝胶色谱法可以根据蛋白质的差异来分离蛋白质。据图判断，甲、乙、丙3种蛋白质中最先从

凝胶色谱柱中洗脱出来的蛋白质是,最后从凝胶色谱柱中洗脱出来的蛋白质是0

⑷假设甲、乙、丙为3种酶，为了减少保存过程中酶活性的损失，应在（答出1点即可）条件下

保存。

11.⑴从上向下

⑵丙由两种相对分子质量不同的肽链组成

⑶相对分子质量丙乙

⑷低温

【分析】1.样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的蛋白质除去；凝胶色谱法是根据相对分子

质量大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的

速度慢；相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快。

2.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解

离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带

电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不

同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

【详解】（1）电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带

电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。电泳时，分子质量越大，迁移距离越小，

根据题中给出甲蛋白质的分子质量是乙的2倍，故甲的迁移距离相对乙较小，可判断出迁移方向是从上到

下。

（2）题中给出甲、乙均由一条肽链构成，图示凝胶电泳时甲、乙分别出现1个条带，故丙出现2个条带,

说明丙是由2种相对分子质量不同的肽链构成。

（3）凝胶色谱法主要根据蛋白质的相对分子质量差异来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质只能进入孔

径较大的凝胶孔隙内，故移动距离较短，会先被洗脱出来，分子质量较小的蛋白质进入较多的凝胶颗粒内，

移动距离较长，会后被洗脱出来。据图判断，丙的分子质量最大，最先被洗脱出来，乙的分子质量最小，

最后被洗脱出来。

（4）为了减少保存过程中酶活性的损失，应在酶的保存在低温条件下进行。

一、单选题

1.（2023・四川成都•石室中学校考模拟预测）下列关于生物技术应用叙述正确的是（）

A.酶的固定化应用中，物理吸附法对酶活性的影响比化学结合法小

B.泡菜制作发酵中期，亚硝酸盐含量随着乳酸菌的大量繁殖而显著增加

C.果酒制作过程中发酵液pH不变，果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低

D.固体培养基配置需依次经过计算、称量、溶化、倒平板、灭菌等步骤

1.A

【分析】固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包

埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更合适采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用

包埋法固定化。这是因为细胞体积大，而酶分子小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易

从包埋材料中漏出。

【详解】A、酶的固定化应用中，物理吸附法对酶活性的影响比化学结合法小，这是因为化学结合法可能会

影响酶的活性部位而影响反应效果，A正确；

B、泡菜制作的发酵中期，由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强。此

时期乳酸菌数量达到最高峰，乳酸的量继续积累。由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分

解，因而亚硝酸盐含量下降，B错误；

C、果醋制作利用的是醋酸菌，醋酸菌能够产生醋酸，使溶液的pH逐渐降低；果酒制作过程中，酵母菌无

氧呼吸产生二氧化碳与酒精，二氧化碳溶于水形成碳酸，随着二氧化碳浓度的增加，溶液的pH逐渐降低，

因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低，C错误；

D、固体平板培养基的配置需依次经过计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等步骤，D错误。

故选Ao

2.（2023・四川成都•石室中学校考模拟预测）芳香油的提取方法主要分为三种：蒸储法、萃取法和压榨法。

以下关于提取方法的叙述中，错误的是（）

A.水蒸气蒸储法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油

B.压榨法适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料中的芳香油的提取

C.萃取剂的沸点一般较高，通常要高于萃取物的沸点

D.提取玫瑰精油和橘皮精油的实验流程中共有的操作是过滤

2.C

【分析】植物芳香油的提取方法：蒸储法、压榨法和萃取等。

（1）蒸储法：芳香油具有挥发性。把含有芳香油的花、叶等放入水中加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香

油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油，

这种提取方法叫蒸储法。根据蒸储过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸储法划分为水中蒸储、水上

蒸储和水气蒸储。

（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙酸、石油酸等低沸点的有机溶剂中，使芳香

油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油。

（3）压榨法：在橘子、柠檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种

提取方法叫压榨法。植物芳香油的蒸储提取过程：浸泡、加热蒸储、乳浊液的分离。

【详解】A、水蒸气蒸储法的原理是，先利用水蒸气将植物挥发性较强的芳香油携带出来，然后再分离。蒸

储法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油，A正确；

B、压榨法提取植物芳香油的操作较简单，压榨法适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取，B正确；

C、萃取剂的沸点一般较高，有利于充分溶解提取物，但萃取剂的沸点通常要低于萃取物的沸点，这样在浓

缩时才能将萃取剂先蒸储出来，留下的是萃取物，C错误；

D、提取玫瑰精油和橘皮精油的实验流程中均有分液操作（提取玫瑰精油的实验流程中的分液操作是用分液

漏斗将油层和水层分开，提取橘皮精油的实验流程中的分液操作是先将过滤后的压榨液静置，再用分液漏

斗将上层的橘皮精油分离出来），D正确。

故选Ca

3.（2023・四川成都•石室中学校考模拟预测）我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要

覆水坛。此坛有一外沿如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖，浸于水中，……则所泡之菜不得坏矣。

泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。……o如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令

其干。”下列说法正确的是（）

A."泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌

B."霉花"主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜

C."坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内适宜湿度

D.对泡菜汁中的乳酸菌计数，可用稀释涂布平板法和平板划线法

3.B

【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。

2、泡菜的制作过程：将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及

其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿

的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发

酵时间长短受室内温度的影响。

【详解】A、"泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的包括提升泡菜味道、减少水中的溶氧量和消毒杀菌防止杂

菌污染，A错误；

B、"霉花"指的是泡菜坛内表面的白膜，主要由酵母菌繁殖形成，而酵母菌往往来自蔬菜，B正确；

C、"坛沿外水须隔日一换，勿令其干”以保证坛内的无氧环境，C错误；

D、分离泡菜汁中的乳酸菌，可用稀释涂布平板法，不可用平板划线法，D错误。

故选B

4.（2023•河北•河北巨鹿中学校联考三模）泡菜酸脆爽口，是人们喜爱的佐餐佳品。下列有关制作泡菜的叙

述正确的是（）

A.泡菜"咸而不酸"可能是加盐过多，抑制了乳酸菌发酵过程

B.乳酸菌是厌氧细菌，因此泡菜坛需要装满以保证无氧环境

C.腌制泡菜时，可以通过加入抗生素来抑制杂菌的生长

D.泡菜制作过程中“冒泡”是因为乳酸菌发酵产生了82

4.A

【分析】泡菜制作是应用了乳酸菌的发酵原理，提供的新鲜蔬菜是它的培养基，乳酸菌是厌氧微生物，在

缺氧的环境条件下发酵可产生大量乳酸，能抑制其他厌氧菌的生存;在有氧情况下，自身受抑制，不能进行

乳酸发酵，使需氧菌繁殖而变质。乳酸菌生长繁殖需要消耗有机物，发酵过程中会产生更多种类的有机物。

【详解】A、泡菜腌制过程中如果加盐过多，会导致泡菜水的渗透压过高，抑制乳酸菌的生长，可能出现“咸

而不酸”的现象，A正确；

B、泡菜坛通常只装八成满，以防止发酵过程中发酵液溢出，B错误；

C、抗生素在抑制杂菌生长的同时也会抑制乳酸菌的生长，因此腌制泡菜时不能加入抗生素，C错误；

D、乳酸菌只能进行无氧呼吸，产物为乳酸，不产生CO2,D错误。

故选A。

5.（2023・广东肇庆•校考模拟预测）桑甚酒是以桑甚子为主要原料，用浸泡原酒和发酵原酒酿制而成的一种

低度果酒。下列关于桑甚酒的传统制作工艺的叙述，错误的是（）

A.用桑甚酒制作桑甚醋，需要改变氧气条件

B.酿好的桑甚酒需要密封储存

C.将桑甚子打碎成浆有利于发酵的进行

D.将桑甚子冲洗干净，并进行高压蒸汽灭菌

5.D

【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸,

大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母

菌无氧呼吸产生酒精，生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铭酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿

色。

2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺

盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；

当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30〜35团。

【详解】A、桑甚酒是酵母菌进行无氧发酵，制作桑意醋是醋酸菌有氧发酵，氧气条件不同，A正确；

B、酿好的酒若未密封保存好容易变酸，需密封储存，B正确；

C、将桑甚子打碎成浆有利于发酵的进行，C正确；

D、在缺氧呈酸性的环境中，酵母菌能够生存，而其他微生物的生长受到抑制，高压蒸汽灭菌会杀死附着在

桑意上的酵母菌，D错误。

故选D。

6.（2023•四川成都•石室中学校考模拟预测）下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（）

A.反应底物和产物的浓度对固定化酶的催化作用没有影响

B.刚熔化的海藻酸钠溶液应迅速与已活化的酵母菌混合

海藻酸钠凝胶珠用蒸储水冲洗的目的是洗去

C.CaCI2

D.固定化酶能反复使用，但固定化细胞不能

6.C

【分析】固定化酶的缺点：不利于催化一系列的酶促反应；优点：①既能与反应物接触，又能与产物分离；

②可以反复利用。

采用包埋法制备固定酵母细胞的主要步骤：酵母细胞的活化（利用蒸储水使干酵母恢复正常生活状态）玲

海藻酸钠、CaCL溶液的配制（在溶解海藻酸钠溶液的过程中使用小火或间断加热，防止溶液焦糊）玲海藻

酸钠溶液与酵母细胞混合（注意冷却海藻酸钠溶液至室温，防止高温破坏酵母菌的活性）玲固定化酵母细胞。

【详解】A、酶的催化作用受反应底物和产物的浓度的影响，A错误；

BC、将溶化后的海藻酸钠溶液冷却至室温后加入已活化的酵母细胞，充分搅拌混合均匀后移至注射器中，

然后以恒定速度缓慢滴加至CaCb中从而形成凝胶珠，之后再用蒸镭水冲洗2〜3次，所以蒸储水冲洗的目

的是洗去CaCb和未被固定的酵母菌，B错误、C正确；

D、固定化酶和固定化细胞都能反复使用，D错误。

故选Co

7.（2023・四川成都•石室中学校考模拟预测）下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（）

A.固定化酶的活性受温度、pH、表面活性剂和重金属离子等影响

B.固定化酶可以反复使用，反应产物对固定化酶的活性无影响

C.固定化酶和固定化细胞，发挥作用的酶都在细胞外起作用

D.固定化细胞含有多种酶，可以催化各种反应底物的一系列反应

7.A

【分析】固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包

埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更合适采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用

包埋法固定化。这是因为细胞体积大，而酶分子小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易

从包埋材料中漏出。

【详解】A、酶需要温和的条件，其活性受外界因素的影响，故温度、pH、表面活性剂和重金属离子等都可

能影响固定化酶的活性，A正确；

B、固定化酶可以反复使用，但每次使用时都会与反应物产生某些反应，从而导致酶的结构发生改变，影响

酶的活性，B错误；

C、固定化细胞的酶促反应需在细胞内进行，C错误；

D、固定化细胞含有多种酶，可以催化特定反应底物的一系列反应，不是催化各种反应底物的一系列反应,

D错误。

故选Ao

8.（2023•四川成都•石室中学校考模拟预测）以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是（）

A.红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸储水，重复洗涤3次

B.将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的NaCI溶液中透析12小时

C.粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较大的杂质

D.蛋白质通过凝胶柱时，相对分子质量较大的移动速度快

8.D

【分析】蛋白质的提取和分离的过程中，用生理盐水洗涤对红细胞进行洗涤以除去血浆杂蛋白；对于提取

的血红蛋白进行粗分离过程中应该将血红蛋白放入透析袋中，将透析袋放入20mmol/L的磷酸缓冲液中透析

12h,除去分子量较小的杂质；由于气泡会影响蛋白质洗脱的次序，因此在凝胶装填时，凝胶填在色谱柱内

要均匀，不能有气泡存在；蛋白质通过凝胶柱时，相对分子质量较大蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，

路程短，移动速度快，相对分子质量较小蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动速度慢。

【详解】A、红细胞的洗涤过程应该用生理盐水洗涤，不能用蒸储水洗涤（否则细胞会吸水涨破），A错误;

B、将血红蛋白溶液通过透析进行粗分离时应该选用磷酸缓冲液，不是质量分数为0.9%的NaCI溶液，B错

误；

C、粗分离时透析的目的是去除样品中分子量较小的杂质，C错误;

D、蛋白质通过凝胶柱时，相对分子质量较大蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动速度快，D

正确。

9.（2023•四川成都•石室中学校考模拟预测）下列关于物质提取、纯化原理的叙述，不正确的是（）

A.凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同，在色谱柱中的移动速度不同

B.使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质

C.电泳法是利用样品中各种分子带电性质的差异以及样品分子大小、形状的不同，使带电分子产生的

迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离

D.离心法分离蛋白质的依据是密度不同的物质离心时沉降速度不同

9.B

【分析】1、凝胶色谱法可以用于分离蛋白质，电泳法可以实现样品中各种分子的分离或鉴定。

【详解】A、凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容

易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路

程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离，A正确；

B、使用透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，B错误；

C、电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同，产生的迁移速度不同而实现样品

中各种分子的分离，还可以对待测样品进行鉴定，C正确；

D、离心法分离蛋白质的依据是不同密度的分子离心时沉降速度不同，密度越大，沉降速度越大，越容易沉

降到试管底部，从而能分离不同物质，D正确。

故选B„

10.（2023•山东济宁•统考三模）黄酒