胡颓子叶药材中银椴苷的含量测定研究

胡颓子叶药材中银椴苷的含量测定研究【摘要】目的：胡颓子叶各地方标准均未建立含量测定的质量控制标准，因此本实验通过建立胡颓子叶药材中银椴苷含量测定方法，为其质量标准的建立提供参考。方法：采用80%甲醇超声提取样品，HPLC-DAD法测定5个产地的15批胡颓子叶药材，色谱条件为：色谱柱为watersXSelectHSST35μm，柱温35℃，流动相为乙腈-0.1%甲酸（26:74），检测波长315nm，进样量10μL，流速1mL/min。结果：对实验所用方法进行方法学验证，银椴苷含量在9.98～319.36µg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（R2=0.9999），专属性良好；检测限为0.000191µg，定量限为0.000401µg；平均回收率为101.03%，RSD值为2.68%（n=9）；精密度、重复性、稳定性RSD值小于3.00%。胡颓子叶药材中银椴苷含量范围在0.0054%～0.088%之间。结论：建立了HPLC-DAD法测定胡颓子叶药材中银椴苷含量，该方法简便、灵敏、准确、重复性好。【关键词】胡颓子叶；银椴苷；含量测定；质量标准

DeterminationofTilirosideinElaeagnusPungensLeaf[Abstract]Objective:TheassayofElaeagnusPungensleafhasnotbeenincludedinalllocalstandards.Therefore,thisexperimentaimstodevelopaquantitativemethodforthedeterminationoftilirosideinElaeagnusPungensleaftoprovideareferencefortheestablishmentofitsqualitystandard.Methods:Thesampleswereultrasonicallyextractedwith80%methanol,and15batchesofElaeagnusPungensleaffrom5producingareasweredeterminedbyHPLC-DAD.ChromatographicseparationwasachievedusingwatersXSelectHSST35μmoperatingat35°C.Themobilephaseconsistedofacetonitrileandwater(containing0.1%formicacid)witharatioof26:74.Thedetectionwavelengthwas315nm,theinjectionvolumewas10μL,andtheflowratewas1mL/min.Results:Themethodusedintheexperimentwasvalidated.Thecontentoftilirosideshowedagoodlinearrelationshipwiththepeakareaintheconcentrationrangeof9.98～319.36μg/mL(R2=0.9999),andthespecificitywasgood.Thelimitofdetectionwas0.000191μgandthelimitofquantitationwas0.000401μg.Theaveragerecoverywas101.03%withtheRSDvalueof2.68%(n=9).TheRSDvaluesofprecision,repeatabilityandstabilitywerelessthan3.00%.ThecontentoftilirosideintheElaeagnusPungensleafrangedfrom0.0054%～0.088%.Conclusion:Asimple,sensitive,accurateandreproduciblemethodwasestablishedforthedeterminationoftilirosideinElaeagnusPungensleafbyHPLC-DAD.[Keywords]ElaeagnusPungensleafTilirosideAssayQualitystandard

目录1前言 结论本课题建立了胡颓子叶中银椴苷含量测定的HPLC方法，这是一种比较简便、快速且准确测定胡颓子叶药材中银椴苷含量的方法。该方法经方法学验证，结果表明，方法专属性良好，线性关系良好、耐用性佳、溶液24h内稳定、精密度高、准确度好等。实验采用80%甲醇超声提取，HPLC法测定15批胡颓子叶药材中银椴苷的含量，得各批次胡颓子叶药材含量范围在0.0054%～0.088%之间。参考文献湖北省药品监督管理局.湖北省中药材质量标准[S].北京:中国医药科技出版社,2019:155-156.黄洁,邹立君,钟卫津,等.苗药羊奶奶叶的生药学研究[J].中国民族民间医药,2019,28(14):36-40.中国科学院中国植物志编委会.中国植物志[M].第52卷.北京:科学出版社,1983.25.庄红丹,李风秋,罗瑞龙,等.胡颓子属植物化学成分及药理活性研究进展[J].林产化学与工业,2021,41(04):135-146.CongLi,YuebinGe,DingrongWan,etal.OptimizationofextractionconditionandquantificationoftotalflavonoidsinElaeagnifolium[J].PharmacognosyJournal.2011,3(26):8-12.赵鑫.胡颓子（胡颓子科），短肋羽藓（藓纲：羽藓科）和假柴龙树（茶茱萸科）的化学成分和生物活性[D].上海:华东师范大学,2006.赵鑫,朱瑞良,姜标,等.胡颓子有效部位化学成分研究[J].中国中药杂志,2006(06):472-474.茹凡书.胡颓子叶正丁醇部位活性成分的研究[D].河南:河南中医药大学,2013.黄丽杰,刘伟,崔永霞.胡颓子叶化学成分的研究[J].中成药,2015,37(04):796-800.付义成,王晓静,贾献慧,等.胡颓子叶化学成分研究[J].中草药,2008,434(05):671-672.赵鑫,黄浩,朱瑞良.中药胡颓子叶的脂溶性化学成分研究[J].中成药,2006(03):403-405.付义成.胡颓子叶化学成分及药理活性研究[D].山东:山东省医学科学院,2008.SpínolaV,PintoJ,Llorent-MartínezEJ,etal.ChangesinthephenoliccompositionsofElaeagnusumbellataandSambucuslanceolataafterinvitrogastrointestinaldigestionandevaluationoftheirpotentialanti-diabeticproperties[J].FoodResearchInternational,2019,122:283-294.周美,王道平,杨莹,等.胡颓子叶中槲皮素和山柰酚薄层鉴别及其总黄酮、免疫活性研究[J].信阳师范学院学报（自然科学版）,2020,33(3):410-415.葛月宾,万定荣.《湖北省中药材质量标准》拟收载部分土家族药材的成分和药理研究进展[J].中南民族大学学报（自然科学版）,2008,27(04):50-55.GeY,LiuJ,SuD.Invivoevaluationoftheanti-asthmatic,antitussiveandexpectorantactivitiesofextractandfractionsfromElaeagnuspungensleaf[J].JEthnopharmacol.2009,126(3):538-42.李进.胡颓子叶止咳平喘药效物质基础研究[D].河南:河南中医药大学,2012.李广胜,鲁光华,陈宁,等.胡颓子叶不同提取物药理活性的比较研究[J].中国药理学通报,2014,30(08):1181-1182.代黔,王园园,葛月宾,等.胡颓子叶对豚鼠离体气管平滑肌收缩功能的影响[J].中草药,2013,44(10):1305-1308.GeYB,DaiQ,WanDR,etal.Relaxanteffectof1-butanolfractionfromElaeagnuspungensleafthroughinhibitingL-typeCa2+channe