法医物证学(11选修)市公开课一等奖省赛课微课金奖课件

欢迎1/77法医物证学南方医科大学法医学系台运春yctai@020-627891012/77法医物证学、法医物证、法医物证判定概念法医物证学任务和意义概述3/77

法医物证学是利用医学、生物学和其它自然科学理论与技术，研究并处理与法律相关生物性检材检验与判定一门学科。4/77法医物证：对案件真实情况有证实作用物品和痕迹。与人体相关组织器官或其分泌物、排泄物作案工具和致伤物日惯用具及其附着物药品、毒品、生草药等指纹、掌纹、趾纹、足迹、鞋印等印鉴、票证、字迹、文件、遗书及伪造品等5/77

法医物证判定：对与案件相关生物性检材进行专门检验，判断它们在该案件中能否作为证据过程。符正当律程序6/77任务个体识别意义为侦察提供线索亲权判定为审判提供证据为行政提供依据7/77亲子判定

Paternitytesting8/779/7710/7711/7712/7713/77“亲子判定热”摧毁家庭基石造福人类还是戕害家庭？亲子判定杀死了中国人家庭忠诚“亲子判定”折射家庭信任危机亲子判定拷问“真实谎言”亲子判定有什么错14/77

应用医学和生物学理论和技术判断父母与儿女是否有亲生关系。1.1概念15/771.2发展史》古代三国：滴骨验亲（《会稽先贤传》）明代：滴血认亲（“合血法”）电视剧《洗冤录》中滴骨验亲剧照电影《九品芝麻官》中滴血认亲剧照16/771920年，欧洲将血型用于亲子判定1935年，美国开始亲子判定1985年，PCR技术创造/使亲子判定从排除走向认定1.2发展史》当代17/77基于PCRSTR分型已成为非常成熟技术伎俩，商业化试剂盒开发和自动测序仪应用，结果科学可靠。案件量（例/年）：美国，0；德法，3000余；我们中心年1800余。1.2发展史》当代18/771.3亲子判定类型包括民事纠纷包括刑事案件包括行政事务儿女抚养、财产继承怀疑产院调错婴儿强奸致孕案生父确认碎尸案身源认定杀婴或拐卖儿童案孩子身源认定移民涉外公证失散亲人亲缘关系认定计划外生育责任人确认或上户口19/77妊娠期限：280±14天，早产儿、过熟儿性交能力和生殖能力：受精期间遗传特征（遗传性状）：最主要依据1.4亲子判定依据20/77多基因遗传特征单基因遗传特征遗传特征是生物体表现一切形态特征、生理特征和代谢类型统称。受多个基因控制和环境原因影响，如相貌、身高、智力受单个基因控制，遗传方式明确，不受环境影响遗传标识可检测、遗传方式明确性状或基因1.4亲子判定依据遗传特征21/77红细胞型、白细胞型、血小板型基因产物水平遗传标识DNA水平遗传标识血液细胞表面遗传标识血液蛋白质遗传标识红细胞酶型、血清酶型、血清型长度多态性序列多态性RFLP，VNTR，STR

SNP、mtDNA1.4亲子判定依据遗传标识分类22/77用于亲权判定遗传标识要求遗传方式明确遗传标识分型终生不变，含有体细胞稳定性和遗传稳定性检测方法稳定。不一样试验室、不一样批次结果相同含有遗传多态性1.4亲子判定依据23/77基因产物水平遗传标识不足为基因编码产物，多态信息容量小，应用价值有限在基因表示过程中受许多原因影响，不能正确反应DNA多态性情况一些血型系统存在生理性变异和病理性变异，使判型错误易受环境中各种理化原因影响而失活，检材难以保留检测方法多样、复杂，技术、人为误差较大1.4亲子判定依据24/77DNA遗传标识优点直接检测遗传物质DNA组成，不受表示过程步骤影响是显性遗传标识，遗传路径明确多态性程度高，可到达必定和否定结论检材类型广泛可进行复杂亲权关系判定比较稳定，不易受生理、病理影响1.4亲子判定依据25/77DNA标识发展1980：White首次描述限制片段长度多态性(RFLP)标识1985：Jeffreys发觉可变数目串联重复(VNTR)1985：聚合酶链反应(PCR)第一篇论文发表1988：FBI开始利用DNA分析帮助办案1991：短串联重复序列(STR)第一篇论文发表1995：英国开始建立DNA数据库1998：美国开启CODIS（DNA检索系统）数据库：人类基因组计划HGP完成/同时发觉300万SNP……1.4亲子判定依据26/77即DNA结构在不一样个体或等位基因之间存在差异。其本质就是因为进化过程中各种原因引发染色体DNA中核苷酸排列次序发生了改变/即产生DNA片段和DNA序列在个体间差异。长度多态性序列多态性1.5DNA多态性27/77短串联重复序列（shorttandemrepeat/STR）也叫微卫星DNA/是由2-6bp长“关键序列”串联重复组成。STR在人类基因组中分布广泛/平均每6-10kb就出现一个。绝大多数位于非编码区/极少数在编码区域。长度多态性28/77重复单位长度2CA3AAT4AGAT5AAAGA二核苷三核苷四核苷五核苷29/77TH01/asimplelocus

(TCAT)3-14516961737177818191851018911193Allele:*AmpFlSTR9.3188=TCA30/77STRsHighlydiscriminatingAbundantingenomeAmenabletoautomationDiscreteallelesNon-isotopicLow-quantityDNAPCR-basedDegradedDNARapidtypingadvantages31/77是指基因组内特定核苷酸位置上存在着2种不一样碱基/其中较少一个在群体频率不少于1%。通常表现出二态性。

优势：丰富遗传稳定性序列多态性单核苷酸多态性

（singlemucleotidepolymorphisms/SNPs）32/772.1总体思绪

检测遗传标识表型/观察否符合对应遗传规律，并进行统计学计算，判断血缘关系33/77DNA核DNA线粒体DNA常染色体性染色体X染色体Y染色体父系遗传母系遗传22对/孟德尔DNA类型奶→父→孙女34/77惯用STR基因座及在染色体上位置CSF1POD5S818D21S11TH01TPOXD13S317D7S820D16S539D18S51D8S1179D3S1358FGAVWAAMELAMELD2S1338D19S433PentaDPentaE35/77在必定孩子某一遗传基因必定来自生父（生父基因obligatorygene/OG）/而假设父（allegedfather/AF）不带有这个基因时/能够排除他是孩子生父。14/1513/1715/17否定亲生2.2基本原理36/77在必定孩子某一遗传基因必定来自生父/而AF也带有这个基因时/不能排除他是孩子生父/这时能够计算他与孩子含有亲生关系相对机会有多大。13/1513/1715/17不排除亲生必定亲生？×2.2基本原理37/77父权指数（paternityindex/PI）

PI＝AF提供OG成为小孩生父可能性RM提供OG成为小孩生父可能性H0：争议父是孩子生物学父亲H1：随机无关男子是孩子生物学父亲两个概念38/7713/1513/1715/17PI=1/2p13=12×0.1797=2.7821/2×p17+0×p13p13×p17+p17×p13==1.391PI=12p13=14p1339/77

父权相对机会（relativechanceofpaternity/RCP/W）

RCP＝πPIπ

PI＋(1-π)PIPI＋1=π=0.5前概率（π）：非遗传学证据相信争议父是孩子生父概率40/77父权相对机会意义RCP值（%）意义99.73～能够必定有亲子关系99～99.73极可能有亲子关系95～99非常可能有亲子关系90～95可能有亲子关系80～90倾向有亲子关系50～80不能必定是否有亲子关系10～50倾向排除亲子关系5～10不大可能有亲子关系0.27～5不可能有亲子关系

～0.27能够排除亲子关系1、结果准确性更高99.73%→99.95%→99.99%2、结论严谨性更强能够必定（排除）被检男子是孩子生物学父亲→被检男子是（不是）孩子生物学父亲/从遗传学角度已经得到科学合理确实信。41/77DNA提取PCR扩增电泳分离检测结果分析评定普通流程图Chelex法、酚-氯仿法单基因座或复合扩增激光诱导荧光检测或银染各种检材血液、唾液、精斑、毛发、肌肉、骨骼、牙齿等依据等位基因ladder分型2.3亲子判定方法42/7743/7744/7745/77分型结果违反Mendelian定律突变（亲生）不违反Mendelian定律非亲生亲生多个遗传标识联合检测非亲生/巧合2.4结果评定累积非父排除概率超出0.9999双亲判定：15个以上单亲判定：18个以上46/77多个遗传标识联合检测结果没有基因座违反/W＞99.99%1~3个基因座违反3个以上基因座违反双亲判定排除亲权关系单亲判定必定亲权关系不排除亲权关系增加更多基因座/计算PI无违反/W＞99.99%新违反被检男子是孩子生物学父亲/从遗传学角度已经得到科学合理确实信被检男子不是孩子生物学父亲/从遗传学角度已经得到科学合理确实信双亲判定单亲判定不排除被检男子是孩子生物学父亲47/77案例分析48/77案例一父权概率为99.99999957%。结论：争议父是子生物学父亲，从遗传学角度已经得到科学合理确实信。简明案情：父怀疑子是否为其亲生。D8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358D5S818D13S317D16S539争议父12/152910/1210/121510/128/1111/13生母16/1729/3011/1212/1315/1611/12811/13子12/162911/1212/1315128/1111D2S1338D19S433vWAD12S391D18S51D6S1043FGAAMEL争议父20/231516/1818/241413/1418/26X/Y生母19/2413.2/1416/1920/2216/1814/1823/24X子19/2313.2/1516/1822/2414/1613/1418/24X/Y49/77案例二简明案情：父怀疑子是否为其亲生。D8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358D5S818D13S317D16S539争议父12/1330/318/127/1214/189/108/1111/12生母14/1529/30111216118/1011/12子11/14301110/1215/1611811/12D2S1338D19S433vWAD12S391D18S51D6S1043FGAAMEL争议父18/2313/1414/1818/2016/1814/1822/25X/Y生母18/1914/15.214/1719/221611/1921/24.2X子17/1913/15.217/2019/22161124/24.2X/Y10个基因座违反遗传规律。结论：争议父把是子生物学父亲，从遗传学角度已经得到科学合理确实信。50/77案例三D3S1358TH01D13S317D16S539D2S1338D8S1179D21S11D7S820父315/16710/119/1418/2412/14298/10母315/178/99/119/122412/1330/31.211/12子315/177/810/1112/152412/1429/31.210/12CSF1POD19S433vWATPOXD18S51AMELD5S818FGA父310/1213/15.217/18813/19X/Y1124.2/25母311/1213/14.2148/1113/14X10/1222/26子310/1114.2/15.214/18813/14X/Y10/1125/26PentaDPentaELPLF13BFESFPSF13A01父39/12111010123.2/5母311/135/11109/10113.2子312/135/11101011/123.2/5简明案情：父怀疑子是否为其亲生。仅D16S539违反孟德尔遗传规律，父权概率99.99876357%

。结论：争议父把是子生物学父亲，从遗传学角度已经得到科学合理确实信。51/77检测系统

被检母亲

婴儿

被检父亲

D3S1358

15/19

17/19

17/18

vWA

14/17

15/16

14/14

FGA

22/24

21/27

20/21

D8S1179

10/16

10/14

13/14

D21S11

32.2/33.2

30/33.2

30/30

D18S51

14/15

15/16

15/17

D5S818

12/13

13/13

10/11

D13S317

9/11

11/11

8/9

D7S820

8/11

8/10

8/10

D16S539

9/14

9/9

9/11

THO1

9/9

9/9

7/9

TPOX

11/11

8/11

8/11

CSF1PO

11/12

12/12

10/12

D2S1338

17/18

19/23

23/24

D19S433

13/16.2

12/13

14/15.2

案例四简明案情：父母怀疑子在医院报错。52/77检测系统

被检父1

(父亲)

被检父2

（爷爷）

孩子

D3S1358

15/16

16/16

15/16

vWA

16/16

14/16

14/16

FGA

21/26

24/26

21/25

D8S1179

12/14

14/16

14/14

D21S11

31.2/32

29/31.2

30/31.2

D18S51

14/19

13/14

14/17

D5S818

11/11

11/12

11/11

D13S317

9/11

11/11

11/12

D7S820

9/10

10/12

9/12

D16S539

9/9

9/12

9/11

THO1

7/9

7/9

7/9

TPOX

8/11

8/11

8/10

CSF1PO

10/13

10/12

12/13

PentaD

10/12

10/12

9/10

PentaＥ

11/16

11/16

16/18

简明案情：被检父1（父亲）怀疑孩子是其妻子与其父亲（被检父2）所生。53/77简明案情：刘某自称是吕某包养二奶/且与其生有非婚生孩子陈某某（男）。吕某与其妻子张某生有一子吕某某（男）。现吕某意外死亡/因为包括遗产纠纷事宜/张某和刘某共同委托要求判定陈某某是否是吕某亲生孩子。1、有没有确信是吕某生物性检材遗留2、有没有更多近亲属？目标：反推出吕某基因型组合3、同一父系判定，必要时可结合常染色体STR进行同胞关系判定假如为一男一女或者均为女孩，能否判定？54/77个体识别

IndividualIdentification55/77

应用医学和生物学理论和技术判断生物性检材是否同一起源。概念56/77概述生物性检材个体识别意义生物性检材通常细小且分布范围广罪犯难以彻底毁掉或掩盖身份不明尸体、活体或检材辨明身份现场遗落血液、毛发、皮肤、指甲、牙齿、精液、唾液等灾难性事故、水浮尸被拐卖妇女、儿童被追捕罪犯蜡块、切片、组织等为侦查提供线索为审判提供证据57/77生物性检材是经历了环境调整作用人体组织与器官或人体体液、分泌物、排泄物及由它们形成生物性斑痕，因为环境作用使生物性检材含有不确定性，对法医判定人是一个严峻考验。生物性检材法医学特点58/77血痕：现场地面、墙壁、家俱、衣服、凶器、指甲缝等。黑暗现场用鲁米诺喷射（发出荧光）。精斑：可附于衣裤、被褥、草纸、被害人腹壁、大腿和阴毛上。必要时用紫外线照射（银白色带淡紫晕荧光）毛发：常见于地面、被褥、凶器上；死者手中、口中和衣服；强奸案被害人内衣、外阴和大腿间唾液：现场烟头、口香糖、牙签、饮料容器及咬痕上皮肤及其它脏器组织碎片：可见于被害人或罪犯指甲内；交通事故车轮、挡泥板、车厢棱角、底盘生物性检材寻找、采集、包装和送检生物性检材寻找59/77新鲜血：活体，静脉血，EDTA抗凝；尸体，末梢血管血。4℃保留或洁净纱布、滤纸上晾干血痕：必须同时取周围无斑痕部分做对照小件物品整件提取大件物品切割、刮取泥土上整块取下，衬以消毒棉花于盒内以防震碎体液、分泌液、排泄物、器官组织奸杀或死因不明女性尸体：取阴道内容物，必要时取肛门、会阴、口腔标本毛发用镊子夹取，勿损坏附着物皮肤、碎骨、脏器碎块及烟头，用镊子或手套搜集，不可加防腐剂生物性检材采集60/77低温或晾干保留，尽快送检纸带、纱布或玻璃容器包装或存放，勿用塑料膜袋包装物外注明物品名称、起源、数量、采集日期等送检同时附必要对照样本，如被害人或嫌疑人血液、唾液必须附有委托书，且写明送检机关和联络人、送检物品清单、案情介绍、送检目标要求等。包装和送检61/77个体识别普通程序肉眼检验预试验确证试验种属判定个体识别精斑检验血痕检验数量、分布、形状、色泽，重构现场确定部位和分布，便于准确取材，提升检出率筛除非血痕检材联苯胺试验、酚酞试验筛选可疑精斑酸性磷酸酶法证实检材是血痕血色原结晶试验确证检材是精斑精子检出法、环状沉淀反应确定是否是人血ELISA、Alu序列检测确定是否人精斑抗p-30血清血型测定（吸收试验）DNA检测（STR、MtDNA）血型测定（中和试验）DNA检测（STR、MtDNA）62/77一个案例引发我注意63/77委托判定女式内裤裆部显著斑痕是否含精液成份试纸条检测阳性，但阳性区域条带颜色较质控区条带和阳性对照略弱沉渣涂片镜检未发觉精子细胞，仅见上皮细胞二步消化法上清和沉渣分别用ID试剂盒扩增，结果：上清一女性基因型，无三带；沉渣无基因