脂质体的制备

关于脂质体的制备一、脂质体的简单介绍：1965年，英国科学家Bangham发现，把磷脂分散到过量水中，可形成一种由双分子膜组成的闭合囊泡，这种囊泡称为脂质体，切面结构如下图所示：构成双分子层的类脂分为亲水的头部和亲油的尾部两部分，在脂质体的形成过程中，亲水的头部形成膜的内外表面层，而亲油性的尾部处于膜的中间，

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膜壁厚度约为5至7nm，而囊的直径一般在25至500nm之间。脂质体的这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两亲的物质，这些物质被包入脂质体内部的水相，或插入类脂双分子层，或吸附连结在脂质体的表面。第3页,共15页，2024年2月25日，星期天

经过30多年的发展，脂质体在很多领域得到了应用，其中之一是作为一种药物载体，在这方面它已经实现了商业化。美国FDA已审批了数种脂质体类药物。另外，还有很多项目处于临床试验阶段。到1999年，这些药物产品的销售额已超过2.5亿美元。第4页,共15页，2024年2月25日，星期天

二、脂质体作为药物载体的特点

质体表面结合不同的配基如抗体、糖脂等可将药物递送到特定靶组织和靶细胞，具有靶向性。目前作为药物载体系统的物质有很多，但是一般认为最有前途的是脂质体。主要是因为脂质体作为药物载体具有以下优点:(1)制备简单，磷脂无毒，无免疫原性，可被生物膜吸收利用;(2)易携载和释放各种药物，可保护药物，延缓其生物降解，增长给药时间。(3)增强药物的靶向性。第5页,共15页，2024年2月25日，星期天三、制备脂质体的主要原料1、磷脂：脂质体的结构是磷脂双分子层，因此磷脂是制备脂质体的主要原料。2、胆固醇：胆固醇在此作为一种调和剂，在单一磷脂中加人胆固醇可改变其相变温度，对脂质膜的流动性产生双向调节功能:在相变温度以上时，它能降低膜的流动性;在相变温度下时，它又能增加膜的流动性，由此提高脂质体的稳定性和包封率。因此胆固醇是必不可少的原料之一。第6页,共15页，2024年2月25日，星期天

3、抗氧化剂：常用的抗氧化剂有维生素E、丁酸羟甲醛等，加入适量的抗氧化剂可防止卵磷脂中的不饱和脂肪酸被氧化。4、有机溶剂：主要有甲醇、乙醇、氯仿等一种或几种的混合液。第7页,共15页，2024年2月25日，星期天四、脂质体的制备方法

超声法、有机溶剂挥发法、冻融法、冷冻干燥法、机械分散法、薄膜分散法、逆相蒸发法。但最常用的是薄膜分散法和逆相蒸发法。

1、薄膜分散法.将脂质材料（磷脂、胆固醇等）溶解在有机溶剂中，然后在旋转蒸发器上减压蒸去溶剂，使脂质材料在器壁上形成薄膜，再加入适量缓冲液，通过超声使之充分水合分散，即形成乳白色的脂质体混悬液。为降低脂质体的粒径或使脂质体的粒径均匀，可在一定压力下通过一定孔径的滤膜。即得到粒径均匀分布的载药脂质体。第8页,共15页，2024年2月25日，星期天

2、逆相蒸发法将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿、乙醚等，加入待包封药物的水溶液进行短时超声，直至形成稳定的水／油乳剂。然后减压蒸发除去有机溶剂，达到胶态后，加入缓冲液，再进行超声处理，即形成乳白色的脂质体混悬液。同薄膜分散法一样，为降低脂质体的粒径或使脂质体的粒径均匀，可在一定压力下通过一定孔径的滤膜。据相关资料介绍，逆相蒸发法制得脂质体的包封率比薄膜分散法的低。第9页,共15页，2024年2月25日，星期天五、制备过程中应注意的几个问题

1、油水比：即油相(胆固醇、磷脂等)与水相(缓冲水溶液)的体积比。油水比小时，不能很好地形成较稳定的油包水型乳液;油水比过高，则脂质体中包人的水溶性药物绝对量太少。仙人掌SOD脂质体的油水比为3:1-4:1时，包封率比较高，针对具体药物的最佳的油水比，需要在实验中测定。第10页,共15页，2024年2月25日，星期天

2、相变温度(Tm)：脂质体双分子层由凝胶相转变为液晶相的温度。卵磷脂的相变温度为50℃，制备脂质体时温度必须达到其相变温度以上，才能使脂质体双分子层排列紧密，使脂质体稳定性增强。

3、磷脂与胆固醇的比例：在一定比例范围内，胆固醇比例越大，包封率越高，但胆固醇比例过大时，会导致组成脂质体的磷脂量太少，脂质体膜形成困难，且不牢固，第11页,共15页，2024年2月25日，星期天

且由此形成的脂质体膜亲水性太强，膜也容易破坏。有关文献介绍磷脂与胆固醇的物质的量之比为7：2时制得脂质体的包封率最高，当然，它还与药物制备方法和辅料质量有关。真正适合我们的比例需要我们在今后的实验中测定。第12页,共15页，2024年2月25日，星期天六、脂质体的大量生产

相关资料上介绍的各种各样的脂质体的制备都是在实验室里进行的，到目前为止还没有发现有关脂质体大量生产的资料，更没有查到相关的制造设备。而咱们的毕业设计中就有设计脂质体生产设备这个题目，要求针对前面介绍的两种脂质体生产方法（薄膜分散法和逆相蒸发法），分别设计出相关的批量生产的设备。第13页,共15页，2024年2月25日，星期天

由于没有现成的经验可以借鉴，我们只能利用实验室的生产仪器的原理进行设计。前面提到用薄膜分散法制备是将脂质材料（磷脂、胆固醇等）溶解在有机溶剂中，在旋转蒸发器上减压蒸去溶剂，使脂质材料在器壁上形成薄膜，然后再加缓冲液进行超声处理。即首先要将脂质材料形成非常薄的薄膜，这就要求我们设计