进出口化妆品中黄樟素和6-甲基香豆素的测定 气相色谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口化妆品中黄樟素和6-甲基香豆素的测定气相色谱法Determinationofsafroleand62006-04-25发布2006-04-25发布中、华人民共，和国国家质量监督检验检疫总局进出口化妆品中黄樟素和6-甲基香豆素的测定气相色谱法本标准规定了进出口化妆品中黄樟素(safrole)和6-甲基香豆素(6-methylcoumarin)的气相色谱测定方法。本标准适用于化妆品中黄樟素和6-甲基香豆素的测定。本标准黄樟素的测定低限为0.0005%,6-甲基香豆素的测定低限为0.001%。质谱法的确证低限为黄樟素为0.0005%,6-甲基香豆素为0.001%。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6379测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)(所有部分)用甲醇超声提取化妆品中的黄樟素和6-甲基香豆素，过滤，滤液注入配有FID检测器的气相色谱仪检测，外标法定量，采用气相色谱质谐(GC/MSD)进行确证。4试剂与材料除另有规定外，试剂均为分析纯。4.1甲醇：忧级纯或者色谱纯。4.2无水硫酸钠：于650℃灼烧4h,储于密闭干燥器中备用。4.3标准品：黄樟案：纯度≥99,0%,6甲基香豆素：纯度≥99,0%。4.4标准储备液：准确称取黄样素，6-甲基香豆素各0.1000g置于100mL容量瓶中，用甲醉定容，振荡均匀，即得黄樟素、6-甲基香豆素浓度各为1000pg/mL的混合标准储备液。储备液储存在4℃冰箱中，可使用2个月。4.5标准工作液：准确吸取1mL混合标准储备液(4.4)于10mL.容量瓶中，用甲醇定容，充分摇匀，即的标准工作液于的混合标准工作溶得100pg/mL的混合标准工作溶液；分别吸取0,5ml,1mL、3mL、5mL、8的标准工作液于的混合标准工作溶10mL容量瓶中定容，即得到5μg/mL,10μg/mL、30pg/mL,50pg/mL,80μg/mL.液，在4℃保存，可使用1周。5.1气相色谱仪配氢火焰离子化检测器(FID)。5.2气相色谱-质谱仪(GC/MSD)。5.3超声波清洗仪。5.4注射式样品过滤器(有机溶媒型，0.45μm)。25.6容量瓶。6测定步骤6.1样品处理称取化妆品1.0g,精确到0.001g,置于50mL锥形瓶中，准确加入甲醇6mL混匀，于超声波清洗仪上超声20min,溶液转入10mL的容量瓶中，用少量无水甲醇清洗锥形瓶，洗液转人10mL容量瓶中，用甲醇定容后加入3g无水硫酸钠(Na₁SO₄)脱水，经注射式样品过滤器(5,4)过滤，滤液供测定用。6.2.1气相色谱(GC/FID)条件a)色谱柱：HP-5毛细管柱[30m×0.32mm(内径)×0.25μm]或相当者；b)柱温程序：初始温度为90℃,保持1min后以10℃/min的速率升至210℃,保持5min;c)进样口温度；200℃;d)检测器温度；200℃;e)载气：氮气1.0mL/min(纯度为99.999%);f)燃气：氧气30mL/min(纯度为99.999%);g)助燃气：空气300mL/minth)尾吹N₂流量25mL/min;i)进样方式：分流进样，分流比1:5;6.2.2气相色谱-质谱仪(GC/MSD)条件a)色谱柱：HP-5MS柱[30m×0.25mm(内径)×0.25μm]或相当者；b)柱温程序：初始温度为90℃,保持1min后以10℃/min的速率升至210℃,保持5min;c)进样口温度；200℃;d)色谱-质谱接口温度；280℃;e)载气：氮气1.0mL/min;h)测定方式：总离子流(TIC)方式，参见附录C;i)监视离子范围(m/z):45~250;j)进样方式：分流方式，分流比1:5,溶剂延迟3.0min;6.2.3定性测定用气相色诺-质谱仪进行样品定性测定，如果校出的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，且所选择的离子比与标准样品的离子比相一致，则可判断样品中存在黄樟素和6-甲基香豆素。6.2.4定量测定用气相色诺氢火焰离子化检测器进行样品定量测定。用配制的标准工作溶液(4.5)分别进样，绘制峰面积对标准溶液浓度的五点标准工作曲线，用标准曲线对样品进行定量，样品溶液中黄樟素和6-甲基香豆素的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色诺条件(6.2.1)下，黄棒素和6甲基香豆素的参考保留时间分别为8.0min和11.4min。黄樟素和6-甲基香豆素标准物质的气相色谐图和总离子流图及质谐图参见附录A,附录B和附录C。6.3平行试验按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。 (1)lgr=0.9930lgm₁-1.2984 (2)lgr=0.9261lgmy-1.2336 (3) (4) (5)(资料性附录)(资料性附录)标准物质GC/MS总离子流图(资料性附录)D.1化妆品中黄樟素添加浓度及平均回收率的试验数据：——在添加量为0.0005%时，同收率为102.4%;——在添加量为0.003%时，回收率为106.1%;—在深加量为0.005%时，回收率为104.0%;——在添加量为0.01%时，回收率为1