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普通微生物学普通微生物学第1页★一步生长(One-stepgrowth)普通微生物学第2页高浓度敏感细菌+适量噬菌体相混合一定时间(5min)除去游离噬菌体进行高倍稀释培养定时取样测定噬菌体数★测定噬菌体生长方法普通微生物学第3页★一步生长曲线普通微生物学第4页

潜伏期(latentphase)=eclipsephase+intracellularaccumulationphase)—从噬菌体吸附菌细胞至菌细胞释出新噬菌体最短时间。裂解期(risephasse)—宿主裂解,噬菌体数不停增加时期。平稳期(plateauphase)—宿主全部裂解,噬菌体达最高点后时期。裂解量(Burstphase)—每个被感染细菌释放新噬菌体平均数。裂解量(Burstphase)=---------------------------------★进行一步生长曲线测定,能了解噬菌体在菌体内最短潜伏期,和平均收获量,还可测知理化原因改变对噬菌体感染循环时间和对每个被感染噬菌体释放噬菌体影响。裂解期平均噬菌体数潜伏期平均噬菌体数★裂解量普通微生物学第5页(2).TheLysogenicLifeCycleofTemperateBacteriophages普通微生物学第6页

Adsorption

Penetration

ProphageFormation

MaintainingtheProphageduringtheLysogenicLifeCycleReplication

MaturationRelease

But,followingspontaneousinduction,

Thebacteriuminsertsitsgenomeintothebacterium'snucleoidtobecomeaprophage.

Asthebacteriumreplicates,theprophagereplicatesasapartofthebacterium'snucleoid.普通微生物学第7页Fig.1:LysogenicLifeCycleofaTemperateBacteriophage

普通微生物学第8页温和噬菌体与溶源性①★温和噬菌体(temperatephage)----吸附并侵入细胞后,噬菌体DNA整合在宿主染色体组上,并可长久随宿主DNA复制而同时复制,因而在普通情况下不进行增殖和引发宿主细胞裂解噬菌体,如E.coli

、P1、P2,SalmonellatyphimuriumP22等。★原(前)噬菌体(prophage)----处于整合态噬菌体核酸。★温和噬菌体特点——1.其核酸类型都是dsDNA;2.含有整合能力;3.含有同时复制能力。普通微生物学第9页Lambda-Phage(E.Coli)Drawingofphagelambda

Lambda-Phage普通微生物学第10页★溶源性(lysogeny)------温和噬菌体侵染敏感细菌后不裂解它们,而与细菌共存特征。★温和噬菌体三种存在形式:游离态整合态营养态②普通微生物学第11页★溶源性细菌(lysogen或lysogenicbacteria)——在核染色体组上整合有前噬菌体并能正常生长繁殖而不被裂解微生物。★溶源性菌株命名:如:E.coliK12(

)③普通微生物学第12页★温和噬菌体在细菌染色体上整合位置:

就当前所知,全部温和噬菌体核酸都是双链DNA。按照温和噬菌体DNA与细菌DNA结合部位不一样,又可将其分成两类:①只有一个特定结合部位温和噬菌体:如:大肠杆菌噬菌体②含有多个或不定部位温和噬菌体:如:大肠杆菌P1噬菌体鼠伤寒沙门氏菌P22噬菌体。④普通微生物学第13页Lambdaattachmentsites普通微生物学第14页PhagelambdaentersthecellandintegratesintothehostcellbyreciprocalrecombinationatapreferredsitebetweenbioandgalontheE.colichromosome.Aberrantexcisionfromthehostchromosomecangeneratespecialisedtransducingphage.Lambdaattachmentsites普通微生物学第15页★烈性噬菌体与温和噬菌体生活史比较:吸附侵入增殖成熟裂解整合同时复制自发或诱导屡次循环裂解性循环溶原性循环⑤普通微生物学第16页普通微生物学第17页普通微生物学第18页⑥★溶源性菌株检验:方法:在适当培养基中培养待测菌样→→在对数期进行紫外线照射,诱导原噬菌体复制→→深入培养→→过滤培养物,去处活菌体→→滤液与指示菌混合、倒平板(或将滤液加到敏感性指示菌液体培养物中)→→观察是否有噬菌斑出现(或使菌液变清).●敏感性指示菌——遇溶源菌裂解后所释放温和噬菌体会裂解性生活周期非溶源性菌株,这些菌株能够从自然界或菌种库中取得。普通微生物学第19页☆可稳定遗传,即溶源菌子细胞普通也是溶原性。☆自发裂解和诱发裂解(含有产生噬菌体潜在能力)☆含有抗同原噬菌体感染“免疫性”☆溶源性细菌复愈☆取得新生理特征(溶源性转变)☆不足转导⑦★溶源菌有以下特征:普通微生物学第20页AmobofbacteriophageattackingE.coliTheovalobjectthatstretchesdiagonallyacrossthemicrographtop-to-bottomis

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