支原体菌株复苏标准操作规程_第1页
支原体菌株复苏标准操作规程_第2页
支原体菌株复苏标准操作规程_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

。支原体菌株复苏操作规程部门/职务姓名签字日期起草人审核人批准人批准人生效日期：【年月日】颁发部门分发部门1目的建立规范支原体菌株复苏的标准操作规程，确保支原体复苏质量和活率。2范围适用于本公司的支原体菌株复苏操作。3职责4定义无5内容5.1仪器设备5.1.1生物安全柜、恒温培养箱、移液枪、高压蒸汽灭菌器、混匀仪、水浴锅（56℃）、电动移液器。5.2试剂及耗材5.2.11000uL枪头、灭菌试管、灭菌胶塞、血清、支原体肉汤培养基、精氨酸支原体肉汤培养基、10mL刻度移液管。5.3准备工作5.3.1将胎牛血清在56℃水浴锅中水浴1小时，灭能。5.3.2将试管用锡纸包裹好试管口，将胶塞放进饭盒，经过121℃，30分钟，进行高压蒸汽灭菌。5.4培养基配制5.4.1支原体肉汤培养基：21g干粉培养基，加1L纯水，加热到溶解，121℃，15分钟高压蒸汽灭菌。5.4.2精氨酸支原体肉汤培养基：21g干粉培养基，加1L纯水，加热到溶解，121℃，15分钟高压蒸汽灭菌。5.5操作步骤 5.5.1生物安全柜提前开启紫外灯消毒30分钟，培养基经灭菌，待温度下降到45℃以下。5.5.2将培养基分装，每支试管8mL，加入2mL灭能血清，混匀5.5.3若为零代将菌种从-4℃冰箱取出，用75%酒精进行表面消毒喷，用无尘布擦拭干净后，放入生物安全柜内，用止血钳将铝盖打开。（注意：将所有有关菌株的物品禁止随意丢弃，防止发生污染与泄露）。5.5.4若菌株为零代菌种肺炎支原体用1.0mL支原体肉汤培养基轻轻地旋转冷冻管以充分混合并完全溶解,若菌株为零代菌种口腔支原体用1.0mL精氨酸支原体肉汤培养基轻轻地旋转冷冻管以充分混合并完全溶解。5.5.5将溶解混合好的肺炎支原体、口腔支原体0.5mL分别接种于9.5mL支原体肉汤培养基和9.5mL精氨酸支原体肉汤培养基中混匀，经36℃±1℃培养至肺炎支原体培养基由橙红色变为橙黄色，传代，口腔支原体培养基由橙黄色变为橙红色，可传代。5.5.6若为冻存后的菌种从-80℃冰箱取出，用37℃水浴溶解后，转移到传递窗内，用75%酒精进行表面消毒喷，用无尘布擦拭干净后，转移到生物安全柜内，用止血钳将封口膜撕开，打开冻存管。（注意：将所有有关菌株的物品禁止随意丢弃，防止发生污染与泄露）。5.5.7溶解后的菌种直接用微量移液枪转移到相应的培养基内，混匀。肺炎支原体用9.0mL支原体肉汤培养基，口腔支原体用9.0mL精氨酸支原体肉汤培养基。5.5.8经36℃±1℃培养至肺炎支原体培养基由橙红色变为橙黄色，传代，口腔支原体培养基由橙黄色变为橙红色，可传代。6派生记录6.1《支原体菌

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 产品手册

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论