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全国临床检验操作规程

全国临床检验操作规程（第

3版）

精液检查

一.标本收集

，二次之间间隔应＞7天，但

不超过3周。

,但不超过7天。

O

,不宜采用避孕套内的精

液。某些塑料容器具有杀精

子作用，但是否合适应事先

做实验。

~40℃。

（或）识别号（标本号或条

码），标本采集日期和时间。

,精液也必须按照潜在生物

危害物质处理，因为精液内

可能含有肝炎病毒、人类免

疫缺陷（病毒）和疱疹病毒

等。

二.一般性状检查

一般性状检查包括记录精

液量、颜色、透明度、粘稠

度和是否液化。

正常精液呈灰白色

或乳白色，不透明。棕色或

红色提示出血。黄色可能服

用某种药物。精子浓度低时

精液略显透明。

正常精液是一种均匀黏

稠的液体，射精后立即凝

固，30min后开始液化。若

液化时间超过60min考虑

为异常，应记录这种情况。

正常精液可含有不液化的

胶冻状颗粒。

用刻度量筒或移液管

测定。正常一次全部射精精

液量约2~5ml。精液量过多

或过少是不育的原因之一。

在精液全部液化后，用

Pasteur滴管吸入精液，然

后让精液依靠重力滴落，并

观察拉丝长度。正常精液呈

水样，形成不连续小滴。黏

稠度异常时，形成丝状或线

状液滴(长度大于2cm)o

也可使用玻璃棒或注射器

测定黏稠度。

用精密试带检查。

三.精子存活率

精子存活率(motility)用

活精子比例来反映。

【试剂】

5g/L伊红Y染色液:伊红

Yg,加生理盐水至100

mlo

【操作】

(1)在载玻片上加新

鲜精液和伊红溶液各

1滴，混匀后，加上

盖玻片，30s后在高

倍镜下观察，活精子

不着色。死精子染成

红色。

(2)计数200个精子,

计算未着色(活精子)

的百分率。

【试剂】

(1)10g/L伊红Y染色

液:伊红1g,加蒸谯水至

100mlo

(2)100g/L苯胺黑染色

液:苯胺黑10g,加蒸馈水

至100mlo

【操作】

(1)取小试管，加新鲜

精液和伊红溶液各1

滴，混匀。

(2)30s后，加苯胺黑

溶液3滴，混匀。

(3)30s后，在载玻片

上，加精液-伊红•苯

胺黑混合液1滴，制

成涂片，待干。

(4)油镜下观察，活精

子为白色，死精子染

成红色，背景呈黑色,

计数200个精子，计

算未着色活精子的百

分率。

(HOS)

【试剂】

膨胀液：g,g,加蒸馈水

至100mlo分装，-20℃

冷冻保存，使用前解冻，

并充分混匀。

【操作】

(1)取小试管，加1ml

膨胀液，37℃预温5

min。

(2)ml液化精液，轻

轻搅匀，在37℃孵育

至少30min。

(3)在相差显微镜下

观察精子，膨胀精子

为尾部形状发生变化

的精子，即活精子。

计数200个精子，计

算膨胀精子的百分

率。

【参考区间】

在排精30〜60min内,约

有70%以上精子应为活

动精子。精子低渗膨胀试

验应有60%以上精子出

现尾部膨胀。

【附注】

(1)如室温低于10℃

时，应将标本先放入

37℃温育5~10min

后镜检。

(2)某些标本试验前

就有尾部卷曲的精

子，在HOS试验前,

计算未处理标本中尾

部卷曲精子的百分

数，实际HOS试验

结果百分率就等于测

定值减去未处理标本

中尾部卷曲精子百分

率。

(3)HOS也是精子尾

部膜功能试验。

四.精子活力

WHO推荐一种无需复杂

设备而能进行简单精子

活力（activity）分级的方

法。

【操作】

取10U1标本涂片，连续

观察至少5个视野，对

200个精子进行分级，首

先计数a级和b级精子，

随后在同一视野内计数c

级和d级精子。

【结果判断】

根据下述标准把精子活

力分为a、b>c>d四级。

a级:快速前向运动:37℃

时速度225um/s,或

20℃时速度220um/s

（25um大约相当于精

子5个头部的长度，或半

个尾部的长度）。

b级:慢速或者呆滞的前

向运动。

c级:非前向运动（V5U

m/s）o

d级:不动。

【参考区间】

正常精液采集后60min

内,a级+b级精子达50%

以上。

五.精子计数

【试剂】

精子稀释液:碳酸氢钠5

g,40%甲醛溶液1ml,

蒸馈水100ml,待完全溶

解过滤后使用。

【操作】

1.ml,吸液化精液20P

1,加入稀释液内摇匀。

2.充分摇匀后，滴入改良

Neubauer血细胞计数

池内,静置1~2min,

待精子下沉后，以精子

头部作为基准进行计

数。

3.如每个中央方格内精

子少于10个，应计数

所有25个中方格内的

精子数。

4.如每个中央方格内精

子在10〜40个，应计数

10个中方格内的精子

数。

5.如每个中央方格内精

子多于40个，应计数5

个中方格内的精子数。

【结果判断】

精子数二计数结果*25*1

*20*103/ml

计数中方格数

计数池高度

:计数结果*.

*5*105/ml

计数中方格数计数

池高度

【参考区间】

正常男性220*

106/ml

【附注】

1.收集精液前避免性生

活3~7天。收集精液标

本后应在1h内检验，

冬季应注意保温。

2.出现一次异常结果，应

隔1周后复查，反复查

2~3次方能得出比较正

确的结果。

3.如低倍镜、高倍镜检查

均无精子，应将精液离

心沉淀后再涂片检查，

如两次均无精子，报告

“无精子”。

六.精子形态观察

【试剂】

改良巴氏染色液、Shorr

染色液、Diff-Quik快速

染色液:商品化染色液一

般质量均佳，但实验室也

可自行配制。

【操作】

1.在载玻片上滴1滴精

液，约5-20U1,采用

压拉涂片法或推片法

制片。

2.待干后，巴氏染色法用

等量95%乙醇和乙醛

混合液固定5~15min；

Shorr染色法用75%乙

醇固定1min；

Diff-Quik快速染色法

用甲醇固定15So

3.作改良巴氏、Shorr或

Diff-Quik染色，然后

在油镜下观察。

4.精子头部顶体染成淡

蓝色，顶体后区域染成

深蓝色，中段染成淡红

色，尾部染成蓝色或淡

红色，细胞质小滴位于

头部后面或中段周围，

巴氏染色染成绿色。

【结果判断】

评估精子正常形

态时应采用严格标准，

只有头、颈、中段和尾

部都正常的精子才正

常。精子头的形状必须

是椭圆形，~~

顶体的界限清晰，约占

头部的40%~70%。中

段细，宽度vlum,,

且在轴线上紧贴头部，

细胞质小滴应小于正

常头部大小的一半。尾

部应是直的、均一的，

比中段细，非卷曲，其

长约为45um。

所有形态学处于临界

状态的精子均列为异常。

异常精子可有:①头部缺

陷:大头、小头、锥形头、

梨形头、圆头、无定形头、

有空泡头、顶体过小头、

双头等；②颈段和中段缺

陷:颈部弯曲、中段非对

称地接在头部、粗的或不

规则中段、异常细的中段

等；③尾部缺陷:短尾、

多尾、发卡形尾、尾部断

裂、尾部弯曲、尾部宽度

不规则、尾部卷曲等。

【参考区间】

正常人精液中正常

形态者230%（异常精子

应少于20%,如超过20%

为不正常）。

七.精子凝集

精子凝集是活动

精子以各种方式，如头

对头，尾对尾或头对尾

等彼此粘在一起。以分

级方式报告，从“」（没

有凝集）~“3+”（所有

可动的精子凝集到一

起）。凝集的存在，提

示可能为免疫因素引

起不育。

A.非精子细胞

精液含有的非精子

细胞成分，成为“圆细

胞”，这些细胞包括泌

尿生殖道上皮细胞、前

列腺细胞、生精细胞和

白细胞。正常人精液中:

圆细胞

正常精液中白细胞，

主要是中性粒细胞，数

量不应超过

过多提示感染，为白细

胞精子症。

九.其它成分

精液中能够有结

晶体、卵磷脂小体、淀

粉样体、脂滴、脱落上

皮细胞等。

十.临床意义

1.正常精液呈灰白色,

久未排精者可呈淡黄

色；离体30min后，完

全液化。根据精液检查

结果，临床上常用于诊

断男子不育症及观察

输精管结扎术后的效

果。

2.正常精子活力一般

在a级225%。如活力

a级<25%；a级+b级

<50%可成为男性不育

的原因。

3.精索静脉曲张症患

者精液中常出现形态

不正常的精子。

4.血液中有毒性代谢

产物、接触铅等污染

物、应用大剂量放射线

及细胞毒药物等可使

精子形态异常。

前列腺液检查

一.标本收集

临床医师作前列腺按

摩术后，采集标本于清洁玻

片上，立即送检。

二.检查内容

记录液体颜色、是否混有

血液、有无脓块等。湿片

镜检，高倍镜下观察白细

胞、红细胞、卵磷脂小体,

其次为上皮细胞、精子、

淀粉样体等。革兰染色后

检查细菌。

三.报