动物营养学(讲义)

动物营养学

第冰一--版dLr-

王康宁

四川农业大学动物营养研究所

二OO二年十月

目录

第一章序言

第二章动物营养研究方法概论

第一节前言.........................................................1

一.研究内容................................................1

二.研究方法................................................1

第二节化学分析法..................................................2

饲料成分.................................................2

二.动物组织和血液成分.....................................2

三.动物粪便及成分........................................2

第三节消化试验.....................................................2

一.进展...................................................2

二.试验要点...............................................3

第四节平衡试验.....................................................4

一.作用...................................................4

二.能量平衡...............................................4

三.N平衡.................................................7

第五节饲养试验（生长效应法）......................................7

—.作用.....................................................7

二.原理....................................................7

三.使用原则................................................7

四.试验设计的注意事项.....................................7

第六节试验技术.....................................................9

一.同位素示踪及同位素稀释技术.............................9

—.外科造疹技术及吻合术....................................9

第三章饲料养分营养价值的评定

第一节饲料蛋白质营养价值的评定...................................11

引言....................................................11

二.评定方法的历史回顾....................................11

三.AA生物效价的评定....................................12

四.反刍动物蛋白质质量评定新体系..........................15

五.国际上推行的反刍动物蛋白质新体系.....................17

第二节矿物元素和维生素生物效价的评定.............................17

第三节饲料能值的评定..............................................19

一.概况...................................................19

二.饲料有效能的实测......................................19

三.用可消化养分间接推算饲料有效能.......................21

四.根据饲料化学成分预测饲料有效能.......................24

第四章动物养分需要量的评定

第一节能量需要量的测定...........................................30

一.反刍动物..............................................30

二.猪能量需要量的确定....................................32

三.禽能量需要量的确定....................................34

第二节蛋白质和氨基酸需要量的评定.................................35

一.反刍动物蛋白质需要量的评定...........................35

二.猪蛋白质、氨基酸需要量的评定.........................37

三.禽的蛋白质、氨基酸需要量的估计.......................43

第三节维生素及矿物元素需要量的评定.............................51

饲粮配合的技巧及示范................................................55

-饲粮配合的技巧.........................................55

二.饲粮配方试例..........................................55

三.可以添加合成氨基酸时的配方方法.......................56

四.合理确定维生素和微量元素添加量.......................56

饲料原料价格的合理估计方法.........................................56

估计方法的原理..........................................56

二.现在我们计算菜籽粕的适宜价格...........................57

第一章序言

一、动物营养学的目的、任务

动，*葬一韧物摄取、消化、吸收、利用饲料中管券物质的全过程,是一系列

化学、物理及生理变化过程的总称。它是动物一翎生命活动《生存、生长、繁殖、产

奶、户蚕、兔疫等)的基础，整个生命过程都离不开营薄；

31•鹫葬堂一确究前物营端的科学；

幼,善葬幸的修，一碉究动物对养分的需求、养分的作用及功靡、饲料养分的

利用效率一形成营养需要或饲林标准；

31»ff¥KHN—。最少的投入获得最大的产出一实现高效饲养。

二、am善葬学研究的内，

1、对营养物质的需求：需要什么营养物质，营养物质的作用及功第，营养不足密

来的危害,、确定营就需要量的方法，营蒜需要量的确定及其影响因素。

2、饲料营养价值的评定：饲料中含有哪暨动物需要的营端物质，各种营养物质在

体内的消化、吸收、代调特点、效率及其影响国泰。

3、作为模型动物砒究营点物质代调及调控：从分子水平上(酶、激素和除)确究

营就物质代谢的基本德理及其调控——为客学、兽客学、营就学的碉究提供基本的参皴,

为营就的调控提供新的途径和方法。

4、向其它学科拓展：与其它学科超结合，如兔瘦学、微生物学、生态学等，倭动

物营养学能够怫调的发展——拓展自己的确究领域。

三、*«S£KiMMS

1、动物营薛需要及需要量评定方法；

2、饲料就分生物效价的评定及评定方法。

1动物营点学讲义

2.孰物营募学《杨属主编,2001)

3.AnimallNutrition(Maynard,1979,)

4.NutritionrequirementsofPoultry（1994f第九版）

5.NutritionrequirementsofSwine（1998,第十版）

6.NutritionrequirementsofDairyCattle（20019第7版）

第二章动物营养研究方法概论

第一节前言

一、研究内容

C能值

营养物质的需要量的评定，蛋白质、氨基酸

矿物元素

〔维生素

「能值

养分生物效价的评定J蛋白质、氨基酸

矿物元素

I维生素

二、研究方法

1.化学分析、物理测试

综合法——饲养试验

析因法——平衡试验（屠宰试验）

（斜率法

2.动物试验＜（饲养试验——生长效应法\平行线法

三点法

【标准曲线法

「体内

消化试验J

生物效价Wi体外

代谢试验

生物效价的几种表示方法：

1）表观、真实消化率

2）表观、真实利用率

3）表观、真实代谢率

4）沉积率（扣除周转的净沉积）

"同位素示踪法

3.外科造屡

I无菌技术

第二节化学分析法

一饲料成分

1.Weender法1860年，BeiGoettingenDM.GE.CP.EE.CF.NFE.Ash；

2.VanSoest1967的纤维分析法CP.EE.OR.Ash.NDF（hemicellulose+

cellulose+ADL）＞ADF（cellulose+ADL）；

①NDF分析：100mlAD加1克样品

NDF（中性洗涤液）=1升+30g12烷基硫酸钠+18.6克乙二胺四乙酸二氢钠盐+4.56g

Na2HPO4+10mla一乙氧基乙醇（或乙二醇乙酸）pH（6.9-7.1）。

注意：过滤杯的孔径不要太小，粗孔40-50mL孵化时加淀粉酶，便于过滤。5-10min

煮沸，微沸一小时。

②ADF分析：要用16烷基甲基溪化胺，易过滤，不必加淀粉酶，测定较NDF容

易。

3.矿物元素、维生素、脂肪酸、抗营养因子、重金属、霉菌毒素、药物残留。

二动物组织和血液成分

1.各种营养物质

2.与营养物质有关的功能酶或相关酶以及由此引起的代谢中间产物的积累，尾产

物减少，如：Se-GSH-px（glutathioneperoxidase）,Zn.血清碱性磷酸酶，Cu.血浆铜蓝蛋

白氧化酶，Mo-黄喋吟氧化酶，Bi-磷酸硫胺素（辅酶），B2-谷胱甘肽还原酶，生物素-

血浆丙酮酸竣化酶，B6-转氨酶（血浆或红细胞中酪氨酸或天门冬氨酸）、血浆尿素N等o

三动物粪便及成分

（1）粪，主要是消化、代谢和平衡试验测能、氮、AA、钙、磷及其它矿物元素和

维生素的效价及存留量。

（2）尿、能、氮、AA、代谢产物。如：

叶酸缺乏一一古胺甲基谷氨酸（FIGLV）排泄增加（中间产物）

烟酸缺乏——尿中N-甲基烟酰胺减少（尾产物）

B6缺乏——尿中黄尿酸或犬尿酸的量增加（中间产物）

第三节消化试验

-、进展

传统的全收粪法测DE、可消化养分一离体消化一瘦管技术（测AA消化率、蛋白

质降解率）。

尼龙袋离体消化

瘤胃消化道消化液人工消化液

小肠

二.试验要点

1.影响饲料养分消化率测定的因素：动物种类、年龄、性别、饲喂量、饲粮成分。

2.动物选择：一般公畜。

3.头数或只数：一般4头（只）以上，AA消化率可多到16-24只。

4.预饲期和试验期的长短：取决于动物消化道食糜排空时间的长短。一般大动物

长，小动物短；难消化的长，易消化的短。

牛羊马猪家禽

10—147-105-103-5天

5.试验（或被测）饲料或日粮的准备（配合原则）

取样均匀，干物质测定准确（注意测定时间），尽可能补充维生素、微量元素等，

测氨基酸消化率可补充能量(葡萄糖)。在不影响试验的情况下，尽可能接近全价日粮

需要营养水平。

强饲饲料应粗一点，能通过20目即可，便于通过强饲管，缩短强饲时间。

6.粪(便)收粪

采用集粪袋，家禽肛门缝合中空的瓶盖，缝合时每针穿的皮肤要深(0.2cm)、宽

(0.5-0.8cm)＞密一点(4-5个固定点密

猪用皮带或布条固定，注意前腿前和后腿前两圈的固定，背中线，两侧，3根与集

粪袋口3根线相连；集粪袋口用0.3cm粗的铁丝，做成直径为12-15cm的圆圈，必要部

下凹，铁丝可用塑料包双层，以免铁丝擦伤尾部，长25-30cm,宽12-15cm,下部10cm

或三角形。

粪样按总量1/10-1/50取，每100g力口10%的硫酸(盐酸)5-10ml固定N,甲苯数滴

防腐。计算样品量时应扣加入H2so4的重量和能量。

家禽因粪便少可全部用作样品，尽量少用水洗粪袋，也可在粪袋中混交取50-80%

样，以减少样品总量和干燥的时间。

7.消化率计算方法

①排空强饲法(收集4048小时排泄物，强饲量为体重的3-5%)

消化率=吟等

②顶替套算法

测试日粮可消化物量-测试日粮中基础日粮可消化量

消化率(％)=(g)(g)

被测饲料顶替基础日粮的量(g)

③指示剂法

饲料中指示剂含量％粪中养分含量％lnn

消化率(%)=100-

粪中指示剂含量％饲料中养分含量

8.顶替量

一般30-50%,适口性很差的不低于15%。

9.指示剂的回收率

一般要求85%以上；内源指示剂注意饲料杂质和均匀度的影响。

第四节平衡试验

一.作用

研究营养物质的收支平衡，获得需要量和利用率等基本参数。

二.能量平衡

研究能量代谢的方法

（一）直接法

直接测畜体产热，原理简单、设备仪器昂贵。

1.绝热式：在水温4℃时1毫升水上升1℃为1卡。

2.梯度型测热装置：测热的传导速率，即：

dH/dt=XSL（Ti-T0）

入：卡/cm.秒.℃

S：室的表面积

L：室壁厚度

例子：阉牛每日的能量平衡（动物营养学教材表12-3）,直接测畜体产热，粪、尿、

皮屑、甲烷，增重都测其热量。

表2-1阉牛每日的能量平衡（kJ）（弓自Maynard,L.A.,1979）

项目能量摄入能量支出

6988g梯牧草（猫尾草）116065

(timotyhhay)

400g亚麻籽7581

16619g粪59621

4357g尿5065

37g皮屑脱落物368

142g甲烷7937

畜体产热48110

机体增重2545

合计123646123646

（-）间接法

CO

1.原理：根据呼吸蜡（RQ）=*

°2

全脂氧化（克分子）：CI6H32O2+23O2=16CO2+16H2O

RQ=—=0.7产热10.033MJ

23

全糖氧化（克分子）：C6HI2O6+6O2=6CO2+6H2O

RQ=-=\产热2.816MJ

6

表2・2不同的呼吸熠所对应的耗。2和CO2生成的产热量（kJ）引自Maynrad,L.A.,1979）

RQ1LO21LCO2Igco2

0.7017.09628.00814.259

0.7519.82826.43913.460

0.8020.08725.10812.782

0.8520.34723.93712.213

0.9020.60222.89111.652

0.9520.85721.95411.175

1.0021.11721.11710.749

表2-3根据24h的耗氧、二氧化碳生成量和尿氮估计产热（引自maynard,L.A.,1979）

基础数据

耗氧392L

二氧化碳生成量310.7L

尿氮14.8g

蛋白质代谢数据

蛋白质氧化量（14.8gX6.25）a92.5g

产热(92.5gX18kJ/g)a1665kJ

O2消耗(92.5gX0.96Ug)a88.8L

CO2生成(92.5gX0.77L/g)a71.2L

碳水化合物和脂肪代谢数据

耗氧(392L-88.8L)303.2L

二氧化碳生成量（310.7~71.2L）239.5L

非蛋白RQ(239.5/303.2)b0.79

RQ为0.79时消耗303.2L氧产热6079kJ

总产热(1665+6079)7744kJ

注：a.每克蛋白质体内氧化产热18KJ,消耗0.96L和产生0.77L二氧化碳;

b.当RQ为0.79时，每消耗产热是20.05KJ。

例方程组：r-6O2+6CO2=2.816

l_2302+16C02=10.033

解方程组可求得每克分子。2产热0.3609MJ,每克分子CO2产热0.1084MJo

HP（产热•兆焦）=0.360902+0.1084CO2

如果考虑蛋白质氧化和CH4：

HP（产热）=3.866X02+1.200XCO2+0.518XCH4-1.431XN

（千焦）（升）（升）（升）（克）

2.仪器

（1）密闭式：全密闭，。2计量进入，废气抽出CO2、H2。经H2s。4和碱石灰吸收循

环加热再进入。

（2）开放式：进入的是加热（与室内平衡）的空气，废气抽出计量，一部分取样分

析。2和C02（也可扣CH4）,然后与进入空气。2和C02比较可算出。2、co2的变化量。

（3）面具式：原理类似开放式测热装置，根据进出气体。2和C02的含量计算消耗的

。2和呼出的C02。

例：根据24小时耗。2和C02生成量及尿氮估计产热（动物营养学教材174页表

12-5）o

（三）C、N平衡法

1.原理体内沉积是脂肪和蛋白质，根据每克脂肪和蛋白质的C、N含量和产热量

可计算出沉积能，粪、尿、甲烷能可测得，从摄入饲料总能，就可计算出畜体产热。

2.方法用呼吸装置测C02和CH4产生量，并收集粪尿测C、N含量；然后根据每

克脂肪含C76.7%,N为零，产热39.7KJ；每克蛋白质含C52%、N16%,产热23.8KJ,

再从C、N沉积量算出沉积能。

例：用C、N平衡法测饲料沉积能（动物营养学教材122页，表12-4）。

表2-4用碳、氮平衡法估计饲料沉积能（g）（弓自Kirchgessner,M.,1987）

第一阶段（基础饲粮）第二阶段（基础饲粮+被测饲粮）

CNCN

饲料25001603600200

粪6003570050

尿100120130140

CH4130-160-

--

CO215702110

相差+100+5+500+10

一、二阶段相差--+400+5

沉积400gC和5gN其能量为：

400-0.52X—

39.7x区西+23.8x——=20607（KJ）

0.7670.16

如果以每克C的脂肪产热51.83KJ,每克N的蛋白质比每克C的脂肪少产热

19.40KJ,沉积400gC和5gN的能量可计算如下：

51.83X400-19.40X5=20635（KJ）

（四）屠宰法

1.原理通过屠宰直接测沉积组织的能量，也可推算出畜体产热（维持）。

食入能=粪能+尿能+皮屑能+甲烷能+沉积能+畜体产热

2.测定方法屠宰不放血，心脏或静脉注入麻醉药和凝血剂。除去消化道内容物，

冷冻、粉碎（胴体粉碎机），取样测组织燃烧热。

凡是CH4产量较高的，用屠宰法估计的畜体产热不准确，应扣除CH4能。一些试

验结果表明，此法测得值低于测畜体产热推算的沉积能，有可能是间接推算比直接测沉

积能多了一些其它损耗如CH,、皮屑以及胴体多次处理测定带来的误差等。

三.N平衡

主要用于研究蛋白质的代谢。难在进食含N日粮时，维持N（内源N排泄）的测

定，不同于维持能可直接测。用同位素稀释技术可以直接测定进食含N日粮时的维持N

（内源N排泄），但方法有待完善，测定值还不太可靠。

测定方法在消化试验基础上，增加尿N的测定，当然也可测机体沉积N,所以N

平衡试验有时也包括屠宰试验。

第五节饲养试验（生长效应法）

一.作用

综合评定养分的需要量和养分的相对生物效价（可利用性）。

二.原理

养分剂量变化对机体增重，组织被测养分含量及有关的各种理化指标，如胫、股骨

强度，功能酶，代谢产物异常及缺乏症。

三.使用原则

1.用于需要量的确定有过量水平，生长快速期，即愈小愈敏感，当然要根据试验

目的确定。

2.评定效价（对比法），应低于最大需要量。

四.试验设计的注意事项

L唯一差异原则除考察因素外，其它条件完全一致（血缘、性别、体重、年龄、

健康、环境温度（局部有效温度）、空气流速及清洁度、饮水、光照、声响等，特别是

饲粮组成中的各种对考察因子能产生影响的物质。

2.考察因素水平间差异愈小，对条件的一致性要求愈高，重复数要求也愈多，即群

体（样本）变大。各处理间和组内间的差异（由于试验动物本身及条件不一致所引起的

误差）不能比考察因素产生的真实差异还大。即误差方差的均方与处理间的均方之比（F

值）能达到显著标准为宜。因此，条件的控制的严格程度随试验考察因素效应大小（差

异大小）而异。原则上是在保证能达到试验目的前提下，愈一致愈好，但太严了难于实

现。

表2-5方差分析示例:

变差来源df平方之和均方F

各培养液间5847.05169.4114.37**

各培养液内24282.9311.79

总的291129.98

3.随机分组

动物随机（年龄、体重、血缘）分组，再随机到试验场地的具体位置（环境条件的

一致）。

4.常用试验设计方法

①多用单因子设计，多做两个小试验比做一个大的复因子试验，即容易控制条件，

试验结果也更令人信服，可靠。

②在动物数量不多，体重差异较大的情况下，为了获得较满意的结果，除了用协方

差分析，也可按配对试验的原理进行设计、检验（T检验），只是检验要麻烦一点。

③慎用旋转通用组合设计

考察因素的效果，有加性（叠加）作用的情况下较合理，如考察化学反应的温度、

时间、酶（催化剂）。

④群饲与单个饲养、任食与限食

群食有利采食，但对死亡动物摄食的饲料扣除麻烦。

单个饲养采食受影响，从而影响增重。但饲料消耗好统计。

一般用生长效应确定氧分的需要量，采用任食；评定养分生物效价的消化和代谢试

验用限食。

5.纯合日粮与实验动物

Sem-Purifleddiet

①作用（功绩）：确定必需养分

确定最低需要量

毒性试验

②优点：试验动物（小白鼠、大鼠）血缘纯、周期快、成本低（试验动物）。缺点：

费用高，对饲粮纯度要求严。

第六节试验技术

一.同位素示踪及同位素稀释技术

1.同位素示踪技术：标记跟踪物质的代谢过程、流向及流量。

2.同位素稀释技术：标记机体物质代谢库，达到全身各部组织含有与标记同样的该

物质的标记元素（物质）占该物质总量的比例相同。用于物质代谢速率的测定，内源排

泄量的测定。但内源N或氨基酸的测定受肠道微生物和肠粘膜代谢的影响，有悖于稀

释的原理。

另因同位素用量大，有污染，一般采用稳定同位素Nt但测定稳定同位素需质谱

仪。

二.外科造瘦技术及吻合术

1.作用用于养分消化率的测定，如过瘤胃（通过瘤胃微生物作用）的饲料蛋白的

能量（回肠末端氨基酸）消化率的测定。

2.方法

①屡管种类

A.简单T型喽管：可安放在瘤胃、十二指肠，测反刍动物饲料蛋白质的降解率；

安放在回肠末端、盲肠测氨基酸消化率。

缺点是食糜样品收集缺乏代表性。

简单T型屡管由于安装在回-盲瓣前后的位置不同，有多种形式和叫法。

B.桥式屡管：实际上是两个瘦管，一个让食糜流出，取样，取样后剩下的又从另

一喽管送回消化道。样品有代表性，但很繁琐。

C.可操纵（可移动）回-盲矮管术：是简单T型喽管的衍生，即在与回盲瓣相对的

对侧盲肠壁和相应的腹壁安一个瘗管，并导入一根尼龙线，线头系一个不锈钢圈，圈的

直径比回盲瓣处回肠的内径稍大（约3-3.5cm）,并置入回-盲瓣前的回肠内。在回-盲瓣

交接处的肠壁外套一直径小于内环的不锈钢圈，放在内环与回盲瓣交接处之间。尼龙线

另一头，通过屡管，引出体外，即喽管头外，并固定在喽管头上，以免头缩回腹腔盲肠

内。由集食糜烂时，拉紧尼龙线，使回-盲瓣紧贴在瘦管腹壁头端，食糜就可流出疹管

外。

②回-直肠吻合术

将回肠近端，回盲瓣前（5cm左右）切断，靠回-盲瓣端进行荷包缝合；然后将直

肠距肛门的2/3-3/4处切断，将回肠断端与近肛门直肠断端吻合，直肠距结肠端同样用

荷包缝合封闭，在结肠与直肠交接处肠壁切一口安装瘦管，排泄大肠残留的食糜。

回肠与直肠吻合有端-端吻合，也有端-侧吻合，但以端-端吻合效果好，手术成功率

高。屡管也可在直肠近结肠断端直接安装。如果T型瘦管两翼太短，随着肠管的长大,

屡管易脱落。肠端开口易与腹壁粘合，如果大肠残留食糜已排空完，腹壁切口愈合后没

有什么危险，对试验也无影响。

回-直肠吻合术安装矮管的另一作用是为了在手术头几周，灌注电解质容液。术后

头1-2周对N、AA的消化率无影响，但对矿物元素的影响较大。第一周大多数矿物元

素的消化率降低，有资料报导，钠、镁、镒消化率为负值，以后逐渐升高。但锌回升缓

慢，到第五周，仍为负值。

■=«mmssiittanffc

第一节饲料蛋白质营养价值的评定

—.引言

蛋白质营养价值（质量）的评定一直是营养学研究的重点和热点。从1841年法国

生理学家（FrancoisMagendie）发现明胶不能代替肉蛋白以来，营养学家一直没有停止

过这方面的研究。但是，由于对蛋白质营养机理的正确认识本身就是一个漫长的过程，

对其营养价值的认识和评定方法也经历一个漫长的进化过程，至到理想蛋白模式和可消

化氨基酸的提出与实践，使蛋白质营养价值的评价，才真正实现了分子水平的需要和供

给的较精确的统一。

二.评定方法的历史回顾

LN与CP

各种蛋白质含氮是15.5-18.0,平均取16,取NX6.25为CP。由于动物和消化利用

的是氨基酸或肽的形式，而不是氮，所以平均乘6.25求得的CP也只是蛋白质及含氮化

合物的量的一种表示形式，不是生物可利用值。

2.DCP(DigestibleCrudeprotein)

曾经盛行一时，因不能反映蛋白质是以氨基酸、肽消化吸收的实质，对于评定单胃

动物饲料蛋白质的营养价值已无多大意义，但对反刍动物意义较大。

3.BV(BiologioalValue)

thomas(1909)提出，Michell(1924)修订

八黑=*。

TBV-IN-FN-UN+FNe+UNe+VN

1N-FN+FNe

4.NPU（Netproteinutilization）

净蛋白利用率,BenderandMiller1953年提出，其原意为：

MD,,体N-无N日粮体N

、食入N

相当于=绊”或8Vx消化率（CP）

食入N

5.NPV（净蛋白质Netprotoinvalue）

NPV=食入NXNPUX6.25

6.PER（蛋白质效率比Proteinefficiencyratio）

OsborneandMendel1919年提出，其定义为：

PER=体增重/食入CP

7.NPR（净蛋白比Netproteinratio）

BenderandDoll1957年提出，其意义为:

=测定蛋白增重（克）-无N日粮失重（克）

"进食蛋白（克）

式中CP换成N即为NPU

8.GPV（总氮价值Grossproteinvalue）

„D1/增重克/每克测试"PER/样

增重无/每克标准CPPER/标

9.RS（斜率比Sloperatio）

HegstedandChang1965年以生长大鼠为实验动物，多用于测定人的食物蛋白质量。

_测定蛋白增重回归直线的斜率

一标准蛋白增重回归直线的斜率

又称相对蛋白质价值（Relativeproteinvalue）»

10.化学比分（Chemicalscore）

MitchellandBlock1946提出，其实质是以一种优质的动物蛋白的第一限制氨基酸

（如赖氨酸）含量为标准，被检饲料所含此氨基酸相当于它的百分比值。一般是以鸡蛋

蛋白为标准。例如玉米蛋白含Lys为2.79、鸡蛋蛋白含Lys为7%,其玉米蛋白对于鸡

蛋白的比分为：

279

^xl00=40

7

11.必需氨基酸指数EAAI

Essentialaminoacidindex,Oxer(1951)。

EAA/(%)=旭

\仇b2%

a：为被测蛋白必需氨基酸，猪为10,鸡为11。

b：为标准蛋白必需氨基酸，猪为10,鸡为11。

综上所述，上面的所有方法只能比较一种饲料或饲粮蛋白质的好坏。后两种方法虽

反映了蛋白质氨基酸的质量情况，其表示方法仍无可加性，因此仍不能与需要量直接挂

勾。在50年代确定了动物的必需氨基酸以后，结合限制性氨基酸，既可判别蛋白质量

的好坏，也可与需要量挂勾。因此从总氨基酸进入可消化氨基酸，才真正实现了需要与

供给较精确的统一。

三.AA生物效价的评定

可消化氨基酸、可利用氨基酸、有效氨基酸都属于AA生物效价，由于评定的方法

不同，叫法有所不同，但实际都是以能否被动物消化利用为基础的。

可消化氨基酸的最大优点是：

1.抓住了蛋白质营养的实质，即以AA或肽的形式吸收和构建新的蛋白质。

2.能够与动物的需要准确挂勾，而且使理想蛋白更具有实际意义。

(―)DAA的测定

1.猪

由于大肠微生物干扰较大，使测定值偏多(略高10%),故均采用回肠末端收取食

糜的方法。主要有以下几种方法；

a.T型屡管(simple-T-cannulas)-由Horszcaruk等(1972)首创,一般将痿管安在

回-盲瓣前3-10cm处。Laplace和Borgida(1976)、Darcy等(1980)认为回-盲瓣后安

瘦管对猪生理影响较小。但Moughan和Smith(1987)认为两种T型屡管对AA消化率

的差异无显著影响。

最大缺陷是必须用指示剂，因不可能收集全部粪尿，由此也带来取样缺乏代表性，

而且较麻烦。

b.桥式屡管(重进屡管)(r-entrantcannulas)

1973年由Horszcaruk和Zebrowska首创。有以下几种形式：

回-回桥式矮管(ileo-ileo)

回-盲桥式疹管(ileo-caecal)

瓣后回I-结肠桥式瘦管(ileo-colic-post-valve)

不同部位桥式屡管测干物质消化率有差异(DenHartog等，1988)。Darcy等(1980)

的研究表明，瓣后回-结肠桥式痿管对荷术猪的生理影响较小，手术成功率较高。

桥式屡管的缺点是粪样(食糜)取后又要送回消化道，相当繁琐。

c.回-直肠吻合术

(ileo-rectalanastomosistehnique)

1984年Pioard提出，后经演变，由于回-直肠断端的位置和结合方式的不同，又有

以下几种形式。

端-端吻合(end-to-end)

端-侧吻合(end-to-side)

但以端-端吻合手术成功率高些。一般在回盲瓣前切断回肠，在直肠与结肠交结处

前的直肠部位切断。

回-直肠吻合术的最大优点是收粪简便，而且可收集全部粪样。不足之处是手术较

复杂，手术成功率相对较低，但也取决于技术的熟练的程度。术后对猪的护理也较麻烦。

d.可移动(可操纵)的回-盲瘦管术

(steeredileo-caecalvalve)

Morz(1989)提出，手术具体作法前已叙及。此法的最大优点是手术简单，荷术

猪生理影响小。不足之处仍需指示剂。

上述各种方法的测值并无太大的差异，加上AA分析测定的误差本身较大，所以很

难说那一个方法测值最准确。目前主要是看那种方法最简便，包括取样手术和对术荷猪

的影响。相对说来，回-直肠吻合术还较可取，虽手术麻烦，但粪样(食糜)收集简单，

而且可做到有代表性。

2.禽

禽饲料氨基酸消化率的测定相对较简单。因禽大肠较短，而且主要是盲肠，所以不

必安装屡管。为减少盲肠的影响，可切除盲肠。但大多数饲料切除盲肠与否对AA消化

率无显著影响，只少数饲料•，如肉骨粉等切除盲肠AA消化率降低。

关于切不切除盲现有争议，一些人认为盲肠在氮代谢中对尿中尿酸的二次利用以及

对消除NH3的不利影响有重要作用。未经小肠吸收的氨基酸和短肽也可为盲肠微生物

充分利用，因此不宜切除。但盲肠切除与否对大多数饲料AA消化率无影响，盲肠对

AA的吸收只有在通过其颈部时才存在极有限的吸收。而且切除盲肠主要是减少微生物

的影响，因此切除盲肠只是测定少数饲料（如肉骨粉等）的AA消化率可能更准确，对

于大多数饲料切与不切影响不大。

由目前AA分析仪的测定值误差较大，必然会影响到饲料氨基酸的消化率测值的准

确性，一次试验测得的值很难说准确、可靠，一般取平均值较合理。

（二）内源氨基酸的测定方法

氨基酸真消化率的准确测定关键在于内源氨基酸的准确测定，特别是近似正常含氮

日粮情况下内源氨基酸的准确测定至今还没有理想的方法。

1、传统方法

饥饿法

无氮日粮法

回归法

2、I®基化法（同型精氨酸法）（Moughan等，1990）

原理：该方法通过将日粮中的赖氨酸全部胭基化后转变为同型精氨酸，消化道内

的赖氨酸全部为内源氨基酸。

同型精氨酸吸收进入机体后可降解成赖氨酸参与机体蛋白质合成，而不影响机体赖

氨酸的需要。家禽由于体内缺乏将同型精氨酸转变为赖氨酸的酶，所以导致尿液中有大

量的同型精氨酸排出，影响该方法的应用。

弧基化其它氨基酸，影响消化率

饲喂胭基化蛋白日粮采食量下降

胭基化不完全，影响计算准确性。

3、酶解酪蛋白（EHC）/超滤法（Darragh等，1990）

原理：以EHC作为唯一氮源，假定分子量（MW）<10KDa可完全被吸收，食糜中

排出的N和AA全部为内源。

不足处：MWvlOKDa作为完全吸收标准证据不够充分。

食糜中含有MW<10KDa的内源含N物占总含N的10-27%

4、同位素标记法

原理：（1）标记饲料（Vanleeuwen等，1994）

食糜外源N/食糜总N=食糜N15丰度/饲料N15丰度

食糜内源N=食糜总N-食糜外源N»

不足：随食入后时间的延长（7-8h）,筑“N经再循环进入消化道。

（2）内源物标记（动物标记）（deLange等,1990）

原理：血液i^N-Leu/血液总Leu=食糜&N-Leu/食糜内源总Leu

食糜l5N-Leu

食糜内源总Leu=-----------------------------------X血液总Leu

血液,5N-Leu

不足：（1）N和AA前体池的存在与否及稳定性

（2）肠粘膜利用微生物合成的AA合成蛋白质，并分泌进入肠道，影响其内源

N及AA的测定。

（3）一次性注射少剂量3H-Leu（姚军虎，2000）

原理：根据稀释原理，注射后一定时间，下式可能成立或近似相等。

食糜3H-Leu丰度（内源）血液3H-Leu丰度

食糜中Leu血液中Leu

不足：等式成立的时间难确定准确

5、差量法（Ammerman,1957）

原理：假设在动物进食正常日粮粗蛋白范围内，内源氮或内源AA的排泄量不随日

粮CP水平的升高而变化或者变化很小可忽略不记，下式成立。

前后两次食入量之差一前后两次排泄物之差

真消化率二------------------------------------------------

前后两次食入量之差

内源N或AA=食入N或AAX（真消化率一表观消化率）

不足：内源N或AA排泄量较稳定或变化很小的日粮CP水平范围的确定较困难。

（三）有效赖氨酸的测定

1.原理

主要是基于美拉德氏或褐变反应（Maillardorbrowningreactiong）反应后还原糖与

肽链中的e-NH3结合，使胰蛋白酶无法切开，从而不能被消化吸收，