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文档简介
关于唾液淀粉酶的影响因素背景酶具有催化效率高,专一性强,作用条件温和等特点,目前在科研、食品加工、饲料生产、医疗等方面具有广泛的应用。唾液淀粉酶存在于唾液中,是一种有催化活性的蛋白质,可将淀粉水解为麦芽糖。影响其活性的因素有很多,除了本身结构特点和结构功能特点影响之外,还主要包括PH值、温度、重金属离子、抑制剂、激活剂及酶浓度等。(唾液淀粉酶:ptyalin;salivaryamylase)实验背景第2页,共12页,2024年2月25日,星期天实验原理麦芽糖、葡萄糖遇碘不显色淀粉水解产物与碘液反应生成不同的颜色反应淀粉+碘生成蓝色糊精+碘根据水解程度,由紫色到橙色,水解越彻底,颜色越浅,直到生成无色糊精(碘不显色)第3页,共12页,2024年2月25日,星期天实验材料实验仪器:控温水浴锅、制冰机、电磁灶、不锈钢锅白瓷板、试管、滴管、移液管(1-2ml)实验试剂:蒸馏水、1%淀粉液、1%蔗糖、0.1%尿素液
大豆尿素酶溶液、0.1%CuSO4、0.1%HgCl2
0.1%NaCl、1MNaOH、0.5MH2SO4、碘液
各种pH缓冲液:5.0;6.8;8.0第4页,共12页,2024年2月25日,星期天实验步骤第5页,共12页,2024年2月25日,星期天
一温度对唾液淀粉酶的影响1.稀释唾液的准备。2.准备好37℃水浴、冰水浴及沸水浴,点滴板加碘液各1滴,备用。3.取小试管4支,编号,各加1%淀粉溶液30滴,pH
6.8缓冲液10滴。1号管作对照,2号管放37℃水浴,3号管放冰水浴,4号管放沸水浴中,各预温10min。4.向1号管加蒸馏水10滴,向2,3和4号管各加稀释唾
液10滴,混匀放原水浴中。第6页,共12页,2024年2月25日,星期天5.5min后由2号管每隔一定时间(1min或2min),取
液1滴于白瓷凹板上做碘反应,观察并记录颜色变
化情况,到碘反应接近浅红色时,取出各管,包括
1号管,分别各取1滴做碘反应,观察对比结果。6.把4支试管放入37℃水浴下,5~10min后取出,向各
管内加碘液2滴,混匀,观察结果。综合分析所测
三种温度下的酶活性情况,并以1号管为对照说明
冰水浴及沸水浴两温度对酶活性影响的异同。
试管号
1
2
3
4第一次碘反应
第二次碘反应
第7页,共12页,2024年2月25日,星期天
二pH对唾液淀粉酶的影响第8页,共12页,2024年2月25日,星期天4.5号管加稀释唾液10滴,放37℃水浴中,记录时间,每隔1min或2min,由第5号试管中取出1滴溶液做碘反应,待碘反应呈浅红色或橙黄色时,取出试管记录保温时间。5.1~4号试管放入37℃水浴中,向1号管加10滴蒸馏水。以1min间隔,并记录时间,依次向2~4号试管中加入稀释唾液10滴,摇匀,按照5号管的保温时间,以1min间隔,依次取出各管,并立即加碘液2滴,混匀。向1号管加2滴碘液。观察各管颜色,判断在同pH条件下淀粉被水解的程度,分析pH对淀粉酶活性的影响,确定其最适pH。
时间(min)试管号
1
2
34
1
2
3
4
第9页,共12页,2024年2月25日,星期天
三抑制剂对唾液淀粉酶的影响试剂(滴)
管
号
1
2
34
1%淀粉
30
3030
30
pH=6.8缓冲液101010100.1%CuSO410———0.1%NaCl—10——蒸馏水——10—
0.1%HgCl2—
—
—10
稀释唾液的准备取点滴板1个,向白瓷凹板内各加碘液1滴,准备好37℃水浴取小试管3支,如下表加入试剂第10页,共12页,2024年2月25日,星期天5min后由2号试管每隔1min,取液滴于白瓷凹板上做碘反应,观察记录颜色变化情况,至反应为浅色时,取出各试管,分别取1滴做碘反应,对比结果。实验记录
试管号1
2
34
反应颜色
时间(min)5
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