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文档简介

微生物检验相关知识问答

作者:anndy发表日期:2007-07-2909:08复制链接

微生物系列名词解释A

微生物(Microbe):微观的生物机体。是形体微小、单细胞或个体结构简单的多细胞、甚或无细胞结构的低

等生物的通称。(细小的肉眼看不见的生物)

微生物(Microorganism):微观的生命形式。

微生物学(microbiology):研究微生物生命活动的科学。

微米(Micrometer):一种测量单位:1/1,000mm,缩写为umo

原核微生物(prokaryoticmicrobe):指核质和细胞质之间不存在明显核膜,其染色体由单•核酸组成的'

类微生物。

原核细胞型微生物(procaiyoticcellmicrobe):指没有真正细胞核(即核质和细胞质之间没有明显核膜)

的细胞型微生物。

真核细胞型微生物(eukaryoticcellmicrobe):指具有真正细胞核(即核质和细胞质之间存在明显核膜)

的细胞型微生物。

真菌(fungi):有真正细胞核,没有叶绿素的生物,它们一般都能进行有性和无性繁殖,能产生泡子,它们

的营养体通常是丝状的且有分枝结构,具有甲壳质和纤维质的细胞壁,并且常常是进行吸收营养的生物。

霉菌(Mold):具有丝状结构特征的真菌。

细菌(baclerium):单或多细胞的微小原核生物0

病毒(virus):是一类没有细胞结构但有遗传复制等生命特征,主要由核酸和蛋白质组成的大分子生物。是

比细菌更小的专性细胞内寄生的微生物,大多数能通过细菌过滤器。

放线菌(actionomycetes):-目形成真的菌丝成分枝丝状体的细菌。

蓝细菌(cyanobacterium):是光合微生物,蓝细菌是能进行光合作用的原核微生物。

原生生物(protistan):指比较简单的具有真核的生物。

原生动物(protozoa):单细胞的原生生物。

免疫学(immunology):研究利用预防接种法治疗疾病的科学。

江克次氏体(Richetlsia):节肢动物专性细胞内寄生物,它的许多类型对人和其它动物是致病的微生物。

感染(Infection):宿主由于微生物生长的病理学状况。

巴氏灭菌法(pasteurization):亦称低温消毒法,冷杀菌,法,利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品

中营养物质风味不变的消毒法。

巴斯德消毒法(Pasteurization):在•控制温度给液体食物或饮料加热以提高保藏质量,同时也消毁有害

的微生物。

无菌的(Aseptic):没有能够引起感染或污染的微生物。

化学疗法(chemotherapy):用化学药物来治疗传染病。

化学治疗(Chemotherapy):用化学制品治疗疾病。

抗生素疗法(tetracycline):用真菌等生物产生的抗生素来治疗疾病。

分类学(Tasonomy):尽可能有亲缘关系基础1:对有机体的分类。

无性繁殖系(Clone):从单一细胞传卜.来的细胞集群。

属(Genus):一组亲缘关系非常接近的种。

分辨率(resolvingpower):能够分辨出两者之间最小的距离。

菌株(Strain):单•分离体后代组成的微生物纯培养物。

污染:微生物纯培养物和灭过菌的物品等被某些杂菌或有害微生物混人或沾染的现象。

球菌(coccus):球状的细菌。

杆菌(bacillus):杆状的细菌。

螺旋状细菌(Spirillum):螺旋状的或开塞钻状的细菌。(呈弯曲状的细菌)

螺旋体(Spirochete):螺旋形细菌;多为寄生性的。

梅毒(Syphilis):由梅毒密螺旋体引起的一种性病。

链球菌(Streptococci):分裂后细胞成链的球隹i。

弧菌:菌体呈有个弯曲呈弧形(即弯度•圈)。

螺菌:菌体较为坚硬有多个弯曲。

衰老型、退化型:细菌在老的培养物中会出现各种与正常形状不一样的个体,重新培养有些可以恢复,有

些不可以恢复原来的形状。

细菌多型性:有些细菌尽管在最适宜的(正常的)环境中生长,其形态也很不•致。

菌柄(Proslhecas):在诸如柄杆菌属的细菌中,作为细胞壁的一部分的附器。

球状体(球形体,spheroplast):多用革兰氏阴性细菌,以溶菌酶法处理获得,其外壁的结构尚存,所以,原

生质体对外界环境具一定抗性,并能在普通培养基上生长的细菌菌体。

细菌细胞壁(cell-wall):包在表面较坚韧略具有弹性的结构,是•层较薄的膜状结构。

核(Nucleus):细胞内结构,含有染色体。

细胞膜(cellmembrance):是细胞壁和原生质之间一层柔软并具有半透性的生物膜(又叫质膜、原生质膜、

胞浆膜)。

革兰氏染色法(Gramstain);一种鉴别染色法,当用脱色剂处理时,根据保留或失去原始着色剂(结晶紫)

与否,细菌被划分为革兰氏阳性或革兰氏阴性。

核仁(Nucleolus):细胞核中的一■种小体。

核糖体(Ribosome):由RNA和蛋白质组成的细胞质结构单位,为蛋白质合成地点。

核糖核酸[Ribonucleicacid(RNA)]:见于细胞质和核仁的核酸;含有磷酸,D-核糖,腺喋吟,鸟嚓吟,

胞嘴咤和尿嗑咤。

核酸(Nucleicacid):一类由核甘酸复合物连接构成的分子;其类型有脱氧核糖核酸和核糖核酸。

核蛋白(Nucleoprotein):由核酸和蛋白质组成的复合物分子。

组蛋白:存在于真核细胞内的一类碱性蛋白(其作用之一是使大量遗传信息压缩在核内)

质粒:细菌除了原核以外,还有染色体外遗传因子(为环状DNA分子,能自我复制)

微生物系列名词解释B

细胞间的(Intercellular):在细胞之间。

细胞质(Cytoplasm):细胞膜和核之间的细胞生活物质。

细胞器(Organelle):细胞的结构或组分。

荚膜(Capsule):围绕某些微生物细胞壁的•种胶状包被或粘液层。(细菌细胞壁外的•层较松厚,而且较

固定的粘液性物质)。

粘液层:细菌细胞壁外的一层较松厚,而且较固定的没有明显的边缘粘液性物质。

菌胶团:如果细菌荚膜连在一起,其中包含有许多细曲叫落胶团。

细菌的化学趋避运动:细菌趋势向吸引物并聚集于浓度区或与避离排斥物,菌体集中在低浓度区,蛋白质

为接受物。

细菌的光趋避运动:先培养在具有弱光的液体培养基中,用强光照射某一区域,通过10-100分钟,通过

鞭毛运动,集中在强光照射区。

鞭毛(Flagellum):细胞上柔软的鞭状的附器(细长的原生质突起),作为•种运动器官。

一端单毛菌:菌体一端只有一条鞭毛。

二端单毛菌:菌体二端各有一条鞭毛。

丛毛菌:菌体•端成二端各有•丛鞭毛(偏端丛生鞭毛菌、二端丛生鞭毛菌):

周毛的(Peritichous):围绕细胞整个表面长着鞭毛。

周毛菌(Peritichousflagellumbacterium):在菌体四周都有鞭毛。

伞毛(Fimbriae):某些革兰氏阴性细菌的表面附器,由蛋白质亚单位构成,直径大约为7nm.它们比鞭毛短些、

细些。也叫做纤毛。

线毛(Pili,散毛,纤毛,菌毛):比鞭毛更细,较短,直硬,数量也较多的细丝。

核蛋白体(核糖体):细胞质中无胞膜的颗粒结构,直径150-200埃。

中间体(中体):包围质的膜折皱陷入到质细胞里的结构。

异染颗粒:用染料多色美兰染色,菌体部分兰色颗粒红紫色,故称异染颗粒。

脂类颗粒:细菌在代谢过程中积累起来,但不能被细菌作养料脂类颗粒。

多糖颗粒:有糖原和淀粉二类颗粒,可作为细菌的能量来源。

液泡(Vacuole):细胞质内清晰的空间。

芽饱(内生范子Endospora):某些细菌生长到一定阶段,有细胞内形成一个圆形成圆柱形的对不良环境条件

具有较强的抵抗力休眠体叫之。

抱囊(cytocyst):由营养细胞缩短变成球菌,表面形成一•层厚的孔壁称之。

伴抱晶体(parasporalcrystal):某些芽泡杆菌,如苏云金杆菌,在细胞内产生,,种晶体状多肽类内含物称之。

裂殖生殖(Schixoteny):营养体多重分裂的无性生殖。

裂殖(schizogenesis):表现为细胞的横分裂称为裂殖。

异形裂殖:裂殖后形成子细胞与母细胞大小不相等,称为异形裂殖。

同形裂殖:裂殖后形成子细胞与母细胞大小相等,称为同形裂殖。

裂殖体(Schizont):疟疾寄生物无性生活周期的一个阶段。

菌落(集落bacterialcolony):固体培养其上肉眼可见的微生物生长物(微生物的单个个体或胞子在固体培养

基上生长繁殖后形成肉眼可见的集团)

菌苔(bacteriallawn):儿个菌落连在■起成片生长。

培养基(media):是人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或者积累代谢产物的营养基质。

琼脂(Agar-agar):红色海藻经过干燥的多糖抽提物,在微生物学培养基中用以作为一种凝固剂。

基内菌丝(营养菌丝,substratemycelium),长在培养基内的放线菌菌丝。菌丝无分隔,可以产生各种水溶

性、脂肪性色素,使培养基着色。

气生菌丝(二级菌丝):由基内营养菌丝长出培养基外伸向空间的放线菌菌丝。气生菌丝直生或分枝丝状,

较基内菌丝粗。

饱子丝(sporotrichial):当生长发育到•定阶段,在其气生菌丝上分化出可形成池子的放线菌菌丝。

水华或水花(Bloom):在水中有大量的蓝细菌生长,繁殖茂盛,使水随的颜色随藻类的颜色而变化,许多细

胞集结在一起形成“水华”或“水花”。(由大量浮游生物生长所引起的水体表面呈色区)

共生关系(symbioticsystem):几种生物在有机联系的共生条件下互相得益的关系,有的共生达到了彼此不

能分离的程度,或若分离后生长不良。

地衣(lichen):蓝细菌与真菌形成的共生体。

隔膜(S叩tum):菌丝体中的模壁。

菌丝(hypha):多数真菌的典型营养体呈现丝状或管状单一的细丝叫的丝(叫菌丝)。

菌丝体(mycelium):由许多菌丝连结在一起组成的营养体类型叫菌丝体。

有隔菌丝(Septahypha):真菌有隔膜的菌丝叫有隔菌丝。

无隔菌丝(Non-s叩tahypha):真菌没有隔膜的菌级叫无隔曲丝。

Z型菌丝(Z-hypha):有些真菌的营养体类型,在寄主体内和人工培养基上是两种不同类型的菌体称之。

吸器(吸胞)(Haustorium):真菌菌丝某处生出特殊形态的菌丝体或菌丝的变态物,伸入寄主体内吸取养分,

这些变态物叫吸器。

菌环(菌套annulus):捕食性真菌形成环状,叫俏环(菌套)。

菌网(macterialnet):捕食性真菌形成网状,叫菌菌网。

假根(Rhizoid):-种单一的或多细胞的在菌丝卜.方生长出发丝状根状菌丝,伸入基质中吸收养分并支撑上

部的菌体,呈根状外观。

菌核(Sclerotium):真菌生长到一定阶段,菌•丝体不断地分化,相互纠结在一起形成一个颜色较深而坚硬的

菌丝体组织颗粒。

子座(Slroma):是菌丝分化形成的垫状结构,或是菌丝体与寄主组织或基物结合而成的热状结构物。

菌索(Rhizomorph):是菌丝体集合形成的绳状结构。多生于树皮下或地下,形似根状结构物)

常丝束(hyphalstrand):菌丝平行排列的绳状结构。

蕈菌(子)(fungal):由大量菌丝紧密结合形成的真菌子实体。

真菌鞭毛(cilium):是单独的细胞器,不是抱子体躯的延伸,它来源于中心粒系统,由9+2根微管(31根亚

纤丝)组成结构物。

接合胞子(zygospore):是接合菌的有性抱子,由菌丝长出形态相I司或略有不同的配子囊接合而成。

子囊抱子(ascospore):子囊菌的有性配子或生于子囊内的有性配了•叫之。

担抱子(basidiospore):担子菌的有性泡子为担泡子,是一种外生抱子。

半知菌(fungiimperfecti):因为只了解其生活史的一半,因此常称为半知菌。

食用菌(ediblefungi):泛指所有可以吃食的真菌。

食用菌(ediblemushrooms):指真菌中有肥大肉质和胶质的繁殖器官(子实体),可以供人类吃食的大型的丝

状真菌。

毒伞菌(poisonousmushrooms):能产生毒素的大型的丝状真菌。

发酵(ferment):泛指•切利用微生物或酶制剂的生产过程。

营养体(nutritionbody):真菌营养生长阶段的结构称为营养体。

无性抱子(a***ualspore):无性繁殖产生的泡子称无性抱子。

有性抱子(***ualspore):有性繁殖产生的抱子称有性抱子。

游动抱子(zoosporangiospore):鞭毛菌产生的无性抱子。由割裂方式产生,有鞭毛,在在水中游动。

袍囊孩子(sporangiospore):接合菌产生的无性泡子。由割裂方式产生,无鞭毛,不能游动。

分生抱子(Conidium):一种无性胞子,可以为一到多个细胞的,和有许多不同的形状(子囊菌、担子菌、

半知菌产生的无性饱子,大多由芽殖、裂殖方式产生)。

厚垣胞子(chlamydospore):各类真菌均可形成的无性范子,由断裂方式产生,壁厚,寿命长,能抗御不良

外界环境。(一种厚壁的有抵抗能力的袍子,由菌丝体直接分第而来,菌丝体内原生质和营养物质集中)

休眠抱子囊(restingsporangium):是某些低等鞭毛菌的有性抱子,由鞭毛菌同型两性接合生育而成。

卵泡子(oospore):是鞭毛菌中卵菌的有性胞子,由异型两性接合生育而成。

原配子囊:接合菌相接近的+、一两种菌丝各自向对方生出极短的侧枝叫原配子囊。

接合抱子(zygospore):是接合菌的有性抱子,由菌丝长出形态相同或略有不同的配子囊接合而成。

接合菌:指产生一种叫接合抱子的休眠袍子。

接合子(Zygote):由两个配子交配而产生的机体。

子囊抱子(ascospore):子囊菌的有性配子或生于子囊内的有性配子叫之。

担袍子(basidiospore):担子菌的有性泡子为担电子,是一种外生抱子。

接合作用(Conjugation):一种配偶暂时融合的交配过程;尤其见于单细胞有机体。

了实体(fructification):真菌的产抱结构。

担子果或子实体(sporophore):高等担子菌中,产生一种高度组织化结构(包括担子和担抱子),称为担子果或子

实体。

担子子实层:担子排列的层叫担子子实层,除担子外,还有刚毛、囊状体。

匍匐丝(乂叫蔓丝):根霉菌体有一•部分呈.弧形,在培养基表面水平生长,根霉的气生性强,大部分菌丝

上匍匐于营养基质表面的气生菌丝。(联结假根之间的菌丝)

假根(pesudorhiza):匍匐菌丝在接触培养基处伸入培养基内呈分枝状生长的曲丝。

同宗结合(homothallic):单个菌株能完成有性交配。

异宗结合(heterothallic):单个菌株自身不孕,必须与另菌株相对应的性器官配合才能完成有性交配。

子囊子实层(ascusichymenium):子囊排列的层叫子囊子实层,子实层除子囊外,还有则丝、不育丝。

子实层(hymenium):子囊着生在一个盘状开口的子囊果内。

子实体(Fruitingbody):•种特化的产生袍子的器官。(真菌的产袍结构)

子囊(Ascus):子囊类特征的囊状结构,里面产生子囊泡子。(一种囊状产硝结构,球形、棒形成圆筒形)

子囊壳(Perithecium):球形、圆筒形或卵形的子囊果,它通常在顶部开一条裂缝或小孔。

子囊泡子(ascospore):子囊菌的有性配子或生于子囊内的有性配子叫之。

子囊果(ascocarp):子囊菌亚门真菌产生子囊范子的结构

闭囊壳(子囊球cleistothecium):子囊被包在一个球形无孔的子囊果中。

子囊盘(apothecium):呈盘状、碗状成漏斗状,顶部敞开的叫子囊盘。

假囊壳(pseudothecium):子座内只有一-个子囊腔,顶端有溶化的假孔口。

子囊冲(ascostroma):子囊座瓶状、盾状或船状等,子座内有1至多个子囊腔,有或无孔口。

子囊腔(locule):子囊座内着生子囊的腔。

担袍子(basidiospore):担子菌的有性抱子为担抱子,是一种外生抱子。

担子果或子实体(basidiocarps):高等担子菌中,产生•种高度组织化结构(包括担子和担抱子),称为担子

果或子实体。

裸果型担子果:子实层白始裸露于外。

被果型担子果:子实层包在子实体内,池子在担子果分解或遭遇外力破裂时才释放了外。

半被果型担子果:了实层初期被菌幕所覆盖,成熟后全部裸露于外。

担子子实层:担子排列的层叫担子子实层,除担子外,还有刚毛、囊状体。

生活史:微生物一生中所经历的发育和繁殖阶段的全部过程。

初生菌丝(一生菌丝):是由担抱于萌发产生的单核单倍体的菌丝。

次生菌丝(二生菌丝):是由初生菌丝联合进行质配而不进行核配的双核菌丝。

三生菌丝:是组织化的特殊的一些双核组织菌丝,常集结成特殊的形状的子实体即蕈子

草菌(子):由大量菌丝紧密结合形成的真菌子实体。

锁状联合(clampconnection):担子菌的次生菌丝每一个细胞都有二个核,其中一•个核来自母本,一个来自父

本,当双核细胞进行细胞分裂时,在二个核之间处生个短小弯磨曲的分枝,核移动,在二核之间生出•

个突起如钩状,一个核进入钩一个留在菌丝钩中保留一个核,一个往后移,菌丝中二个核一往前一个往后

移钩状突起向下弯曲与细胞壁接触溶化,分枝基部生分隔膜(分隔中间有孔道),在原分支外形成一隔膜,

产生•个新细胞双核体,在分隔处保留•个桥形结构叫之。

蘑菇圈、仙人圈(fairyring);是由于菌丝辐射生长的缘故。菌丝由中间•点向四周辐射生长,时间长了,

中心点及老化的菌丝相继死去,外面的生活力强,于是形成了白然的菌丝体环。

菌托(teleoblem):包在担子果子实体的菌柄基部的膜状物。(子实体幼小期包有一层外膜,当菌柄伸长时,

外膜破裂残留在菌柄基部形成菌托)

菌环(annulus):围绕菌柄的一个环状物。

菌柄(stipe):伞菌子实体的柄。位于菌盖下面,有正中生、侧生、偏生。

菌盖(cap):子实体的帽状部分。位于菌柄上方。

菌褶(gill):菌盖卜.方与菌肉相连的部分,菌褶似刀片呈辐射状排列。

半知菌(fungiimperfecti):因为只了解其生活史的一半,因此常称为半知菌。

分生抱子梗(Conidiophore):从菌丝体上形成分化程度不同的产生分生胞子的结构。(菌丝体的分枝,其

上着生分生池子)

分生抱子座(Sporodochidium):分生抱子梗以聚生的着生形式聚集成热状的短梗形式,顶端产生分生抱子,

形成泡子座的结构。

束丝:以聚生的着生形式形成一束排列较紧密的直立分生抱子梗,顶端或侧面产生分生抱子。

分生抱子盘(Acervulus):半知菌形成盘状的袍子果。

分生胞子器(Pycnidium):半知菌形成球状的抱子果。

酵母菌(yeast):指一群单细胞的真核微生物(单细胞的不具典型菌丝体特征的一类真菌)

假菌丝体(pseudomycelium):单细胞菌体互相连接在一起成为一串细胞象I罚丝称之。

:型现象(dimorphism):,定条件下形成单细胞菌体,另一条件下则形成菌丝体。

蕈菌(子)(fungal):由大量菌丝紧密结合形成的真菌子实体。

出芽(Budding):酵母无性生殖的典型形式,在此过程中多亲代细胞长出一个新的细胞。

地衣(Lichem):藻类和真菌类共生,互惠的结合物。

黄曲霉毒素(Aflatoxin):•些真菌(黄曲霉)品系产生的毒素;•种致癌物。

菌根(Mycorrhiza):真菌和高等植物的根的共生联系。

假根(Rhizoid):一种单一的或多细胞的发丝状结构,呈根状外观.

游动抱子(Zoospore):运动的有鞭毛的泡子。

藻菌植物(Thallophyte):不具真正的茎、根或叶的植物;包括藻类和真菌。

白僵菌(Beauveria):半知局亚门,菌丝有横隔有分枝的真菌。白僵菌可以侵入6个目15科200多种昆虫、

蛾类的虫体内大量繁殖,同时不断产生白僵素(大环脂类毒素)和草酸钙结晶,这些物质可引起昆虫中毒,

使体液发现机能发生变化,打乱新陈代谢以致死亡。

绿僵菌(Beauveria):与白僵相似,菌体橄榄绿色。

病毒学(virology):研究病毒的科学。

滤过性病毒(Filterablevirus):能够通过细菌过滤器小孔的微生物。

二十面体(Icosahedron):许多病毒粒子的儿何形状;二十个三角面和二十个角。

F扰素(loieiferon):动物组织产生的抗病堆物质。

病毒粒子(病毒个体virusparticle):是成熟的、完整的、有感染性病毒颗粒。

壳体(capsomers):由多个衣壳粒组成的蛋白质外壳。

核壳体(核衣壳):是衣壳与其包围着的核酸的总称。

衣壳粒(capsomer):衣壳单个的蛋白质亚单位。病毒的最小形态单位,由一种或几种多肽链折叠而成的蛋白

质亚单位。

衣壳(capsidsymmetry):衣壳粒以对称形式有规律地排列,形成的蛋白质外壳。

封套(envelope):一般由含有类脂或脂蛋白质组成的包围着病毒核壳体的包膜。

细菌过滤器(Filler,bacierial):细菌不能通过的特殊类型的过滤器。

寄生现象(Parasitism):被寄生物感染的状态。

专性寄生:寄生的•种类型,只能依赖活的寄主生存,脱离寄主不能生活和繁殖)。

接种(Inoculalion):人为地把微生物或物质引进体内或培养基。

接种物(Inoculum):含有微生物的材料,用于接种。

溶菌现象:液体培养时细菌被噬菌体裂解,液体由混浊变清的现象。

噬菌斑(phague):烈性噬菌体+敏感性细菌混合培养于固体基质中,由于噬菌体进行裂解细菌,而在营养琼

脂平板上形成的透明空斑。

噬菌体(bacleriumphage):是微生物病毒,是侵染细菌、放线菌、真菌等细胞型微生物的病毒。

烈性噬菌体(lyticbacteriumphage):感染细胞后引起细菌细胞裂解的噬菌体。

温和噬菌体(Temperatebacteriophage):能与宿主细菌同步复制的噬菌体,因而在噬菌体不需引起溶菌就能

通过胞分裂遗传。

原噬菌体(proiophage):温和噬菌体以其核酸附着在细菌染色体的一定位置上,与细菌染色体-道复制,称

原噬菌体。结果:每个子细胞都成为溶解性细菌。

敏感性细菌(sensitizedbacterium):被裂性噬菌体侵染的细菌。

溶源性(Lysogeny)::携带噬菌体的细菌状态,对这种噬菌体,细菌本身并不敏感。

溶原性细菌(lysogenicbacterium):含有温和噬菌体的细菌。

感病(infectiondisease):寄主遭受病原物的侵染而发病。

侵染力(infestation):病原微生物克服寄主防御能力,侵入体内得以生长、繁殖和扩散等一系列的性能。

病原(pathogenium):引起病害的病原生物。

抗原性:能与免疫反应产物结合的性质。

亚病毒:没有真病毒的形态结构,能利用非自身编码的酶系统进行复制,有侵染性,并可在寄生中引起症

状。

类病毒(viroid):是寄生于高等生物细胞中一类最小的新病原体,有类似病毒的一面,称为类病毒。

11星RNA(starRNA):是指一些必须依赖于辅助病毒的才能复制的小分子单链RNA片段,它被包装在

辅助病毒的包体中。

拟病毒(Viroid-LikeRNA):是一种类似于类病毒的病毒,其核酸组成,大小、:级结构均与类病毒相似,

故又称之为类似类病毒(Viroid-LikeRNA),又称为拟病毒,

加病毒:只含蛋白质外壳不含核酸的病毒。(肮一蛋白质曾用名,现已不用)

CJD(Creutzfeldt-JakobDdisease):医源性“海绵类脑血管病变或肮病毒”感染,是世界性顽疾之一。病征:

四肢僵值,语无论次,尿便失禁。

噬放线菌:把侵染放线菌的病毒叫噬放线偏。

噬蓝藻体(cyanophage):是侵染多种蓝藻的病毒。

噬真菌体(mycophage):是侵染多种真菌的病虫。

类菌原体(Mycoplasmalikeorganism=MLO):又称类菌原质,它是介于病毒和细菌之间的一种单细胞微生物,

比细菌小比病毒大,具有多型性,有圆形、椭圆形或不规则形,大小为200-300nm,没有细胞壁。

螺原体(Spiroplasma):呈螺旋丝状,长3■—25um,直径在100-200nm,高度变态。

菌原体(thalline):动物的微小原核原生生物,高度变态,如球状或近卵球状,直径l25-250nm.

类立克次氏体(Rickettsia-LickOrganismRLO):这类微生物形态结构和性状与立克次氏体极相似,故称之。

类细菌(Rickettsia-LickBacteriaRLB):类立克次氏体是■种小形杆状细菌,乂不同于细菌,寄生于细胞内

部,有细胞壁,有固定的形态,与细菌同属于一个门,又称为类细菌,一般不能人工培养。

[font=宋体]同:洁净室甲醛气体熏蒸消毒验证方案是什么?

答:1、甲醛消毒方法

在所有的消毒液中甲醛最常用。当相对湿度在65%以上、温度在24~40℃时,甲醛气体的消毒效果最好,

但若采用过多的甲醛,会因聚合而析出白色粉未附在建筑物或设备表面。一般甲醛的消毒方法如下:

A:消毒前先用丝绸浸注射用水(纯化水)擦洗房间建筑物和设备表面,然后用5%麝香草酚溶液喷酒或

擦洗,静置1小时后,再用丝绸浸注射用水(纯化水)擦洗一次。

B:计算体积(包括房间及风管体积),按10ml/m3的比例准备浓度为36%的甲醛溶液(甲醛密度为L

lg/ml),按2~3g/m3的比例准备高锌酸钾溶液。

C:在房间中放入试验装置,如不锈钢培养皿支架;直径90mm双碟玻璃培养皿;枯草杆菌试纸,每张试

纸上枯草杆菌数量为1*106个,每个培养皿中放2张试纸,1张做无菌试验,1张做含菌数试验。培养皿

的数量应根据房间面积确定。

D:消毒流程:在不锈钢容器中加入高镒酸钾,用双层纱布盖住桶口,再倒入36%浓度的甲醛溶液甲醛

气体扩散(约30min)启动空调器让甲醛气体循环(约20min)关闭通风系统,房间熏蒸消毒,不少于

7hr房间排气,用新鲜空气置换(约2hr)开启空调系统用75%酒精喷酒环境。

E:质监部门取样培养。判断标准:试纸内枯草杆菌数量小于1*103个为合格。

F:取样后用丝绸沾0.1%的新洁尔灭溶液擦洗机器表面;用0.1%新洁尔灭溶液或l%GermWarfare

溶液或75%酒精喷洒建筑物四周。0.1%新洁尔溶液与l%GermWarfare溶液溶液每月轮换一次。

2、气体熏蒸灭菌后室内环境中残留量的测试

用甲醛气体进行熏蒸灭菌后,需用全新空气换气若小时,由于甲醛的环境标准只有<1~2)*10-6,要使

环境中的残留的甲醛浓度尽可能低至不致使人嗅出特殊气味((0.55*10-6),并对眼睛无刺激(<1*1

0-6),然后根据测定的室内环境中甲醛残留量的结果,正确设定换气时间,以保证在达到作业环境中无

菌的前提下,对人身心健康不致产生不良影响。

(1)取样方法及取样量

在各取样场所,用约30L的塑料袋收集室内空气,将袋内空气用吸收瓶、泵、气流计等组成的装置捕集至

瓶内吸收液中(样本数应M3)。

(2)供试液的配制

取0.5%硼酸溶液20ml作为吸收液,用溶液吸收法,以IL/min的速度分别让各取样场所的空气通过1

Omin,然后将吸收液移至25.0ml的容量瓶中,加水使成25.0ml,即得。

(3)试验操作

A:取供试液2.0ml至带栓试管中,加5mol/L的NaOH溶液2.0ml及AHMT溶液2.0ml,轻摇数次混

匀后,室温放置20min。然后加KIO4溶液2.0mL摇2~5min至无气流生成为止:同时用水2.0ml

同法制成对照液,在波长550nm附近测最大吸光度。

B:分别取甲醛标准液0、0.5、1.0.1.5、2.0mL加水使成2.0ml,然后按A操作,测定吸光度,制

出甲醛浓度(ug/ml)与吸光度的关系检量线。

环境中的甲醛浓度(10-6)可由下式求出:

22.4273+t

甲醛浓度(10-6)=aX------------X25X---------

30.03273V

式中------供试液中甲醛浓度,

V----采样气体量,L

t——采样时平均温度,°C

22.4——Imol气体在0、1个大气压(101.325kPa)下的体积,L:

30.03--甲醛相对分子质量;

25—供试液全量,ml。

(4)试液准备

A:甲醛标准液

a甲醛稀释液:精取中国药典中规定''甲醛溶液"1ml,加水准确至200ml作为甲醛稀释液.精取10ml至碘

瓶内,确加入O.lmol/L碘液50mL加lmol/L氢氧化锂溶液20mL避光放置15min后,加15ml的

10%硫酸,用硫代硫酸钠液(0.1mol/L)滴定。另用水10ml进行空白试验。

(Va-Vb)XI.5013

甲醛稀释液中的甲醛浓度(mg/ml)=------------------------------------

10

式中va-----甲醛稀释液消耗O.lmol/L硫代硫酸钠液量,ml;

Vb-----空白试验消耗0.1mol/L硫代硫酸钠液量,ml;

1.5013-----1ml碘液(0.lmol/L)相对甲醛的量,mg;

10------甲醛稀释液取样量,mlo

b:甲醛标准液:精取甲醛稀释液,加水准确稀释1000倍,即得。

B:AHMT溶液

取4-氨基・3-朋-5-琉基-1,2,4-三哇0.5g,加0.2mol/L盐酸100ml溶解,避光保存。需要说明的是,

用甲醛消毒时也有不加高镒酸钾,而将甲醛直接放入空调器内送入房间及用氨水中和的方法。不管采用什

么方法,只要经过验证是可行的,都可以使用。

问:细菌室工作守则(微生物室SOP之一)是什么?

答:细菌室工作守则

1.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。

2.入室前应穿工作服,并做好实验前的各项准备工作。

3.实验室内应保持肃静,不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动,以免引起风动,无关人

员禁入。

4.非必要物品禁止带入实验室,必要资料和书籍带入后,应远离操作台。

5.做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前,请勿丢弃标本。

6.标本处理及各项试验应在操作间进行,接种环用完后应立即火焰灭菌,沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在

消毒液内。

7.实验时手部污染,应立即用过氧乙酸消毒或浸于3%来苏儿溶液中5-10分,再用肥皂洗手并冲洗干净;

如误入口内,应立即吐出,并用1:1000高镒酸钾溶液或3%双氧水漱口,根据实际情况服用有关药物。

8.实验过程中,如污染了实验台或地面,应用3%来苏儿覆盖其上半.小时,然后清洗;如污染工作服,应立

即脱下,高压灭菌。

9.若出现着火情况,应沉着处理,切勿慌张,立即关闭电闸,积极灭火。易燃物品(如酒精、:甲苯、乙

悔和丙酮等)必须远离火源,妥善保存。

10.工作结束时检杳电器、酒精灯等是否关闭,观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况,用浸有消毒液的抹

布将操作台擦拭干净,并将试剂、用具等放回原处,清理台面,未污染的废弃物扔进污物桶,有菌废弃物

应送高压灭菌后处理。

11.离室前工作人员应将双手用消毒液消毒,并用肥皂和清水洗净。

12.爱护仪器设备,经常清洁,注意防尘和防潮。

[/font][font=times]问:紫外灯管是什么玻璃材料做的?原理是什么?

答:紫外线杀菌灯基本常识

----------------------------------------------(彭海军)

----杀菌灯实际上是属于一种低压汞灯。低压汞灯是利用较低汞蒸汽压(<10-2Pa)被激化而发出紫外光,

其发光谱线主要有两条:•条是253.7nm波长;另条是185nm波长,这两条都是肉眼看不见的紫外

线。

一一用来照明用的I」光灯、节能灯也属了低压汞灯,依*低压汞蒸汽被激发后发射紫外线,其中254nm波

长的紫外线照射到荧光粉上再发出可见光,如果改变荧光粉的成分和比例,它就可以发出我们通常所见的

不同颜色的光。

----杀菌灯不需要转化为可见光,253.7nm的波长就能起到很好的杀菌作用,这是因为细胞对光波的吸收

谱线有一个规律,在250~270nm的紫外线有最大的吸收,被吸收的紫外线实际卜.作用于细胞遗传物质

即DNA,它起到一种光化作用,紫外光子的能量被DNA中的碱基对吸收,引起遗传物质发生变异,使细

菌当即死亡或不能繁殖后代,达到杀菌的口的。

一一日光灯和节能灯使用普通玻璃做成的,253.7nm紫外线透不出来,不能用做杀菌用的灯,石英玻璃对

紫外线透过率高,达90%,是做杀菌灯的最佳材料,但是石英玻璃的性能与普通玻璃在性能I:有很大的差

别(主要是热膨胀系数不同),封接不能用普通的自动化程度较高的圆封的办法,这使得杀菌灯生产制造的

技术含量要高于普通节能灯.

一一有一种透紫外线的玻璃,即通常所说的高硼玻璃,它对紫外透过率约是石英玻璃的60%,它的生产工

艺与节能灯•样,使得它的成本与价格比石英玻璃生产的杀菌灯相差很远,儿瓦的灯管只需儿元,但它在

性能上远比不上石英杀菌灯。表现在如卜.几方面:

--1、透过率不同,在同样规格经同样镇流器测试,“英玻璃杀菌灯紫外线强度是高硼玻璃杀菌灯的1.

5倍以上;

--2、高硼玻璃灯紫外光强度很容易衰减,它点灯数百小时后其紫外光强度就大幅下降,降到初始时的

50%-70%.在用户手上,虽然看到灯管还是亮的,但它可能已不起作用了。而石英玻璃的光衰减程度要

远小于高硼灯,如果生产工艺过关,石英灯的光衰减在经点灯2000-3000小时,光衰减到初始时的80%

-70%,以后只要灯不灭,光衰的幅度会越来越小。

一一国内杀菌灯的客户可能会了解非利浦的杀菌灯,菲利浦有一种杀菌灯是用•种接近普通玻璃的玻璃生

产的,而非石英玻璃制造的,其透光率接近石英玻璃的透过率,比中国的高硼玻璃灯要高得多,可使用自

动化程度较高的节能灯生产工艺生产,这种灯主要依*他们炼制这种玻璃的技术。它的缺点是不能产生臭

--一石英杀菌灯的另一个特点是可发出臭氧。由于石英玻璃对短波185nm的紫外线透过率也高,185nm

的紫外线能电离空气产生臭氧,臭氧浓度高对人体不利,但在无人场合时能使用,臭氧也能杀菌、消毒,

恰好可弥补由于紫外线只沿直线传播、消毒有死角的缺点。

----有些场合不能有臭氧,也可使用石英杀菌灯,这种石英玻璃在炼制的时候就加了一种元素一钛(Ti),

使它透过紫外线在200nm以下发生截止,而对254nm紫外线透过基本无影响,即通常所说的无臭氧杀

菌灯。

----从以上分析,做杀菌灯用石英玻璃是最佳选择。在国内,医疗卫生领域,早已不推荐使用高硼杀菌灯,

在美国、加拿大、日本生产紫外线杀偏灯普遍都采用石英玻璃。

原理:现代紫外消毒技术是基于现代防搜学、光学、数学、生物学及物理化学的基础上,利用特殊设计的

高效率、高强度和反寿命的C波段紫外光发生装置产生的强紫外C光照射流水、空气或固体表面,当水、

空气或固体表面中的各种细菌、病毒、寄生虫、水藻以及其他病原体受到一定剂量的紫外C光辐射后,其

细胞中的DNA结构受到破坏(键断裂,或光化学反应,如使DNA中THYMINE二聚等),从而在不使用

任何化学药物的情况下杀灭细菌、病毒以及其它致病体。达到「消毒和净化的目的。

问:手部受伤能工作吗?

答:细菌感染(局部化脓等现象,严重可引发全神感染),建议暂停工作。

何:生泡梭菌可以用硫乙醇酸盐液体培养基进行保存吗?

答:生泡梭菌,可以短时间保存在硫乙醇酸盐液体培养基;长时间保存在疱肉培养基。

问:药品本身带很多菌,影响验证,怎么办?

答:样品放到很烫的稀释剂里,若无效,采取高压湿热灭菌。

问:直接接种法和薄膜过滤法的区别

答:直接接种法取样量少,方法繁琐,且易受外源性细菌污染,对操作者和操作环境要求高,对实验结果的可*

性影响较大。薄膜过滤法采用大取样量集菌的方法,具有代表性,不易漏检,仪器操作简单。该系统是全封闭

过滤系统,避免了操作过程中外源性细菌的污染,对实验结果的可*性影响较小。薄膜过滤法的缺限是集菌仪

的价格较高,一次性使用的集菌培养器也是一项支出,所以较直接接种法而言,花费的成本要高•相对产品质

量而言,增加这点投入也

是应该的。

间:抗菌类药物的微生物检查有必要么?

答:对抗细菌药,它的种类繁多,抗菌的作用也不尽相同,有的细菌也只是暂时失去了活性,当抗菌作用

消除后,细菌仍可表现出它的活性,所以,需要找出合适的方法,消除其抗菌的活性,才能说明药品是否

真的没有菌,做检查当然有必要。

问:无菌检验培养期间,滤器的膜卜一面有气体,导致薄膜向上供起,薄膜表面有小气泡冒出,培养基澄清,

什么原因?

答:滤器质量不好,导致薄膜脱落,结果无效,试验应重做。

何:验证时阳性菌计数不规律怎么办?

答:稀释---培养(稀释菌液置4度低温保存)一一计数----作为验证试验的阳性菌使用。

问:如何减少或消除培养基制备过程中的气泡,尤其是胆盐乳糖培养基?

答:灭菌时将冷空气排除干净;将装有胆盐乳糖培养基的试管在培养基不接触试管塞的前提卜.倾斜,直至杜

氏导管中的气泡排除.

问:标准灭菌时间

按FO=Ft*10(0121)/10计算,F0要大于8,在160--170度是短时间就能做到的,为什么干热火

菌要两小时以I:呢?

答:湿热灭菌和丁热灭菌的效果是不同的,饱和蒸汽的穿透性比丁热空气穿透强得多,蒸汽冷凝时放出的潜

热传给待灭菌品,使之升温并使待灭菌品所带的微生物尤其是表面的微生物发生水合作用,从而加速了它

们的死亡。所以在达到同样灭菌效果的前提下,湿热灭菌所需要的时间要短得多。

(公式F0=Ft*10(t-121)/10只适合于湿热灭菌,F0系T=121℃及Z=10℃卜的FT值。如果

把12rC理解为''标准状态",那么F0可理解为''标准灭菌值”)

问:验证是不是要3批样品的一次,还是•批样品的3次,还是3次样品3次得实验?

答:1、验证的目的,是要考察实验方法的可行性(避免出现假阳性、假阴性),

2、在样品的药物组成、成份、给药途径致的前提卜.,验证时,''同一个批号的做3次"或''3个批号的各

做一次",均可。

问:集菌仪用的洗瓶如何灭菌?

答:集菌仪用的洗瓶,胶塞扎入针头(顶部塞入适量脱脂棉)--包纱布,再用一层牛皮纸包好……用121

度湿法灭菌30min。

问:用薄膜过滤法做细菌及霉菌的阳性菌计数时用做平行吗?

答:需要做平行试验(2张薄膜)。

问:做实验的好习惯是什么?

答:1.实验前后清洁洗手,完毕清理实验现场,滥皿洗净归原,仪器等电源关闭。

2.试剂、样品标签详细准确,包括剂量,规格,时间,实验人员等等;实验记录详细准确,以便备查和分

析。

3.提前分析实验内容及步界,准备好全部的试剂及相应工具、仪器,不懂或者有疑问的步骤和地方问清楚,

重点难点重点标出,做到心中有数;实验完毕及时分析。

4.科学计划、合理分配时间,做到忙而不乱。实验中仔细观察试验过程,及时记录可疑或者需要注意的地

方。

5.多读文献多与别人交流,开拓思路,改进方案,对于实验的进展及方向做到一定的把握。

关键词:做实验、好习惯

问:如何减少培养基灵敏度下降引起的误差?

答:目前大多数单位使用干粉培养基,使用较方便,但由于其极易吸潮,如存放不当出现凝块,则其凝

固性较差,应避免使用。新鲜配制的培养基应在2匕〜2()℃避光保存,但不得冻结,保存时间不得过2周.

硫乙醇盐流体培养基储存过程中,若氧化还原层超过1/5,须经水浴加热煮沸lOmin方可使用,但只限一次。

否则可使培养基中糖、微生物和氨基酸受到破坏,影响质量

问:如何控制细菌的培养时间?

答:不同的培养时间对样品细菌总数计数结果的影响样品经24h培养后,有的菌落很小,容易漏掉,培养

48h后,菌落不但变大,而且还有很多新生长出来的菌落,培养72h后,菌落数增加不多,但菌落明显变

大,而且混杂的霉曲,生长旺盛,影响结果的观察计数。同时这也是一些样品经72h培养后细菌总数技术有

明显增加的•个原因。培养24h和培养48h计数结果有明显差异,后者合格率明显降低,所以在规定的

培养环境下,应严格遵守培养时间,以便真实的反映出样品中细菌总数的水平。

问:菌种保藏与管理应执行哪些程序?

答:菌种保藏与管理应有完整的程序,保藏的菌种必须具备该菌种的详细历史及有关资料。一般是首先填写

菌种卡片,登记菌种名称编号,来源历史,形态特征,生化与血清学鉴定,以及菌种传代次数、最宜培养

基和培养条件、保藏方法、贮存条件及保藏地址等

问:青霉素酶的保存条件及温度对其活性的影响

答:青霉素酶能够在40保存6个月以上活性不发生显著改变。与同时采用的加入甘油或增加氯化钠浓度

保护酶活性的方法比较,没有显著的不同;

温度对青霉素酶的活性影响很大。55℃时对青霉素G呈现最高水解活性,随着温度的

升高或降低,酶水解活性逐渐下降。缓冲液pH对酶活性存在一定的影响,最适酸碱度为

pH7.0,在应用本酶进行青霉素制剂无菌检查等应用时,需特别注意测试温度及酸碱度

的影响.

问:十四烷酸异丙酯的灭菌方法?

答:1、过滤除菌。

2、高压蒸汽灭菌121℃30min

[/font][font=times]问:带专有溶酶的供试品的无菌检查?

答:有些供试品带专有溶酶,而且溶酶的标准是附在样品标准中的,进行无菌检杳需要单独进行;验证当

然也要分开了。

问:无菌检查中,哪些样品需用直接接种法?

答:无菌检查大多采用薄膜过滤法。经前处理后,仍难过滤的样品可采用直接接种法。

问:阳性菌和样品是否需要分别培养?

答:阳性菌和样品需要分别培养,若条件允许,最好分房间培养。

问:T燥培养基吸潮问题?

答:放在10到15摄氏度的冰箱中保存。

问:稳定性实验的微生物及无菌检查,是否每次都要做?

答:是;

原因:一实验期内可能会染菌;

灭菌后微生物并不是就彻底"死亡”,有些成为碎片,这些碎片在一定的条件和时间卜:可以自我修复而复活.

三稳定性的考察,也应包括药品有效期的考察,在此期间所有的项目都应是合格的,无菌也是其中之一,

如果在有效期内无菌不合格,也可以说明该药品存在•定的缺陷,至少,有效期有问题。

[/font][font=times]问:眼部给药制剂如何做卫生学检验?

答:液体制剂:无菌检杳;

半固体及固体制剂:微生物限度检查

问:滴眼液的微生物限度为何进行无菌检杳?

答:一滴眼剂产品系按照无菌工艺生产且终产品为灭菌产品,故其成品的微生物质量应要求统一为无菌;

所以,滴眼剂产品的临床合理用药应与其卫生标准要求一致,即将其微生物质量要求统一为无菌,显然更为合

理;

二滴眼剂的微生物质量要求为无菌,是与各国药典在滴眼剂要求上的统•,及对《中国药典》此项规定合理

性的补充及完善等方面看,滴眼剂成品的微生物质量要求统•为无菌具有必要性。

三同时,中国已加入WTO,进出口药品已有明确质量要求(在国外药典中,眼用药品都以无菌要求),同时临

床用药更加合理与规范。

故现行药典将滴眼剂的卫生标准统一为强制性无菌要求。

问:如何进行灭菌验证?

答:可用生物指示剂进行验证,

湿热灭菌:湿热脂肪芽泡杆菌抱子

干热火菌:枯草芽泡杆菌抱子

以上两种北京四环卫生药械厂有限公司均有卖,网址:http:〃www.bjshxd.com/cqxl_13.html

问:为何洁净度沉降菌的检查只用营养琼脂?

答:「玫瑰红钠培养基对细菌的生长有抑制作用,而营养琼脂对于真菌的生长则没有抑制作用,所以选用营

养琼脂作为培养基

:营养琼脂生要为培养细菌,而且培养时间是2天,原因为细菌为原核生物,生长与繁殖的能力较霉菌等真

核生物强,所以控制了细菌,霉菌等真菌也在一定程度上也得到了控制

三厂家在制定自己的内控标准时,可以同时对细菌和真菌进行控制.

问:微生物培养时间范围如何界定?

答:含量测定所允许的误差为±2%,如果照此限度,无菌培养时间为14天*24小时/天=336小时,它的2%为6.

72小时,前后共13.44小时;又加上无菌检验没有必要达到含量测定所要求的精度,所以我们完全可以在培养

的第1•四天的任何上班时间观察结果下结论.微生物限度检杳培养时间分别为48小时及72小时,它们的2%

分别为0.96小时,1.44小时,即我们只能在准确培养时间的前后1-2小时内计数.

[/font][font=times]问:抗生素乳膏,需加聚山梨酯80、司盘、单硬脂酸甘油酯乳化,后离心集菌(离心后

不分层),再薄膜过滤。但基质堵住膜孔,过滤速度非常慢,怎么办?

答:1,可以用十六烷酸异丙酯萃取基质,使之分层,取水层进行薄膜过滤(回收率差)。

2、样品加入吐温-80,乳化(45度)——薄膜过滤。

问:陶瓦盖作用及使用范围

答:陶瓦盖的主要作用为防止菌落蔓延生长成片或发生重叠影响计数,通常在在效价测定中使用,在微生物

限度检查中仅在易形成片状菌某些剂型如蜜丸、水丸中使用.

问:如何根据消毒物品的特性确定合格的灭菌时间和温度?

答:•般情况下,含有糖分的培养基温度需控制在115-C15〜20min,不含糖分的培养基温度控制在12VC

15〜20min,而含菌的培养基(使用过)温度需控制在121℃30min左才i,此外每次使用时,应放入必

要的监视指标。

问:适宜药厂检验室,菌种的保藏方法?

答:大肠/金黄色葡萄球菌/沙门低温斜面保藏,2〜8匕,1—2个月;

绿脓常温斜面保臧,1〜2个月;

枯草低温斜面保藏,2〜8℃,3〜6个月;

生饱硫乙醇酸盐流体培养基低温保藏,2〜8℃,2〜3个月;

白色念珠低温斜面保藏,2〜8c,3〜6个月;

黑曲霉低温斜面保藏.2〜8匕2〜3个月;(有误请发论坛消息给我指正,这是我目前用的方法,谢)

|/font]|font=times]问:如何使验证实验在制备供试液后1小时做完?

答:小窍门:统筹安排验证试验,把时间合理化.

举例常规法-------1制备菌液放到中午临近卜一班时来完成.2卜.午•上班就开始验证试验前期工作,进行供

试液的制备3按预先安排进行验证4完成验证试验后,进行规定的培养.

很多人把菌液稀释拿到和制备供试液,起来做,1小时肯定要超.

问:常用的灭菌参数?

答:湿热灭菌12:TC15min(灭菌培养基等);

湿热灭菌121℃30min(灭菌不宜干烤的玻璃器皿常用)

干烤灭菌160-180*C2小时

干烤灭菌250℃至少1小时(除外源内毒素用)

问:培养基如何调PH?

答:

一般培养基的PH值规定范围都精确到小数点后一位,比如说PH7.0的氯化钠一蛋白陈水要求为7』±0」,

PH试纸是不能满足此精确度的,只能用PH计调:

由于灭菌后调PH要想保持无菌,调节PH值所用滴管、溶液乃至PH的电极必须也要灭菌,其中某些

条件显然是无法到达的,所以只能灭菌前调PH:

由于大部分培养基中某些成分(比如说牛肉、蛋白豚等)经高温灭菌后会产酸导致PH变低,故培养基在

配制完毕后调节PH值(调高0.2)再灭菌。

控制培养基的PH值目的是使微生物能够良好生长的,而培养(23℃〜28℃,30C〜35匕)的温度在室

温左右,所以应该在室温(10-30-0条件下调PH.

问:TTC的作用?

答:

TTC是氯化四理,即2,3,5一三苯基氯化四睫,它的无色溶液可以做指示剂,可以显示活细胞中所发生

的还原过程。再活细胞中,2,3,5一三苯基氯化四啄经氢化作用,生成•种红色稳定的不扩散物质三苯基

甲月替,可以帮助我们识别菌落

[/font][font=times]问:纯化水的验证与检查

答:GMP有规定:纯化水系统安装之后需要验证其管道消毒效果的验证,验证期间:最远处管II需每日验证,持

续一年

其他各管口需一周全部验证一遍,持续3周

验证完毕,每周需检查,而每管口需一月轮一次

|/font][font=times]问:每一个药的无菌检杳验证是否也要像限度验证那样重复做3次呢?

答:一次就可以了,不过记得要做培养基的灵敏度检查和同时做无菌性检查哦

注意:不同品种的药品(不包括厂家、批次不同),无菌检查验证、微生物限度限度验证•定要重复

做3次!

问:做无菌验证时阳性对照菌是怎么加入的?可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入吗?

答:严格的说是要在最后一遍冲洗液中加入阳性对照菌的,这主要是考量滤膜对于阳性菌的截留性〜

但是滤器如果可以提供滤膜对于阳性菌的充分截断的话在最后的培养体系中加入阳性菌也是未尝不可的.

如果供试品没有抑俏作用,可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入,摇匀

如果供试品有抑菌作用,正如安哥洛卡所讲,在最后一次冲洗液中加入阳性对照菌,摇匀,抽虑,加培养基.

无菌检杳,加入阳性的方法可以有许多种,可以根据个人的习惯。

只是注意:1、避免人为污染。2、阳性菌加入数量,符合''2005版中国药典XIJ微生物限度检查法”的规

定。

间:离心沉淀法的原理、操作和注意事项是什么?

答:原理:利用沉降系数的差异将供试品和微生物进行分离;

操作:取规定量的供试液,3000转/分离心20分钟(供试液如有沉淀,先以500转/分离心5分钟,取全部上

清液再离心),弃去上清液,留底部集菌液约2ml,加稀释剂至原规定量.

注意事项:真菌由于沉降系数比较小,500r/min离心5min,黑曲霉、白色念珠菌回收率为20%,因此其检查不

适宜用低速离心沉淀法.

|/font||font=times]问:开放式薄膜过滤器,滤膜应该采用什么方法灭菌

答:1,湿热灭菌法适合少量且膜尺寸会有缩小

2,钻60辐射灭菌,•张膜用•个塑料袋包好,•次去灭菌500到1000张膜,效果很好

3,购买成品已灭菌膜

问:生化、霉菌、恒温培养箱怎么区分和选择?

答:1.生化培养箱主要用于生化反应的孵化,所以它们的门主要由玻璃组成,用于在特定温度孵化反应,操作

者可在不破坏反应条件的前提下在外观察反应的变化;亦可用于细菌霉菌与控制菌的培养.

2.霉菌培养箱与生化培养箱大体相同,其区别在于多了一个灭菌开关,用于杀灭霉菌的泡子

3,恒温恒湿培养箱主要用于培养细菌和控制菌,正如其名,其密封性好,温度和湿度都是可控恒定的,但不便

于在外观察;

总之,三种培养箱各有所长,使用者可根据自己的具体需要选择

问:为什么验证时试脸组中菌液和供试液在加培养基之前尽量避免混合?

答:验证是考察供试品经所用方法处理后对微生物抑制能力的消除程度,所以在注皿前一定保证微生物是处

了成活的状态,真实地反应微生物在有营养成分的良好培养条件下(我们人体便是一个很好的培养环境)与

供试品作用的结果.否则,便失去了我们验证的意义.故验证的过程中,试验组中菌液和供试液在加培养基之

前尽量避免混合,然后尽快倾注培养基.

问:2005版中国药典及各国药典对于回收率如何规定?

答:关于回收的限率问题,各国药典规定不同.;EP、BP.JP:各试验菌的回收率均不低于80%;2005版中

国药典及USP:各试验菌的回收率(包括供试品组和稀释剂对照组)均不低丁70%.各国设定下限都只是

根据各国的实际情况和统计数据对方法所制定的一个门槛,旨在考察供试品经所用方法处理后对微生物抑

制能力的消除程度.对于它的上限,根据药典委员会的专家推荐,以不超出120%为限.

答:回收率

问:常用菌种及培养基英文对照

答:Bacillussubtilis枯草芽抱杆菌

Bacilluspumilus短小芽胞杆菌

Staphylococcusaureus金黄色葡萄球菌

Micrococcusluteus藤黄微球菌

Escherichiacoli大肠埃希杆菌

Saccharomycescerevisiae啤酒酵母菌

Candidaalbicans白色念珠菌

Aspergillusniger黑曲霉

SalmonellaparatyphiB乙型副伤寒沙门(氏)菌

Pseudomonasaeruginosa铜绿假单胞菌

Coliform大肠菌群

Clostridium梭菌

Nutrientagar营养琼脂培养基

RoseBengalagarSodium玫瑰红钠琼脂培养基

Nutrientbrothmedium营养肉汤培养基

Thioglycollatemedium硫乙醇酸盐流体培养基

Martinmediummodified改良马丁培养基

Bilesaltlactoseenrichment胆盐乳糖培养基

0.1%peptonewatermedium0.1%蛋白陈水

pH7.0sodiumchloridepeptonebufferpH7.0氯化钠一蛋白月东缓冲液

Lactosebilesaltfermentationmedium乳糖胆盐发酵培养基

DHL(deoxycholateH2Slactoseagar)agarmedium胆盐硫乳琼脂培养基

Tetrathionateenrichmentbasemedium四硫磺酸钠亮绿基础培养基

Eosiamethyleneblueagarmedium曙红亚甲蓝琼脂培养基

问:该如何理解“常用供试液制备方法:

1、液体供试品一一取供试品10ml,加pH7Q氯化钠蛋白腺缓冲液至100mL混匀,作为1:10的供

试品液。……(请问,这里加PH7.0氯化钠蛋白陈缓冲液是90ml还是90ml以上,大概估计到100ml?

2000年版说的很明白90ml稀释液)

2、固体供试晶一一取供试品10g,加pH7.0氯化钠蛋白豚缓冲液至100ml........(请问,这里又该加p

H7.0氯化钠蛋白陈缓冲液是90mL或者90多ml,或者100ml?2000版为100ml稀释液)

[按照2005年版,在制备供试液时该如何加入稀释液(pH7.0氯化钠蛋白陈缓冲液)]

答:2005年版药典二部附录:''常用供试液制备方法:液体供试品、固体供试品一一取供试品10ml,加p

H7.0氯化钠蛋白陈缓冲液至100ml,混匀,作为L10的供试品液。

‘'加至"应理解为''稀释液"与''供试品"的总最为100ml。作为固体供试品,称取2005版药典规定g数,置

灭菌量筒中,加入PH7.0氯化钠蛋白陈缓冲液至100ml,再移至其它匀浆容器,混匀!

对于液体样品,可以这样操作:取100ML灭菌量筒加入10ML样品,加稀释剂至100ML刻度!

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