药物分析课件

药物分析课件基本要求

一、掌握吡啶类、吩噻嗪类、苯并二氮杂卓类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。二、熟悉本类药物中典型药物国外药典收载的鉴别和含量测定方法。返回第2页,共52页，2024年2月25日，星期天第一节吡啶类药物一、典型药物的结构与主要化学性质（一）典型药物的结构

吡啶（pyridine）异烟肼（isoniazid）第3页,共52页，2024年2月25日，星期天尼可刹米（nikethamide）第4页,共52页，2024年2月25日，星期天硝苯地平（nifedipine)第5页,共52页，2024年2月25日，星期天（二）主要化学性质

1、弱碱性

吡啶环上的氮为碱性氮原子，吡啶环的pKb

值为8.8（水中）。尼可刹米除了吡啶环上氮外，β位上被酰氨基取代。酰氨基化学性质不甚活泼，但遇碱水解后释放出具有碱性的二乙胺，故可以进行鉴别。

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2、还原性

异烟肼的吡啶环γ位上被具有还原性酰肼取代，可被氧化剂氧化，可与含羰基的化合物发生缩合反应。

3、吡啶环的特性

异烟肼和尼可刹米的吡啶环α、α’位未取代，而β或γ位被羧基衍生物所取代，其吡啶环可发生开环反应。（戊烯二醛反应）

第7页,共52页，2024年2月25日，星期天二、鉴别试验（一）吡啶环的开环反应

本反应适用于吡啶环的α、α’位无取代基的异烟肼和尼可刹米。1.戊烯二醛反应（köning反应）尼可刹米+溴化氰H2O戊烯二醛衍生物苯胺黄色第8页,共52页，2024年2月25日，星期天第9页,共52页，2024年2月25日，星期天（黄色~黄棕色）第10页,共52页，2024年2月25日，星期天（二）酰肼基团的反应

1．还原反应异烟肼+AgNO3异烟酸银+N2+Ag(白色）银镜异烟肼+亚硒酸硒（红色）第11页,共52页，2024年2月25日，星期天2．缩合反应

异烟肼的酰肼基与芳醛缩合形成腙，其有固定的熔点，可用以鉴别。ChP和BP均采用本法鉴别.

黄色结晶mp为228℃～231℃

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（三）分解产物的反应使湿润的红色石蕊试纸变蓝尼可刹米+NaOH

二乙胺第13页,共52页，2024年2月25日，星期天

（一）异烟肼中游离肼的检查

1.TLC法

Ch.P中异烟肼及其注射,采用TLC法中杂质对照法。

对照品：硫酸肼0.20mg/ml（相当于游离肼50μg）

薄层板：硅胶（用羧甲基纤维素钠溶液制备）

展开剂：异丙醇-丙酮（3：2）

显色剂：乙醇制对-二甲氨基苯甲醛试液

检测结果：供试品主斑点前方，不得显黄色斑点

三、有关物质检查第14页,共52页，2024年2月25日，星期天(二)尼可刹米中有关杂质检查

因有关杂质的化学结构不明，故Ch.p采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。

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(三)硝苯地平中有关物质检查

硝苯地平遇光分子内部发生光化学歧化作用，降解为4-（2-硝基苯基）-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸二甲酯（A）和4-（2-亚硝基苯基）-2,6-二甲基吡啶-3,5-二羧酸二甲酯（B）。其化学结构如下:第16页,共52页，2024年2月25日，星期天第二节吩噻嗪类药物一、基本结构与化学性质（一）结构特点与典型药物第17页,共52页，2024年2月25日，星期天第18页,共52页，2024年2月25日，星期天第19页,共52页，2024年2月25日，星期天奋乃静第20页,共52页，2024年2月25日，星期天癸氟奋乃静第21页,共52页，2024年2月25日，星期天盐酸氟奋乃静第22页,共52页，2024年2月25日，星期天盐酸三氟拉嗪第23页,共52页，2024年2月25日，星期天（二）主要化学性质1.紫外和红外吸收光谱特征硫氮杂蒽母核为共轭三环л系统

三个最大吸收峰别在：205nm、254nm、300nm由于2位、10位上的取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。

硫氮杂蒽母核的硫为二价，易氧化为砜和亚砜，其紫外吸收光谱有明显不同，它们具有四个峰值。另外，取代基R和R’的不同，则可产生不同的红外光谱第24页,共52页，2024年2月25日，星期天2.易氧化呈色

二价硫易氧化，遇不同氧化剂如硫酸、硝酸、三氯化铁试液及过氧化氢等，随着取代基的不同，而呈不同的颜色。

3.与金属离子络合呈色

本类药物中未被氧化的硫，可与钯离子形成配位化合物，其氧化产物则无此反应。此性质可用于鉴别和含量测定，并具有专属性，可消除氧化产物的干扰。第25页,共52页，2024年2月25日，星期天（一）紫外特征吸收和红外吸收光谱

本类药物可用UV和IR鉴别，Ch.P中UV鉴别实例如下：

药物名称溶剂浓度（μg/ml）λmax（nm）AE1%1cm盐酸氯丙嗪盐酸（9→1000）52540.46915306—

—盐酸异丙嗪盐酸（0.01mol/L）6249—883~937奋乃静无水乙醇72580.65—癸氟奋乃静乙醇10260—

—盐酸氟奋乃静盐酸（9→1000）10255—553~593盐酸三氟拉嗪盐酸（1→20）10256—630盐酸硫利达嗪乙醇8264与315—

—二、鉴别试验第26页,共52页，2024年2月25日，星期天

（二）显色反应

1.与氧化剂的显色反应

药物名称硫酸硝酸过氧化氢

盐酸氯丙嗪显红色,渐变淡黄色—盐酸异丙嗪显樱桃红色,放置生成红色沉淀,加热即溶解,后颜色渐变深溶液由红色转变为橙黄色奋乃静—

—显深红色;放置后红色渐褪去盐酸氟奋乃静显淡红色,温热—

—后变成红褐色盐酸三氟拉嗪—生成微带红色的白色沉淀;放—置后,红色变深,加热后变黄色

盐酸硫利达嗪显蓝色

—

—

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2.与钯离子络合显色反应

利用分子结构中未被氧化的硫与金属钯离子络合形成有色络合物，如与癸氟奋乃静形成红色络合物。第28页,共52页，2024年2月25日，星期天第29页,共52页，2024年2月25日，星期天（三）分解产物的反应

癸氟奋乃静碳酸钠及碳酸钾F-+酸性茜素锆试液[ZrF6]2-配位离子，茜素游离使溶液由红色变为黄色。600℃炽灼第30页,共52页，2024年2月25日，星期天盐酸异丙嗪中特殊杂质检查主要有：2-二甲氨基-1-丙醇；N,N,β-三甲基-10H-吩噻嗪-10-乙胺异构体和结构不清的分解产物

。因此采用TLC法中的

高低浓度对比法控制上述这些杂质的限量。三、特殊杂质检查返回第31页,共52页，2024年2月25日，星期天第三节苯并二氮杂卓类药物一、结构特征与典型药物NNClH3CO地西泮第32页,共52页，2024年2月25日，星期天阿普唑仑第33页,共52页，2024年2月25日，星期天奥沙西泮第34页,共52页，2024年2月25日，星期天氯氮卓NNNCH3OClH第35页,共52页，2024年2月25日，星期天

(一)化学鉴别试验

1。沉淀反应

氯氮卓

橙红色沉淀

阿普唑仑盐酸氟西泮

＋KBiI4

也生成橙红色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀颜色变深，

因此可以相互区别。二、鉴别试验阿普唑仑+遇硅钨酸白色沉淀，药典中也用于鉴别。第36页,共52页，2024年2月25日，星期天2.水解后呈芳伯胺反应

氯氮卓和奥沙西泮，其反应如下：第37页,共52页，2024年2月25日，星期天3.硫酸-荧光反应

本类药物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，显不同颜色的荧光。例如：

地西泮黄绿色

黄色氯氮卓黄色

紫色艾司唑仑+H2SO4亮绿色+稀硫酸天蓝色硝西泮淡蓝色

蓝绿色奥沙西泮淡黄绿色第38页,共52页，2024年2月25日，星期天4.分解产物的反应

本类药物多为有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，显氯化物反应。Ch.P用于地西泮和三唑仑药物的鉴别。

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（二）紫外特征吸收和红外吸收光谱

药物名称溶剂浓度（μg/ml）λmax（nm）A

地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242约0.51282

约0.23366氯氮卓盐酸溶液(9→1000)7245,308阿普唑仑盐酸溶液(9→1000)12264盐酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2,284±2比值1.95～2.50362±2氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2,307±2奥沙西泮乙醇10229,315±2(较弱)

红外吸收光谱:已用于地西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、盐酸氟西泮、氯硝西泮和奥沙西泮的鉴别。

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（一）有关物质检查

Ch.P收载的八种本类药物，除氯氮卓外，其余均作此项检查。其检查方法除了三唑仑采用GC法外，其余均用TLC法进行检查。USP(24)和BP(2000)中对氯氮卓都规定了此项检查，而且均用TLC法进行检查。三、特殊杂质检查第41页,共52页，2024年2月25日，星期天

1.地西泮中有关物质的检查

地西泮在合成过程中因其副反应，可能引入N-去甲基苯甲二氮卓及化学结构不清的有关物质，可采用TLC法中的高低浓度对比法进行检查。

2.氯氮卓中有关物质的检查

USP(24)用TLC法检查氯氮卓中的有关物质，并规定其分解产物2-氨基-5-氯-2-苯甲酮含量不得过0.01%；中间体7-氯-1，3-二氢-5-苯基-2H-1，4-苯并二氮杂卓-2-酮-4-氧化物含量不得过0.1%。第42页,共52页，2024年2月25日，星期天(二)降解产物的检查

地西泮注射液列入此项检查，因本品在贮藏过程中有可能分解成2-甲氨基-5-氯-二苯甲酮等杂质。采用HPLC法进行检查。返回第43页,共52页，2024年2月25日，星期天一、非水溶液滴定法(一)基本原理第四节含量测定当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。第44页,共52页，2024年2月25日，星期天(二)一般方法供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果高氯酸滴定液滴定以空白试验校正第45页,共52页，2024年2月25日，星期天(三)问题讨论1.适用范围

主要用于Kb＜10-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为8～13的弱碱性药物采用本法滴定。

一般来说：

Kb为10-8～10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；药物的Kb为10-10～10-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；Kb＜10-12时，应用醋酐作为溶剂。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。

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2.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减：

高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞硝酸

消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2

量不足终点不明显，结果偏低。

2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

过量(1～3倍)不影响测定结果第47页,共52页，2024年2月25日，星期天3.终点指示方法

常用电位法和指示剂法Ch.P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。第48页,共52页，2024年2月25日，星期天(四)应用实例

1.游离弱碱性药物测定

异烟肼、尼可刹米、地西泮及氯氮卓等。基于这些药物分子结构中氮原子的弱碱性，可用非水溶液滴定法直接测定其含量。由于这些药物的碱性强弱不同，测定时所采用溶剂、指示剂及其指示终点的方法也不尽相同。

药物名称取样量(g)溶剂指示剂终点颜色

尼可刹米0.15冰醋酸10ml结晶紫蓝绿色地西泮0.2冰醋酸、酸酐10ml结晶紫绿色氯氮卓0.3冰醋酸10ml结晶紫蓝色第49页,共52页，2024年2月25日，星期天

2.氢卤酸盐类药物测定

当这些药物溶于冰醋酸时，由于氢卤酸在冰醋酸中酸性较强，对测定有干扰，必须先加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成难以电离的卤化汞，而氢卤酸盐药物，则转变成可测定的醋酸盐。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可获得满意