脂类的测定选用

脂类的测定选用第四章食品的一般成分分析第2页,共37页，2024年2月25日，星期天一、概述1、食品的脂类含量2、食品中脂类物质存在形式第四节脂类的测定游离态脂肪:动物油脂、植物油脂结合态脂肪：磷脂、糖脂、脂蛋白等存在形式3、脂类在食品与食品加工中的作用①脂类在食品中的作用②脂类在食品加工中的作用第3页,共37页，2024年2月25日，星期天4、脂类物质的理化性质（1）不溶于水，易溶于有机溶剂（2）脂类水解（3）氧化反应（4）不饱和脂肪酸的双键易与卤素发生加成反应（5）高温下甘油结构的脂类易发生氧化，产生辛辣气味的丙烯醛。第四节脂类的测定第4页,共37页，2024年2月25日，星期天二、脂类含量测定第四节脂类的测定索氏提取法酸分解法罗紫-哥特里法巴布科克氏法盖勃氏法主要用于乳及乳制品中脂类的测定牛乳脂肪测定仪法属重量法，测定粗脂肪脂类测定的方法第5页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定3、巴布氏乳脂瓶常用脂类含量测定仪器

2、抽脂瓶

1、索氏脂肪抽提器4、盖勃氏乳脂计第6页,共37页，2024年2月25日，星期天（一）索氏提取法1、原理第四节脂类的测定样品预备处理干燥、松散样品乙醚、石油醚等有机溶剂提取非脂类物质有机溶剂+脂肪(粗脂肪)挥干脂肪(粗脂肪)第7页,共37页，2024年2月25日，星期天2、适用范围脂类含量较高，且主要含游离脂类，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结块的食品样品，不适用于乳及乳制品脂类含量测定。第四节脂类的测定第8页,共37页，2024年2月25日，星期天3、试剂和仪器（1）试剂①纯海砂第四节脂类的测定石油醚:分析纯,沸程30～60℃②提取剂无水乙醚：分析纯，不含醇类和过氧化物第9页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定（2）仪器①索氏提取器②水浴锅③电热鼓风干燥箱温控：100±5℃④分析天平第10页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定4、测定步骤（1）滤纸筒的制备（2）样品制备（3）索氏抽提器的准备（4）抽提第11页,共37页，2024年2月25日，星期天（4）抽提第四节脂类的测定回流次数:6次/h～8次/h提取时间:一般抽提6～12h，坚果制品提取约16h。终点判断:用滤纸或毛玻璃板由抽提管下接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。第12页,共37页，2024年2月25日，星期天（5）回收溶剂、烘干、称重第四节脂类的测定取下接收瓶取出滤纸筒连接好抽提器水浴加热回收提取液接收瓶内提取剂剩1mL～2mL在水浴上蒸干接收瓶于烘箱烘至恒重称量第13页,共37页，2024年2月25日，星期天5、结果计算第四节脂类的测定式中m1------接收瓶的质量，g；

m2------接收瓶和粗脂肪的质量，g；

m--------试样的质量，g。计算结果保留有效数字三位。第14页,共37页，2024年2月25日，星期天6、注意事项及说明（1）样品必须干燥无水，并且要研细。（2）抽提在操作时，应注意防火，切忌直接用明火加热，使用烘箱干燥前应去除全部残余的乙醚，因乙醚稍有残留，放入烘箱时，有发生爆炸的危险。（3）抽提用的乙醚要求无水，不含醇类和过氧化物，其中挥发残渣含量低。第四节脂类的测定第15页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定（5）在抽提时，冷凝管上端最好连接一个氯化钙干燥管，，如无此装置可塞一团干燥的脱脂棉球。（6）反复加热会因脂类氧化而增重。质量增加时，以增重前的质量作为恒量。（7）本法只能直接提取游离的脂类物质，对于结合态脂类，必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提取。第16页,共37页，2024年2月25日，星期天（9）试剂用量大，易出现爆炸，溶剂回收时溶剂挥发严重，污染空气，注意通风。实验耗时长。第四节脂类的测定第17页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定7、索氏提取法的发展现状在经典索氏提取器的基础上，目前已研究发明了大量的快速脂肪测定仪，如下主要特点1.官方批准的方法：AOAC和EPA

2.比传统的索氏法快五倍

3.全自动操作，无须看管就可获得精确的结果

4.使用专用操作工具，无需手动接触样品

5.配合水解装置可进行总脂肪的检测

6.批处理能力：6个/批Soxtex索氏抽提系统第18页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定1.过程自动化节省了时间

使测定时间缩短到45-60分钟即可完成2.使用溶剂的沸点达到150℃3.高效加热和传热系统实现高效萃取

4、根据样品体积和溶剂回收，调节溶剂的用量

5.集成的加热步骤，可使用惰性气体

6.所有部件均采用惰性连接，因此无样品污染

7.集成的加热元素无需添加附件索氏提取仪B-811-瑞士

参考价格：2.2万美金第19页,共37页，2024年2月25日，星期天（二）酸水解法1、原理样品经酸水解后用乙醚或石油醚提取，除去溶剂即得游离及结合脂肪总量。2、适用范围与特点本法适用于各类食品中脂肪的测定，特别是容易吸湿、结块，不易烘干,不能用索氏提取法测定的食品。不能用于含有大量磷脂、食糖的食品。

第四节脂类的测定第20页,共37页，2024年2月25日，星期天3、仪器：100ml具塞刻度量筒4、试剂：盐酸、95%乙醇、乙醚、石油醚5、测定方法：第四节脂类的测定试样盐酸加热水解乙醚和石油醚提取脂肪回收溶剂干燥称量第21页,共37页，2024年2月25日，星期天（1）样品固体样品：精密称取约2.0g，置于50ml大试管中，加8ml水，混匀后再加10ml盐酸。液体样品：称取10.0g置于50ml大试管中，加10ml盐酸。（2）加热水解：70～80℃水浴40～50min，每5～10分钟搅拌一次第四节脂类的测定第22页,共37页，2024年2月25日，星期天(3)提取取出试管，加人10毫升乙醇，混合。冷却后将混合物移于100毫升具塞量筒中，以25毫升乙醚分次洗试管，一并倒人量筒中。待乙醚全部倒入量筒后，加塞振摇1分钟，小心开塞，放出气体，再塞好。静置12分钟，小心开塞，并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗塞及筒口附着的脂肪。静置10-20分钟，待上部液体清晰，吸出上清液于已恒重的锥形瓶内，再加5毫升乙醚于具塞量筒内，振摇，静置后，仍将上层乙醚吸出，放入原锥形瓶内。第四节脂类的测定第23页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定

(4)回收溶剂、烘干、称重锥形瓶水浴上蒸干100～105℃干燥冷却称量100～105℃干燥…恒重第24页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定gmgmgmmmm试样的质量，—空锥形瓶的质量，—锥形瓶和脂类质量，—式中：）脂肪（121-2100×=%第25页,共37页，2024年2月25日，星期天(三)碱性乙醚提取法（罗兹哥特里法）1、原理：乳脂肪以脂肪球状分散于乳中，脂肪球周围包着一层蛋白质膜。利用氨-乙醇溶液使酪蛋白钙盐溶解，降低其吸附力，从而释放出结合性脂肪，使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中，而脂肪游离出来，再用乙醚－石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即为乳脂肪。2、适用范围：该法适用于能在碱性溶液中溶解或能形成均匀混悬胶体的样品，如牛乳、奶油、奶粉等。第四节脂类的测定第26页,共37页，2024年2月25日，星期天3、仪器：抽脂瓶：内径2.0-2.5cm，容积100mL。4、试剂：参见教材p64第四节脂类的测定第27页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定5、测定方法取一定量试样抽脂瓶氨水1.25ml再加入有溶剂提取脂肪回收溶剂、烘干、称重震摇2min,再加入10mL乙醇，冷水中冷却混匀，60℃水浴5min第28页,共37页，2024年2月25日，星期天6、结果计算第四节脂类的测定（m2-m1）x100%

脂肪含量(％)=────────WxV1/V

式中：m2——烧瓶和脂肪质量，g;

m1——烧瓶质量，g；

W——样品质量（g或毫升数*相对密度）；

V——读取醚层总体积，mL;V1——放出醚层体积，mL。

第29页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定1、原理：

乳脂肪以脂肪球状分散于乳中，脂肪球周围包着一层蛋白质膜。当加入一定浓度的硫酸后，可使蛋白质膜变成可溶性酪蛋白硫酸复合体和不溶性的硫酸钙而遭破坏，使液态脂肪游离出来。配合加热与离心作用，使乳脂肪聚合而上浮。（四）巴布科克法第30页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定巴氏法用17.6ml的专用乳吸管向乳脂瓶中加乳样。除去管壁上粘着的0.1ml乳，实际装入的乳样为17.5ml（即：1.032×17.5=18g）。乳脂瓶颈部有8个大格，其总容量为1.6ml，则每大格容积为0.2ml。乳脂肪在60℃时比重为0.9，故1大格乳脂肪的重量为0.18g，为乳样18g的1/100。所以只要测出上浮于颈部脂肪柱所占的格数，即为乳脂肪占乳量的百分比，即乳脂率。第31页,共37页，2024年2月25日，星期天2、仪器及试剂①巴氏乳脂瓶（见右图）;②乳吸管：容量为17.6ml;③量酸器：容量为17.6ml;④巴氏离心机;⑤硫酸：15℃密度为1.82～1.83;⑥温度计，水浴锅，蒸馏水等。第32页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定3操作方法再离心，取出置于55-60℃水浴，精确吸取17.6ml样品巴氏瓶硫酸

17.5ml离心80℃水浴，加80℃水，再离心重复水浴操作，至脂肪浮到2或3刻度处5分钟后，立即读数。第33页,共37页，2024年2月25日，星期天第四节脂类的测定4、结果计算：公式见教材p655、注意事项：

（1）取样前必须将乳样充分搅匀并在其中部吸取。（2）硫酸的浓度必须是在15℃时比重为1.82～1.83。浓度过高，反应后呈黑色，不易观察读数;过稀反应不完全，结果不准确。（3）脂肪柱内若有黑色塞层，表明加入硫酸的速度过快，或硫酸加入乳样后放置过久而未及时混合等。若有白色塞层，表明硫酸的浓度不够或酸量过少，或混合后冷却过度造成。发现有白色或黑色塞层，应重新测定。

第34页,共37页，2024年2月25日，星期天（4）加酸时要小心谨慎，以防洒在桌上、衣服或手上。硫酸瓶、量酸器和乳脂瓶用后必须放在磁盘内。

（5）离心时乳脂瓶应对称地放在离心机内。转速由慢而快。当达到规定速度时，应保持速度均匀。停止离心时，应逐