第1节微生物的培养需要适宜条件

第一章发酵工程1节微生物的培育需要适宜条件培育基为目标微生物供给适宜的生长环境——————————————自主梳理——————————————培育基的定义、成分及理化性质培育基的类型依据物理特征的不同可分为固体培育基和液体培育基两种根本类型，两者的区分在于前者因参加凝固剂而呈固体状态而后者为液体状态。( )的主要成分为水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，此外还需要满足微生物生长对pH等的要求。( )至中性偏酸培育霉菌时则需调至中性偏碱。( )培育异养型微生物时，培育基中需要参加无机碳。( )同样条件下，大肠杆菌在液体培育基和固体培育基中的生殖速度一样( )提示(1)√ (2)√× pH性偏酸。× 培育异养型微生物时，需要在培育基中参加有机物。× 同样条件下，大肠杆菌在液体培育基中的生殖速度快于在固体培育基中。——————————————素养提升————————————————培育基的成分与其用途之间的关系LB培育基的配方，分析答复：水酵母浸膏

来源 主要成分用动、植物蛋白制成的粉末状物 氮化合物，也含有一些质 维生素和糖类酵母细胞的水溶性提取物浓缩而 富含B族维生素，也含有机氮化成的膏状物质 合物和糖类等(1)依据培育基的物理特征，该培育基属于 培育基，理由是 。提示液体 基的配方中不含有凝固剂琼脂。(2)该培育基中蛋白胨的主要作用是什么？提示供给氮源、碳源和生长因子。(3)从碳源和氮源的角度，分析不同类型微生物所需的培育基成分的特点，选择自养型生物异养型生物碳源氮源 自养型生物异养型生物碳源氮源 提示① ④ ②③[典型例题](2023·永康一中高二月考)不同的微生物对养分物质的需求各不一样。以下有关一种以CO2为唯一碳源的自养型微生物养分的描述中，不正确的选项是( )B.碳源物质也是该微生物的能源物质无机盐是该微生物不行缺少的养分物质D.水是该微生物的养分要素之一答案B解析CO2为无机物，只能做碳源而不能作为能源物质。成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O(CH成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸馏水青霉素含量3g1g0.5g30g1000mL0.1万单位A.依据物理特征划分，该培育基属于液体培育基依据培育基的配方可知，该培育基培育的微生物的同化作用类型是异养型D.固体培育基中参加少量水即可形成液体培育基答案D解析液体培育基中参加凝固剂(如琼脂)可形成固体培育基，题表所示的培育基22碳源，因此其培育的微生物的同化作用类型是异养型，C正确。联想质疑★各种平板(2)病毒为非细胞构造生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培育。培育基通常都应包括哪些主要成分？提示水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等。为什么固体培育基外表的微生物生长速度比在液体培育基中慢？提示细胞与固体培育基的接触面积较小，细胞与环境间物质交换速度相对较慢。培育自养型微生物，通常需要供给无机碳源，如CO2、NaHCO3等；而培育异养型微生物，则需要供给有机碳源，如糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等。则通常培育的为异养型微生物。则通常为固体培育基。培育基的配制原则(1)目的要明确：不同微生物需求不同，依据微生物的种类、培育目的进展配制。(2)养分要协调：养分物质的浓度和比例要适宜。pH范围不同，可在培育基中添加缓冲剂pH稳定。酸盐。对异养型微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源和能源。(3)某些微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成作为生长因子的物质所需要的酶或合成力量有限。灭菌和无菌操作技术可以排解非目标微生物的干扰——————————————自主梳理——————————————高压蒸汽灭菌培育基的灭菌与分装接种及其无菌操作(活动)(1)20%马铃薯蔗糖培育基的配方1.5～2g100mL(pH)。(2)方法步骤类的细菌会在养分缺乏或代谢产物积存的环境中形成没有生殖功能的休眠构造，称为孢子。( )线可使菌体的蛋白质和核酸变性，有很强的杀菌作用。( )涂布器接种时，应当将涂布器在酒精灯的火焰上进展灼烧，然后马上进展涂布，以防止其他微生物进入。( )培育基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。( )要靠近酒精灯的火焰，利用燃烧产生的上升气流削减空气中微生物落入培育基的可能性。( )提示(1)×某些种类的细菌会在养分缺乏或代谢产物积存的环境中形成没有生殖功能的休眠构造，称为芽孢。(2)√(3)×在使用涂布器接种时，应将涂布器浸泡在75%的酒精中，接种前将外表残留着少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上灼烧，冷却后用于涂布。(4)√ (5)√[典型例题](2023·宁海中学高二月考)以下关于灭菌及无菌操作的表达错误的选项是( )121℃(1kg/cm2压力)15～20min的灭菌处理接种间、培育间应定期承受紫外线或药物熏蒸的方法进展消毒或灭菌烧灭菌倾倒答案D解析汽灭菌后再洗涤或倾倒，D项表达错误。[变式训练](2023·杭州七中高二期中)在微生物的培育试验中，对于培育容器、操作者的双手和接种环，应分别承受的灭菌处理为( )高压蒸汽、火焰灼烧、酒精答案D

紫外线、酒精、火焰灼烧解析D。联想质疑★化学消毒剂使用时要留意浓度★高压蒸汽灭菌锅★接种环的灼烧灭菌试验器具经高压蒸汽灭菌后，要准时取出，放入60～80℃的烘箱中烘干。其目的是什么？提示除去灭菌时高压蒸汽产生的水分以免金属器械锈蚀。尿素受热会分解，葡萄糖在115℃以上时会焦化，应如何进展灭菌？提示①121℃下灭菌的、孔径最小的G6玻璃砂漏斗对尿素、葡萄(112℃、500g/cm2)以及延长时间(30min)的高压灭菌方法灭菌。涤？提示导致洗涤人员致病，也会污染环境。用体积分数为70%的酒精消毒效果最好，缘由是浓度过高，菌体外表蛋白质凝固形成一层保护膜，酒精不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。芽孢是某些种类的细菌在养分缺乏或代谢产物积存的环境中形成的没有生殖照耀和化学药物都具有极强的抵抗力量。一般状况下，在微生物试验操作过程中，对培育基进展高压蒸汽灭菌，对接处理。思维导图 晨读必背在培育某种微生物时，防止其他微生污染的操作技术称为无菌技术。培育基的成分中应包含微生物生长所子等。细菌要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长。4.某些种类的细菌会在养分缺乏或代谢休眠构造，称为芽孢。5.使用高压灭菌锅灭菌时所需的温度、等构造的耐热性来确定的。随堂检测1.(2023·嘉兴一中高二月考)欲观看某种微生物的菌落特征应选择的培育基类型为( )A.液体培育基 B.固体培育基C.合成培育基答案B

自然培育基解析微生物在固体培育基外表生长会形成肉眼可见的菌落。2.(2023·衢州二中高二月考)防止杂菌入侵，获得纯洁的培育物，是争论和应用微生物的前提。以下表达正确的共有( )①接种间、培育间应定期承受用紫外线或药物熏蒸的方法进展灭菌或消毒②接种环等金属用具，直接在酒精灯火焰的明火上灼烧灭菌物感染④使用后的培育基丢弃前肯定要进展灭菌处理，以免污染环境一项C.三项答案D

两项3.(2023·东阳中学高二月考)关于微生物的养分，以下说法正确的选项是( A.同一种物质不行能既作碳源又作氮源但凡碳源都能供给能量除水以外的无机物仅供给无机盐微生物构建自身有机物所需要的碳元素可能来自无机物答案D2解析对一些微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源，A错误；CO2是光能自养型细菌的碳源，但不能供给能量，B错误；除水以外的无机物种类繁多、功能多样，如CO可作自养型生物的碳源，C错误；微生物构建自身有机物所需要的碳元素可能来自有机物，也可能来自无机物，D正确。2固体培育基与液体培育基的主要区分是( )是否含有水答案B

是否含有凝固剂解析否含有凝固剂，而非是否含有水。5.(2023·温州中学高二月考)以下关于固体培育基的表达，错误的选项是( A.液体培育基常用于大规模快速生殖某种微生物B.固体培育基外表的微生物生长速度比在液体培育基中快C.平板固体培育基常用于观看由单个细胞生长生殖成的菌落D.斜面固体培育基常用于菌种保存答案B解析较慢，培育基外表的微生物生长速度比在液体培育基中慢，B项表达错误。6.(2023·义乌中学高二月考)以下关于制备用于培育酵母菌的马铃薯蔗糖斜面培育基的表达，正确的选项是( )应将琼脂加热溶化后参加马铃薯浸汁中C.应在高压蒸汽灭菌后将斜面培育基摆成斜面D.1/2答案C解析应将琼脂参加马铃薯浸汁后再加热溶化，A管中再进展高压蒸汽灭菌，B错误；分装时，试管中培育液的量应约为试管长度1/4，D错误。课时作业(时间：30分钟)学问点1 培育基的配制能作为自养型微生物的碳源的是( )糖类 B.石油C.二氧化碳答案C

花生粉饼解析自养型微生物能利用无机碳源。以下关于培育基的说法，正确的选项是( )B.培育基只有两类：液体培育基和半固体培育基C.固体培育基中参加少量水即可制成液体培育基D.微生物在固体培育基上生长时，可以形成肉眼可见的菌落答案D解析为微生物的生长生殖供给养分基质的是培育基，A分可分为合成培育基和自然培育基等，按物理特征分为固体培育基和液体培育基，B错误；固体培育基中含凝固剂琼脂，参加少量水不行制成液体培育基，C错误。3.(2023·春晖中学高二月考)以下有关细菌培育的表达，正确的选项是( A.固体培育基不含水分pH调整到中性偏酸向液体培育基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D.有的物质既可作碳源也可作氮源，碳源并不都能供给能量答案D解析固体培育基中也含有水分，由于含有凝固剂，所以呈固态，A错误；培育细菌的培育基通常要将pH调整到中性偏碱，B错误；破伤风杆菌的代谢类型属碳源也可作氮源，如蛋白胨，碳源并不都能供给能量，如CO2等，D正确。4.(2023·效实中学高二月考)以下有关培育基成分及其特别要求的表达正确的选项是( )培育基中必需添加碳源培育基中必需添加维生素pH调到碱性答案CA错误；B错误；培育厌氧微生物需要供给无氧的条件，CpH调到中性偏酸，D错误。液常含有肯定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，缘由是( )碳源供给太充分葡萄糖不是酵母菌的原料D.细胞发生质壁分别答案D解析细胞发生质壁分别，D错误。适宜保存菌种的培育基为( A.液体培育基C.平板培育基答案B

B.斜面培育基解析斜面培育基常用于菌种的保存。学问点2 无菌技术7.(2023·金华一中高二月考)以下试验用品需要进展高压蒸汽灭菌的是( )答案D解析接种环和涂布器通常需要进展灼烧灭菌，A、B错误；酒精灯不需要进展灭菌，C错误；培育基和试管需要进展高压蒸汽灭菌，D正确。8.(2023·永嘉中学高二月考)以下关于无菌操作的表达，错误的选项是( A.接种环要在使用前进展灼烧灭菌C.接种时要靠近酒精灯的火焰以削减空气中的微生物落入培育基D.制作棉塞时应选用医用脱脂棉而不能选择一般棉花答案D解析后简洁引起污染，D错误。9.(2023·瑞安中学高二月考)金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，试验中以下做法错误的选项是( )对接种环进展灼烧处理C.带菌培育基必需经加热后才能倒掉D.操作者对双手进展酒精处理属于消毒答案C解析带菌培育基必需经高压蒸汽灭菌后才能倒掉，简洁的加热达不到灭菌效果，B正确，C错误。10.(2023·杭州东方进修学校高二月考)以下对尿素溶液进展灭菌的最适方法是( )高压蒸汽灭菌酒精浸泡灭菌答案D

D.过滤灭菌解析由于尿素受热会分解，对尿素溶液进展灭菌最好用过滤灭菌法，D正确。11.(2023·宁海中学月考)防止外来杂菌的入侵，获得纯洁的培育物，是争论和应用微生物的前提。以下表达错误的选项是( )试验室里可以用紫外线或化学药剂进展消毒接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌物感染玻璃器皿和金属用具等可以承受高压蒸汽灭菌答案B解析消毒法，A正确；灼烧灭菌应当在酒精灯火焰的外焰部位灼烧，B错误；试验室离开试验室时肯定要洗手，C具等可以承受高压蒸汽灭菌，灭菌后放入烘箱中烘干，D正确。12.(2023·长兴中学高二期中)人们利用微生物完成肯定的反响，必需要求某种微生操作错误的选项是()B.对接种间、超净台和培育间可承受紫外线灭菌C.培育基中需要参加尿素时，要单独用G6玻璃砂漏斗过滤除菌后添加到培育基中法灭菌答案D解析115℃)以及延长时间(30min)的高压蒸汽灭菌方法灭菌，D错误。13.(2023·温州中学高二月考)科学家欲培育酵母菌进展争论，下面是所使用的的20%马铃薯蔗糖培育基的配方：去皮马铃薯丝20g，蔗糖2g，琼脂1.5～2g，水100mL。请答复以下问题：酵母菌属于 (填“真核”或“原核”生物)，其代谢类型属于 (填“自养”或“异养”)型。从培育基的物理