DB54T 0327-2024 尖裸鲤规程规范

ICS65.15054CCSB5254西 藏 自 治 区 地 方 标 准DB54/T0327—2024尖裸鲤2024-04-09发布 2024-05-09实施西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0327DB54/T0327—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1主要形态结构特征 1外部形态特征 1内部结构特征 2生长与繁殖 3生长 3繁殖 4遗传学特性 5细胞遗传学特性 5生化遗传特征 5检测方法 6抽样 6性状测定 6年龄鉴定 6染色体检测 6血清乳酸脱氢酶（LDH）酶检测 6检验规则与结果判定 6附录A（资料性） 生长方程、体长与体重的关系 7体长和体重生长方程 7体长与体重关系式 7附录B（规范性） 同工酶试剂的配制 8凝胶制备 8加样指示剂 8电极缓冲液 8染色液的配制 8前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规起草。本文件由西藏自治区农业农村厅提出。本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会归口。本文件起草单位：西藏自治区畜牧总站、华中农业大学、四川律贝生物技术有限公司。本文件主要起草人：林少卿、霍斌、覃剑晖、石维彬、邵俭、谢从新、马徐发、杨君辉、程方方、DB54/T0327DB54/T0327—2024PAGEPAGE10尖裸鲤范围本文件给出了尖裸鲤（Oxygymnocyprisstewarti）的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性、检测方法和检验规则。本文件适用于尖裸鲤的种质检测。规范性引用文件（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.11GB/T18654.22GB/T18654.33GB/T18654.44GB/T18654.66部分：繁殖性能的测定GB/T18654.1212GB/T18654.1313术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1学名尖裸鲤（Oxygymnocyprisstewarti）。3.2地方名白鱼。3.3分类位置硬骨鱼纲（Osteichthyes）（Cypriniformes）（Cyprinidae）（Schizothoracinae），尖裸鲤属（Oxygymnocypris）。主要形态结构特征外部形态特征外形背、体侧具多数不规则斑点，腹部银白色。尖裸鲤外形特征见图1。图1 尖裸鲤外形图可数性状背鳍鳍式D.iii-7～8。臀鳍鳍式A.iii-5。第一鳃弓鳃耙数外侧鳃耙数：9枚～11枚；内侧鳃耙数：10枚～12枚。可量性状尖裸鲤的可量性状实测比例见表1。表1 尖裸鲤可量性状比例值比例性状平均值（范围）比例性状平均值（范围）体长/体高5.6（5.3~6.4）头长/吻长3.5（3.3~3.8）体长/头长3.8（3.5~4.0）头长/眼径7.1（4.9~8.4）体长/尾柄长7.0（6.5~7.7）头长/眼间距3.8（3.4~4.2）体长/尾柄高11.2（9.8~12.4）尾柄长/尾柄高1.9（1.6~2.1）4.2 内部结构特征鳔鳔分两室。后室长于前室。下咽齿下咽齿2行，3·4/4·3。下咽骨狭长，弧形，咽齿顶端沟曲状，咀嚼面凹陷。脊椎骨脊椎骨总数：50枚～52枚。腹膜腹膜为白色。生长与繁殖生长雌鱼最大年龄25龄，雄鱼最大年龄17龄。依据580尾样本估算不同年龄组的体长和体重实测值见表2。表2 尖裸鲤各年龄组的体长和体重实测值年龄雌性雄性体长(平均±S.D)mm体重(平均±S.D.)g体长(平均±S.D.)mm体重(平均±S.D)g211617.23171.6±14.665.2±20.3183.7±23.980.9±24.64234.6±23.1165.7±44.8244.4±16.0185.3±42.25273.4±25.4264.8±86.1275.2±16.7277.0±61.16319.6±30.0435.5±148296.9±23.1364.8±97.07341.5±33.1518.2±169.6313.2±25.2392.7±103.98378.9±62.1795.0±400.4353.9±24.8596.7±133.59425.8±36.0985.3±202.3351.1±21.1596.8±107.710449.6±46.71143.5±434.3352.3±14.5581.2±133.511429.0±30.31071.6±261.5374804.212436.4±41.71140.6±354.3350632.813432.4±38.11059.1±361.3368.5±4.9673.6±67.214444.3±34.21185.7±342.7417.7±10.2944.6±102.315467.2±42.81392.3±416.516470.0±34.81432.1±543.017517.0±39.01853.9±592.24551294.6184851601.319475.5±44.51393.6±572.720538.4±29.22191.8±432.821549.0±14.12388.6±676.622549.5±17.72437.1±750.92324516±28.31835.2±349.4255021348.4生长方程和体长与体重关系式参照附录A。繁殖性成熟年龄雌鱼为7龄，雄鱼为5龄。产类类型性腺一年成熟一次，一次性产出。繁殖期繁殖季节为3月～5月。怀卵量依据60尾样本估算不同年龄组怀卵量，具体数据见表3。表3 尖裸鲤不同年龄组怀卵量年龄组龄体重范围g绝对怀卵量（均值±标准差）粒相对怀卵量（均值±标准差）粒/克6866.9~962.627924.4±4498.730.4±2.77555.2~1093.427468.7±23266.230.0±14.481467.0~1503.081727.6±6304.627.5±3.89908.0~1336.028099.1±7047.925.6±5.110933.3~1342.037070.0±10984.729.4±4.811855.2~1590.328688.0±19522.223.2±7.8121024.9~1971.034415.0±9208.426.2±2.513874.1~2155.136405.0±10858.127.5±6.214797.6~1835.429609.0±8430.723.7±3.6151117.7~2108.341290.0±17128.022.9±3.1161562.5~2057.137162.0±13997.520.2±3.8171751.0~2490.943623.0±6054.721.6±8.2181601.34715329.4191798.551673.028.7201925.8~1967.543453.0±10939.922.3±5.3222968.156907.019.2遗传学特性细胞遗传学特性染色体数：2n=92，核型公式：26m+30sm+10st+26t，臂数NF：148。染色体核型见图2。图2 尖裸鲤染色体核型图生化遗传特征血液乳酸脱氢酶（LDH）同工酶酶带扫描图见图3。图3 尖裸鲤血液组织乳酸脱氢酶酶带扫描图检测方法抽样按GB/T18654.2的规定执行。性状测定按GB/T18654.3的规定执行。年龄鉴定采用耳石鉴定年龄。方法按GB/T18654.4的规定执行。染色体检测按GB/T18654.12的规定执行。血清乳酸脱氢酶（LDH）酶检测试剂及配制方法同工酶各种试剂的配置见附录A。样品的采集与制备血清制备，从尾静脉抽取2ml血，于4℃、1000r/min离心6min，取上清备用。制胶先将混匀的6.5%分离胶液倒入模板约3/436℃左右30min胶聚合好以后，倒掉上面的水，将混匀的3.0%浓缩胶倒入模板，插好梳子，置于36℃左右30min胶聚合好以后，置于冰箱中备用。点样点样量为20μL。吸取20μL样与2μL～3μL加样指示剂混匀，一起加到样孔中。电泳分离采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳。分离胶浓度6.5%，浓缩胶浓度3.0%。电极缓冲液：pH为8.3的Tris-甘氨酸。280V（起始电流约电泳0.5h5h～6h（酚蓝跑出胶后2h以上）。染色：电泳结束后，放入预先配好并在37℃恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。检验规则与结果判定按GB/T18654.1的规定执行。附录 A（资料性）生长方程、体长与体重的关系体长和体重生长方程雌性和雄性群体的体长和体重生长方程分别见式（A.1）、（A.2）、（A.3）和（A.4）：雌性：Lt=618.2[1-e-0.106(t-0.315)] （A.1）Wt=3065.9[1-e-0.106(t-0.315)]3.126 （A.2）雄性：Lt=526.8[1-e-0.141(t-0.491)] （A.3）Wt=1868.4[1-e-0.141(t-0.491)]3.052 （A.4）式中：Lt－tWt－t龄时鱼体体重，g；e－自然对数；t－鱼的年龄。体长与体重关系式雌性和雄性群体的体长与体重关系式见（A.5）和（A.6）：雌性：W=6.108×10-6L3.126 （A.5）雄性：W=9.872×10-6L3.052 （A.6）式中：W－鱼体体重，g；L－鱼体体长，mm附录 B（规范性）同工酶试剂的配制凝胶制备凝胶制备溶液配制各种凝胶制备溶液的配方及配制方法见表B.1。表B.1各种凝胶制备溶液配方溶 液配 制 方 法凝胶缓冲液Tris56.75g200mLpH8.9250mL。4℃贮存。凝胶储液取丙烯酰胺33.3g，N，N′—亚甲基双丙烯酰胺0.9g，四甲基乙二胺（TEMED）338μL溶于蒸馏水中定容到150mL。4℃贮存。AP取过硫酸铵1.5mg溶解到100mL蒸馏水水中。4℃贮存。分离胶和浓缩胶的制备用6.5%分离胶和3.0%浓缩胶制成聚丙烯酰胺垂直板凝胶，该凝胶液配方见表B.2。表B.2凝胶制备配方6.5 %分离胶3.0 ％浓缩胶凝胶缓冲液,mL1.5凝胶缓冲液，mL0.5凝胶储液，mL7.3凝胶储液，mL1.2AP,mL1.5AP,mL0.5TEMED，μL－TEMED,μL4.0纯水，mL14.7纯水，mL6.8总体积，mL25总体积，mL9.0加样指示剂0.15％溴酚蓝-50％甘油：称取0.15g溴酚蓝溶于50mL蒸馏水，再加50mL甘油混匀。电极缓冲液取甘氨酸28.80g溶于800mL水，用约4.00g的Tris调pH至8.3，加蒸馏水到1000m