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菌落总数的检验程序前言Introduction菌落总数：是指食品检样经过处理，在一定条件下(如培养基、培养温度和时间)培养后，所得1g或1mL检样中形成的微生物菌落总数。以CFU/g（mL）来表示。检测方法：GB4789.2-2016

菌落总数的检验程序图检样：25g（ml）样品加入225ml稀释液，均质10倍系列稀释选择2~3个适宜样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养平皿内每皿内加入适量（15-20ml）培养基(PCA)，混匀，培养菌落计数36±１℃48±2h报告检验程序样品的处理浓度的稀释培养计数培养基倾注1

样品的稀释：1.1

固体和半固体样品：称取25g（mL）样品至盛有225mL磷酸盐缓冲稀释液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2min，或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。如样品ph值较低，建议使用磷酸盐缓冲液，以免影响培养基的凝胶强度。

1.2液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL磷酸盐缓冲稀释液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。2样品稀释：

用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或磷酸盐缓冲液的试管内（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使之混合均匀，制成1:100的稀释液。

按上述操作制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或吸头。。3

培养基倾注：

根据标准要求或对污染情况的估计，选择2～3个适宜稀释度（液体样品可包括原液），分别在制作10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。

同时分别取1ml空白稀释液（不含样品），加入两个灭菌平皿内作空白对照

稀释液移入平皿后，及时将冷却至46℃平板计数琼脂培养基注入平皿约15～20ml，并转动平皿，使其混合均匀。4

培养计数：

琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。

如样品中可能含有

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