细菌内毒素分析仪校准规范

本规范适用于细菌内毒素分析仪(动态浊度法)的校准。2引用文件本规范引用了下列文件；《中华人民共和国药典》凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本规范。3术语和计量单位3.1细菌内毒素单位EUendotoxinunit细菌内毒素的活性单位，1EU与1个内毒素国际单位(IU)相当。[《中华人民共和国药典》]3.2反应时间一致性RTCreactiontimeconsistence仪器检测不同通道中鲨试剂与细菌内毒素标准物质反应后光密度达到某一预先设定值所需要反应时间的一致程度，用相对标准偏差表示。细菌内毒素分析仅(以下简称仪器)是通过动态浊度法检测鲨试剂与细菌内毒素反应过程中的光密度(浊度)变化来测定细菌内毒素含量的装置。反应时间或浊度增加速度与细菌内毒素的浓度存在一定的关系，绘制内毒素工作标准溶液的反应时间或浊度增加速度-内毒素浓度的单对数或双对数曲线，可以实现动态浊度法对样品中的细菌内毒素浓度的定量。仪器主要由光源、恒温加热器、样品孔、检测器、显示与存储系统(含控制软件)等组成。光信号通过光电传感器转化为电信号，再通过电子电路转化为数字信号，最后控制软件计算达到某一预先设定的光密度所需要的反应时间或浊度增加速度。仪器据检测波长分类，可分为单波长、双波长。5计量特性5.1透光度一致性5.2零点漂移5.3温度示值误差5.4温度波动度5.5孔间温度差异2相对湿度：≤80%。6.2.1数字温度计：采用热电偶测温探头，探头长度不超过20mm,最大允许误差为±0.2℃,测量范围满足(20.0~50.0)℃。6.2.2细菌内毒素分析仪校准用国家有证标准物质，20EU/支，相对扩展不确定度6.2.3定量鲨试剂(检测限0.03EU/mL)。6.2.5移液器：(20～200)μL,(100～1000》pL各1支，经检定合格。按照式(1)计算透光度一致性RSD,——透光度一致性(相对标准偏差),%;装有0.4mL内毒素检查用水的反应管放于任一孔。封口膜封口。测定仪器的基线按照式(2)计算零点漂移值：OD₄=OD--OD₉5标准物质溶液及鲨试剂溶液的配制A.1试剂与材料A.1.1细菌内毒素分析仪校准用国家有证标准物质，20EU/支。A.1.2定量鲨试剂(检测限0.03EU/mL)。A.1.3维菌内毒素检查用水。A.1.4无内毒素安瓿瓶，5mL/支。A.1.5无内毒素安瓿瓶，2mL/支。A.1.6一次性无内毒素吸头，1000pL。A.1.7一次性无内毒素吸头，200pL。A.2.1移液器：经检定合格，(20~200)pL.,(100~1000)pL。A.2.2涡旋混合器。A.3细菌内毒素标准溶液的配制取20EU/支的细菌内毒素分析仪校准用国家有证标准物质一支。轻弹瓶壁。使粉末落入瓶底，使反应管颈处的开口小气泡朝上，用力解断，启开过程中应防止玻璃屑落入瓶内。①加入1.0ml.细菌内毒素检查用水溶解，涡旋震荡15min,得20EU/ml.溶液；②取第①步溶液0.2mL,加入到1.8ml.细菌内毒素检查用水中，在涡旋混合器上混合30s,得2EU/mL溶液：③取第②步溶液0.3mL。加入到2.1mL细菌内毒素检查用水中，在涡旋混合器上混合30s,得0.25EU/mL.溶液。4℃保存备用，有效期1周。A.4鲨试剂溶液的配制取定量鲨试剂2支(检测限0.03EU/mL),轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，使反应管颈处的开口小气泡朝上，用力解断，启开过程中应防止玻璃屑落入瓶内。每支加入0.6mL.细菌内毒素检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使内容物充分溶解，不要太剧烈，避免产生气泡，充分溶解后将量试剂溶液混和在一起，然后分装到2mL无细菌内毒素的空反应管中，分装10管备用。不立即使用时用封口膜封住瓶口。已复溶的鲨试剂在间歌使用过程中最好将其在-20℃以下冻存，仅可在7天内使用，鲨试剂只能冻融一次。温度示值误差测量结果的不确定度评定示例(1)测量重复性引入的不确定度。(2)数字温度计引入的不确定度。12345w(△T)=√²(T₂)+u;²(T,J-0.062t 7校准原始记录格式(推荐性表格)送校单位；仪器名称；制造厂：型号：出厂编号：委托单号：校准地点；证书编号：环境温度；c