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四川省会理县第一中学高三考前热身新高考生物试卷注意事项:1.答卷前,考生务必将自己的姓名、准考证号、考场号和座位号填写在试题卷和答题卡上。用2B铅笔将试卷类型(B)填涂在答题卡相应位置上。将条形码粘贴在答题卡右上角"条形码粘贴处"。2.作答选择题时,选出每小题答案后,用2B铅笔把答题卡上对应题目选项的答案信息点涂黑;如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案。答案不能答在试题卷上。3.非选择题必须用黑色字迹的钢笔或签字笔作答,答案必须写在答题卡各题目指定区域内相应位置上;如需改动,先划掉原来的答案,然后再写上新答案;不准使用铅笔和涂改液。不按以上要求作答无效。4.考生必须保证答题卡的整洁。考试结束后,请将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1.种子萌发的过程中,赤霉素诱导胚乳的糊粉层中会大量合成α-淀粉酶,此过程会受到脱落酸的抑制。下列相关叙述正确的是()A.赤霉素能够催化胚乳中淀粉的水解B.脱落酸可以降低a-淀粉酶的活性C.赤霉素可以影响细胞内的基因表达D.种子的萌发受到赤霉素和脱落酸的协同调节2.下列关于细胞中基因表达的叙述,错误的()A.转录时,RNA聚合酶与DNA上的起始密码相结合B.基因表达的产物内部可能存在碱基互补配对的部分C.合成多肽的过程需要mRNA、tRNA和rRNA参与D.一DNA分子转录一次,可形成一个或多个合成多肽链的模板3.绿脓杆菌利用一种独特的分泌系统——6型分泌系统,将有毒的蛋白传递给竞争细菌;随后,有毒蛋白开始分解对手中名为肽聚糖的结构蛋白;最终,竞争细菌的防御性细胞壁出现崩溃,从而被绿脓杆菌所击败。下列叙述正确的是()A.通常情况下,T2噬菌体不会寄生在绿脓杆菌体内B.绿脓杆菌的DNA分子中碱基对的增添、缺失或替换一定引发基因突变C.有毒蛋白基因在转录时,RNA聚合酶的结合位点在RNA上D.有毒蛋白属于分泌蛋白,是由附着于内质网上的核糖体合成4.下列关于细胞内蛋白质与核酸的叙述,错误的是()A.有的蛋白质具有催化功能,有的核酸也具有催化功能B.含有蛋白质和核酸的结构,有的可作为遗传物质的载体,有的具有合成蛋白质的功能C.蛋白质和核酸的合成都需要搬运各自组成单位的工具D.分化程度不同的细胞内核酸和蛋白质的种类均有差异5.生物兴趣小组的同学对某品种番茄的花进行人工去雄后,用不同浓度的生长素类似物2,4-D涂抹子房,得到的无籽番茄果实平均重量见下表。下列分析正确的是()2,4-D浓度(mg/L)0510152025635无籽番茄平均重量(g/个)01.52.53.54.54.75.06.2A.表中2,4-D浓度超过25mg/L,对果实发育起抑制作用B.人工去雄后番茄花用一定浓度生长素类似物处理,将发育成无籽果实C.浓度为35mg/L的2,4-D仍然可以诱导无籽番茄果实,因此2,4-D不具有两重性D.将该实验获得的无籽番茄果肉细胞进行组织培养,获得的植株在自然状态下也能产生无籽番茄6.图甲为某生物(2n=4)正常的细胞分裂图,图乙为该生物细胞分裂某些时期染色体组数的变化曲线,其中①③为同源染色体,②④分别为X、Y染色体,A、a是染色体上的基因。下列有关叙述错误的是()A.处于图甲所示分裂时期的细胞中含有8个核DNAB.图乙c段时期的细胞可形成四分体和发生基因重组C.图甲细胞中A基因的碱基数量大于a基因的碱基数量D.②④染色体上的基因遗传总是和性别相关联二、综合题:本大题共4小题7.(9分)缺乏腺苷酸脱氨酶(ada)基因的人体,不能够抵抗任何微生物的感染,只能生活在无菌环境。科学家对患者的基因治疗过程如图,使患者的免疫功能得到了很好的修复。(1)若病毒a侵染人体细胞,引起人体发生相应的免疫反应是_______。(2)从分子水平上来看,病毒b与病毒a的根本变化在于________。(3)为保障治疗的安全性,科学家已将病毒a基因组RNA上编码病毒球壳的蛋白基因一律删除掉(基因编辑),以降低病毒的潜在风险。这种潜在的风险是指________。(4)如图治疗过程中,利用基因编辑技术对T淋巴细胞进行改造和修饰,然后再重新注入人体,会不会造成人类基因污染?______。8.(10分)已知只有一条X染色体的果蝇为雄性,而性染色体组成为XXY的果蝇为雌性,果蝇的红眼(E)对粉色眼(e)为显性。现准备纯种红眼和粉色眼雌、雄果蝇各若干只,将红眼雌果蝇与粉色眼雄果蝇杂交,F1全为红眼,F1自由交配得F2,F2中红眼雌果蝇:红眼雄果蝇:粉色眼雄果蝇=2:1:1。分析实验现象,回答下列问题:(1)该对相对性状的遗传所遵循的遗传定律的细胞学基础是________________________。(2)实验发现F2中出现了一只粉色眼雌果蝇,为探究该果蝇出现的原因,研究者取该果蝇体细胞制作了临时装片,在光学显微镜下观察处于________期的细胞,发现其变异类型属于染色体变异,则其性染色体组成应为________,该果蝇出现的最可能的原因是_______________________。(3)为探究控制E、e这对相对性状的基因是否位于ⅹ、Y染色体的同源区段,研究者将纯种红眼雄果蝇与正常的粉色眼雌果蝇进行杂交:①若F1___________________________,则这对等位基因位于X、Y染色体的非同源区段;②若F1______________________,则这对等位基因位于X、Y染色体的同源区段,若让F1所有个体自由交配得F2,F2所有个体自由交配得F3,则F3的性状及分离比为____________________________,雌果蝇中e的基因频率为___________。9.(10分)某实验小组对微生物的培养和五种香辛料萃取提取的精油(编号为A、B、C、D、E)抑菌能力进行了研究。首先制备了直径为8mm的圆滤纸片若干,灭菌后分别放入各组精油中浸泡2h。然后取各种待测菌悬液各1.1mL分别在相应的固体培养基上均匀涂布,制成含菌平板。再取浸泡过精油的滤纸片贴在含菌平板上,每个培养皿贴浸过同一种精油的滤纸3片。放培养箱中培养一定时间,测定抑菌圈直径,结果取三次重复实验的平均值,其数据如下表所示:精油种类抑菌圈直径(mm)菌种ABCDE大肠杆菌2.13.14.15.16.2白葡萄球菌7.78.19.110.111.1酵母菌5.612.13.15.513.6青霉14.315.25.314.116.8(1)培养不同的微生物所需的pH和温度往往不同,在培养霉菌时需要将培养基的pH值调至______________(填“酸性”、“碱性”、“中性或微碱性”)。培养细菌的温度一般______________(填“低于”或“高于”)培养霉菌的温度。(2)萃取精油时蒸馏过程中需要控制蒸馏的温度和时间,原因是______________。(3)本实验中采用了______________操作接种。结果可见不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同,C和E对细菌的杀伤作用______________(填“大于”或“小于”)对真菌的杀伤作用。(4)若用固定化酶技术固定酵母菌中的酶,和一般酶制剂相比,其优点是______________。固定化酵母细胞常用______________法固定化。(5)有同学认为缺少关于五种精油是否抗病毒的实验结果,提出在营养琼脂培养基上接种常见的病毒进行实验。你认为可以吗?为什么?________________________________________________________。10.(10分)回答下列(一)、(二)小题:(一)开发山楂果醋恰好让山楂中的有机酸丰富了果醋的酸味,同时也弥补生食山楂酸味大的缺陷,具体酿制山楂果醋分为以下三个阶段,请将具体过程补充完整。(1)制备山楂果原汁:选成熟的山楂果,在清水冲洗山楂果_______(填“之前”或“之后”)去梗。将山楂果切片并去籽,再添加_______,酶解适宜时间后压榨取果汁。(2)乙醇发酵:由于山楂果原汁_______,故发酵液中添加适量蔗糖,以获得酒精含量较高的果酒。果汁中加入活化的________后,在适宜环境下发酵一段时间,当发酵液中停止_______,发酵完毕待过滤,或发酵至_______,上清液即为果酒,用虹吸法取出。(3)醋酸发酵:将醋化醋杆菌进行扩大培养后,经检查菌体生长正常并无杂菌污染后接种于山楂酒-水中进行发酵,整个发酵过程需要通入_______。在发酵后期加入1.3~1.4%的食盐,其目的是调味和_______,以防止果醋被发酵分解。(二)下图为转基因抗虫烟草的培育流程,①②③④表示过程,其中②表示利用农杆菌转入受体细胞。回答下列相关问题:(1)在①过程构建重组质粒时,若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段,使两者形成粘性末端用于拼接,这种方法的明显缺点是目的基因和质粒________(答出2点即可)。另外,影响拼接效率的主要因素,除以上缺点和盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素外,还有_______(答出2点即可)。(2)在②过程中,将图示重组Ti质粒导入农杆菌时可用______处理农杆菌,以提高转化效率。操作之后,需要特定的培养基对农杆菌进行筛选,其原因是_______,最终筛选到的对象在相应选择培养基上的存活情况是________。(3)在③过程常通过调节_______的适当配比,从愈伤组织诱导出芽和根的_____,并由此再生出新植株。获得转基因烟草后,再通过[④]_______过程实现多个世代组织培养。11.(15分)新型冠状病毒是一种RNA病毒,会导致人患严重的肺炎。2019年末新型冠状病毒肆虐,全国上下齐心协力一致抗疫。2020年2月15日,官方宣布新型冠状病毒疫苗的研发取得了新进展,已完成了基因序列合成,正在进行重组质粒构建和工程菌筛选工作。请联系基因工程的相关知识,回答下列问题:(1)基因工程的四个基本操作步骤是获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和______________________。(2)新型冠状病毒通过其表面的S一蛋白与宿主表面ACE2蛋白结合完成感染,在研制疫苗时需要获取病毒的目的基因是______________________,方法是____________________,然后利用___________技术扩增。(3)腺病毒是一种DNA病毒,编码数十个腺病毒的结构和功能蛋白,其中E1区蛋白与腺病毒的复制有关而且对宿主细胞的毒性很强。研究中将E1基因缺失的腺病毒作为运载目的基因的载体,改造后的腺病毒应该具备的特点有:______________________(至少答出两点)。目的基因与腺病毒构建重组腺病毒载体必须包括:新型冠状病毒基因、______________________(至少答出两点)等。(4)重组腺病毒载体侵染宿主细胞后,利用宿主细胞翻译出____________________,引发机体免疫反应,产生可用于治疗的抗体。在转录过程中,识别其启动子的酶是___________。A.病毒的DNA聚合酶B.宿主的DNA聚合酶C.病毒的RNA聚合酶D.宿主的RNA聚合酶
参考答案一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1、C【解析】
五类植物激素的比较:名称合成部位存在较多的部位功能生长素幼嫩的芽、叶、发育中的种子集中在生长旺盛的部位既能促进生长,也能抑制生长;既能促进发芽,也能抑制发芽;既能防止落花落果,也能疏花蔬果赤霉素未成熟的种子、幼根和幼芽普遍存在于植物体内①促进细胞伸长,从而引起植株增高②促进种子萌发和果实发育细胞分裂素主要是根尖细胞分裂的部位促进细胞分裂脱落酸根冠、萎蔫的叶片将要脱落的器官和组织中①抑制细胞分裂②促进叶和果实的衰老和脱落乙烯植物的各个部位成熟的果实中较多促进果实成熟【详解】A、根据题意可知,在赤霉素的诱导下,胚乳的糊粉层中会大量合成α-淀粉酶,从而促进胚乳中淀粉的水解,A错误;B、赤霉素诱导胚乳的糊粉层中会大量合成α-淀粉酶,该过程被脱落酸抑制,不是脱落酸降低α-淀粉酶的活性,B错误;C、赤霉素诱导胚乳的糊粉层中会大量合成α-淀粉酶,而α-淀粉酶的合成受基因控制,因此赤霉素可以影响细胞内的基因表达,C正确;D、赤霉素促进种子萌发,脱落酸抑制种子萌发,这两种激素的作用具有拮抗关系,D错误。故选C。【点睛】本题考查植物激素及其植物生长调节剂的应用价值,要求考生识记五大类植物激素的生理功能,掌握植物生长调节剂的应用,能运用所学的知识准确判断各选项。2、A【解析】
基因的表达包括转录和翻译两个过程,转录是以DNA的一条链为模板合成mRNA分子的过程,主要发生在细胞核中,以核糖核苷酸为原料;翻译是以mRNA为模板,以氨基酸为原料模板合成蛋白质的过程,发生在核糖体上。【详解】A、起始密码在mRNA上,不在DNA上,转录时,RNA聚合酶与DNA上的启动子相结合,A错误;B、基因的表达包括转录和翻译两个过程,其中转录的产物中的tRNA分子的内部存在部分碱基互补配对现象,B正确;C、合成多肽的过程需要mRNA作为模板、tRNA运输氨基酸、核糖体作为场所,而rRNA是核糖体的组成成分,C正确;D、一个DNA分子转录一次,可形成一个或多个合成多肽链的模板,D正确。故选A。3、A【解析】
基因突变:DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失,而引起的基因结构改变。转录是以DNA一条链为模板,以游离的核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶的催化作用下合成RNA的过程。【详解】A、T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌体内的病毒,A正确;B、基因是有遗传效应的DNA片段,绿脓杆菌的DNA分子中碱基对的增添、缺失或替换如发生在非遗传效应的DNA片段中,就不会引发基因突变,B错误;C、有毒蛋白基因在转录时,RNA聚合酶的结合位点在DNA上,C错误;D、绿脓杆菌没有复杂的细胞器,只有分散的核糖体,D错误。故选A。4、C【解析】
1、酶的化学本质:绝大多数是蛋白质,少数是RNA。2、细胞质中能转运氨基酸的物质是tRNA。3、细胞中含有蛋白质和核酸的结构有:核糖体、染色体、线粒体、叶绿体等。4、细胞在分裂分化过程中遗传物质保持不变,但在分化过程中基因进行选择性表达,因此不同种类的细胞中蛋白质的种类和数量不同。【详解】A、酶在细胞代谢中起催化作用,大多数酶是蛋白质,少数是RNA,A正确;B、含有蛋白质和核酸的结构,如染色体可作为遗传物质的载体,核糖体是蛋白质的合成场所,B正确;C、构成蛋白质的基本单位是氨基酸,蛋白质的合成过程中转运氨基酸是tRNA,其基本单位是核糖核苷酸,核酸的合成不需要搬运的工具,C错误;D、细胞分化的实质是基因的选择性表达,分化程度不同的细胞核DNA相同,分化的细胞RNA和蛋白质的种类均有差异,D正确。故选C。【点睛】本题考查细胞中的元素和化合物的知识,考生识记细胞中蛋白质和核酸的结构和功能,明确细胞分化的概念和实质是解题的关键。5、B【解析】
分析表格:生长素及其类似物(2,4-D)能促进果实的发育,用一定浓度的生长素涂抹未受粉的子房,可以获得无籽果实。表中数据显示不同浓度2,4-D对番茄子房发育的影响,2,4-D浓度在0~25mg/L时,随着2,4-D浓度的升高,促进作用增强;2,4-D浓度超过25mg/L时,随着2,4-D浓度的升高,促进作用逐渐减弱。【详解】A、2,4-D浓度为0的一组作为对照组,与对照组相比,其他各组均能促进果实生长,所以2,4-D浓度超过25mg/L时,对果实发育仍是促进作用,只是促进作用减弱,A错误;B、2,4-D能促进果实的发育,用一定浓度的生长素涂抹未受粉的子房,可以获得无籽果实,B正确;C、浓度为35mg/L的2,4-D仍然可以诱导无籽番茄果实,但不能说明2,4-D不具有两重性,C错误;D、将该实验获得的无籽番茄果肉细胞进行组织培养,获得的植株在自然状态下产生有籽番茄,D错误。故选B。【点睛】解答本题需明确:1.2,4-D的两重性是指高浓度抑制、低浓度促进,而表格中与对照组相比,所有2,4-D浓度下都是促进作用。2.用2,4-D处理的植株遗传物质没变,因此经组织培养获得的植株在自然状态下产生的是有籽番茄。6、C【解析】
图甲有同源染色体,且染色体的着丝点分裂,姐妹染色单体变成子染色体向两极运动,因此图甲是有丝分裂后期。图甲A、a是基因突变形成的等位基因,基因突变包括碱基对的替换、缺失和增添。图乙a、b段表示有丝分裂,c段表示减数第一次分裂,d段表示减数第二次分裂。【详解】A、图甲为有丝分裂后期,染色体数和DNA数为体细胞的两倍,因此有8个核DNA,A正确;B、c段为减数第一次分裂,减数第一次分裂前期形成四分体,非姐妹染色单体交叉互换属于基因重组;减数第一次分裂后期,非同源染色体上的非等位基因自由组合也属于基因重组,B正确;C、A、a是基因突变形成的等位基因,DNA上的碱基对替换、缺失等使基因结构改变,A基因碱基和a基因的数目可能相同可能不同,C错误;D、②④分别为X、Y染色体,性染色体上基因都是伴性遗传,D正确。故选C。【点睛】本题主要考查有丝分裂和减数分裂的过程变化、基因重组、基因突变和伴性遗传。答题的关键在于根据细胞分裂图和染色体组的数目变化判断细胞所处分裂时期,并将基因突变和伴性遗传等有关知识综合运用,把握知识内在联系。二、综合题:本大题共4小题7、细胞免疫具有人体正常ada基因降低病毒侵染细胞的能力,从而减少病毒在宿主细胞中的增殖不会。利用病毒改造和修饰的是T淋巴细胞,不会通过生殖细胞而遗传给后代【解析】
基因治疗:把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。过程①表示获取目的基因,然后将目的基因与病毒a相合形成病毒b,由此可看出运载体是病毒a,基因表达载体是病毒b,目的基因是腺苷酸脱氨酶(ada)基因;过程②表示将目的基因导入受体细胞(T淋巴细胞),常用显微注射法。过程③表示细胞的分离培养和细胞分化。【详解】(1)从图中分析可知,若病毒a侵染人体细胞,人体主要是通过T淋巴细胞对病毒a起免疫作用,因此属于细胞免疫;(2)从分子水平上可以看出病毒b与病毒a的不同地方是病毒b具有人体正常ada基因;(3)为保障治疗的安全性,科学家已将病毒a基因组RNA上编码病毒球壳的蛋白基因一律删除掉(基因编辑),以减少病毒的感染细胞能力,达到降低病毒在宿主细胞中的自我繁殖和侵入其他细胞能力;(4)如图治疗过程中,利用基因编辑技术对T淋巴细胞进行改造和修饰,然后再重新注入人体,不会造成人类基因污染,因为改造和修饰的是成体免疫细胞,不会通过生殖细胞而遗传给后代。【点睛】本题考查基因工程和免疫调节的相关知识,要求考生识记基因工程和免疫调节的知识,掌握基因工程的原理及操作步骤,了解基因工程的相关应用,尤其是基因治疗的相关知识,能从材料中获取相关的生物学信息,并能运用这些信息结合所学的知识解决相关的生物学问题。8、减数第一次分裂后期,等位基因随着同源染色体的分开而分离有丝分裂中XXYF1中雌果蝇减数第二次分裂后期姐妹染色单体未分离雄性全为粉色眼,雌性全为红眼全为红眼红眼雌果蝇:粉色眼雌果蝇:红眼雄果蝇=5:3:85/8【解析】
题意显示,将红眼雌果蝇与粉色眼雄果蝇杂交,F1全为红眼,说明红眼对粉色眼为显性,F1自由交配得F2,F2中红眼雌果蝇:红眼雄果蝇:粉色眼雄果蝇=2:1:1,显然子二代中的性状表现与性别有关,据此可知相关基因位于X染色体上,亲本基因型为XEXE、XeY,F1基因型为XEXe、XEY;F2基因型为XEXE、XEXe、XEY、XeY。【详解】(1)该对相对性状的是由一对等位基因控制的,因此该性状的遗传符合基因分离定律,该定律的细胞学基础是减数第一次分裂后期,等位基因随着同源染色体的分开而分离。(2)有丝分裂中期是观察染色体形态和数目的最佳时期,因此研究者应该选取处于有丝分裂中期的细胞进行观察,发现其变异类型属于染色体变异,则其性染色体组成应为XXY,由于F1的基因型为XEXe、XEY,因此该果蝇出现的最可能的原因是F1中雌果蝇减数第二次分裂后期姐妹染色单体未分离,产生了基因型为XeXe类型的卵细胞,然后与正常的精子完成受精发育形成的。(3)①若控制这对相对性状的基因E、e位于X、Y染色体的非同源区段,则亲本基因型为XeXe、、XEY,F1雄性全为粉色眼,雌性全为红眼;②若控制这对相对性状的基因E、e位于X、Y染色体的同源区段,则亲本基因型为XeXe、、XEYE,F1的基因型为XEXe、XeYE,即F1无论雌、雄全为红眼,若让F1所有个体自由交配得F2,F2的基因型为XEXe、XeXe、XEYE、XeYE,该群体中卵细胞的种类及比例为XE∶Xe=1∶3,精子的种类与比例为XE∶Xe∶YE=1∶1∶2,列出棋盘可得出F3,则F3的性状及分离比为红眼雌果蝇:粉色眼雌果蝇:红眼雄果蝇=5:3:8,其中雌果蝇的基因型及比例为XEXE∶XEXe∶XeXe=1∶4∶3,可算出该雌蝇e的基因频率为10/16=5/8。【点睛】熟知伴性遗传的类型及其各自的特点是判断基因位置的法宝,会用分离定律解答实际计算的问题是解答本题的另一关键!9、酸性高于如果蒸馏温度太高,时间太短,产品品质就比较差稀释涂布平板小于利于产物的纯化,同时固定在载体上的酶还可以被反复利用包埋不可以,病毒为寄生生物,在该培养基上不能生长【解析】
各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。细菌一般在31~37℃的温度下培养l~2d,放线菌一般在14~28℃的温度下培养5~7d,霉菌一般在14~28℃的温度下培养3~4d。【详解】(1)根据上述分析可知,在培养霉菌时需要将培养基的PH值调至酸性。培养细菌的温度一般高于培养霉菌的温度。(2)如果蒸馏温度太高,时间太短,产品品质就比较差,所以萃取精油时蒸馏过程中需要控制蒸馏的温度和时间。(3)本实验中是将各种待测菌悬液各1.1mL分别在相应的固体培养基上均匀涂布,即采用了稀释涂布平板法接种。表格中不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同,大肠杆菌和白葡萄球菌为细菌,酵母菌和青霉为真菌,C和E对细菌产生的抑菌圈小于真菌的抑菌圈,说明C和E对细菌的杀伤作用小于对真菌的杀伤作用。(4)固定化酶技术固定酵母菌中的酶,和一般酶制剂相比,其优点是可重复利用,且利于产物的纯化。由于细胞个体大,不易被吸附和结合,所以固定化酵母细胞常用包埋法固定化。(5)由于病毒为寄生生物,不能独立代谢,在该培养基上不能生长,所以不能在琼脂培养基上接种常见的病毒进行实验。【点睛】本题考查培养基的类型、微生物的接种方法、固定化酶和固定化细胞等相关知识,意在考查考生对所学基础知识的识记和理解能力。10、之后果胶酶(和果胶甲酯酶)含糖量较低干酵母(悬液)出现气泡酵母下沉无菌空气/氧气抑制杂菌反向拼接/倒接、(自身)环化且的基因的浓度、质粒的浓度、反应时间氯化钙CaCl2不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒在含四环素培养基上存活,在含青霉素培养基上死亡营养物质和生长调节剂/植物激素项端分生组织继代培养【解析】
1.酿酒和制醋是最古老的生物技术。与酒和醋的生产有关的微生物分别是酵母菌和醋杆菌,它们各有不同的菌种。菌种的不同,所产生的酒和醋的风味也不同。本实验的内容是制作果酒和果醋,所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖进行酒精发酵(乙醇发酵)的产物。酵母菌只有在无氧条件下才能进行酒精发酵,即将葡萄糖氧化成乙醇,而且当培养液中乙醇的浓度超过16%时,酵母菌就会死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反应式如下。醋杆菌在有氧条件下才能将乙醇氧化为醋酸,醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%。2.基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.【详解】(一)(1)制备山楂果原汁通常选成熟的山楂果,为了避免杂菌污染,通常在用清水冲洗山楂果之后去梗。将山楂果切片并去籽,为了提高出汁率和澄清度,通常需要添加果胶酶(和果胶甲酯酶)处理,酶解适宜时间后压榨取果汁。(2)乙醇发酵时通常需要在发酵液中添加适量蔗糖,以弥补山楂果原汁含糖量较低的不足,同时也是为了满足酵母菌发酵需要的底物量,从而获得酒精含量较高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母(悬液)后,置于适宜环境下进行发酵,由于酵母菌无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳,所以在发酵过程中会有气泡产生,当发酵液中不再出现气泡时,意味着发酵完成,然后过滤获得果酒;也可发酵至酵母下沉后,用虹吸法取出上清液即为果酒。(3)醋酸发酵中,由于醋化醋杆菌在有氧气的条件下将酒精变为为乙醛,进而变为乙醇,所以整个发酵过程需要通入无菌空气/氧气。在发酵后期加入1.3~1.4%的食盐,食盐起到了调味和抑制杂菌的作用,进而防止果醋被其他微生物发酵分解。(二)(1)①为构建基因表达载体的过程,若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段,则两者会出现相同的粘性末端从而使得拼接变得容易,但这种方法存在明显的缺点是在拼接时会出现反向拼接/倒接、(自身)环化等情况。影响拼接效率的因素主要有盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素,除此外,还有且的基因的浓度、质粒的浓度和反应时间也会影响拼接的效率。(2)②过程为将目的基因导入受体细胞的过程,将图示重组Ti质粒导入农杆菌时,为了提高导入的成功率,可用氯化钙CaCl2处理农杆菌,以提高转化效率。因为导入的成功率较低,也就是说,并不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒,可能有的导入的是普通质粒,或者没有导入成功,所以需要在特定的培养基对农杆菌进行筛选,由于图中重组质粒上含有标记基因四环素抗性基因,而抗青霉素的基因被破坏,为了筛选出成功导入重组质粒的农杆菌,需要将待筛选的农杆菌分别接种在含有四环素的培养基和含青霉素的培养基上进行筛选,最终筛选到成功导入重组质粒的农杆菌在相应选择培养基上的存活情况是在含四环素培养基上存活,在含青霉素培养基上死亡。(3)③过程为再分化成植株的过程,该过程中需要通过调节营养物质和生长调节剂/植物激素的适当
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