2025版新教材高考生物复习特训卷考点35微生物的培养技术及应用

考点35微生物的培育技术及应用第一关小题自助餐自选狂刷eq\a\vs4\al(题组一)刷基础小卷——固学问1．[2024·甘肃兰州一中高三试题]平板冷却凝固后要将平板倒置，其目的是()A．利于大肠杆菌的生长B．防止空气进入C．利于培育基的冷却D．防止皿盖冷却水落入培育基造成污染2．[经典模拟]下表为某培育基的配方，下列叙述正确的是()成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4伊红美蓝蒸馏水含量10g10g2g0.4g0.065g1000mLA.从物理性质看，该培育基属于液体培育基；从用途看，该培育基属于选择培育基B．该培育基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨C．该培育基缺少供应生长因子的物质D．该培育基调整合适的pH后就可以接种运用3．[经典模拟]微生物培育过程中，要非常重视无菌操作。现代生物学试验中的很多方面也要进行无菌操作，以防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是()①煮沸消毒可以杀死微生物的养分细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰旁边进行③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培育基要进行高压蒸汽灭菌⑥加入培育基中的指示剂和染料不须要灭菌A．①③B．②④C．③⑤D．④⑥4．[2024·四川乐山四校联考]某小组同学为了调查湖水中细菌的污染状况而进行了试验，试验过程包括制备培育基、灭菌、接种及培育、菌落视察与计数。下列与此试验相关问题的叙述中，正确的是()A．试验用过的带菌培育基经过加热后才能倒掉B.利用平板划线法对细菌进行分别、纯化并计数C.视察细菌培育的试验时，最好是在另一平板上接种清水作为比照试验D．培育基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为细菌培育供应氮源和碳源5．[2024·安徽省黄山市高三“八校联考”]蓝白斑筛选是基因工程中筛选重组目的基因常用的一种方法，表现为培育基上出现蓝白颜色的菌落，可以颜色为依据干脆筛选重组菌。用于筛选的菌为β­半乳糖苷酶缺陷型菌株，这种宿主菌中编码β­半乳糖苷酶的部分缺失，不具有生物活性。用于蓝白斑筛选的质粒载体一般含有抗性基因和将宿主菌β­半乳糖苷酶缺失部分补全的序列，在这段序列中还含有多个限制性酶切位点，便于插入目的基因。β­半乳糖苷酶能够作用于一种无色化合物X­gal，使其变成蓝色物质。回答下列问题：(1)玻璃和金属材质的试验器材利用________方法灭菌。(2)培育基灭菌后，须要冷却到________℃左右时，才能倒平板。倒平板后，平板冷凝要将平板倒置，其缘由是________________。(3)为防止杂菌污染，培育基中要添加________。蓝白斑筛选能胜利，是因为培育基中添加了________。(4)最终培育基出现的白色的菌落是()A．目的基因和载体结合B．只含目的基因C．只含载体(5)若须要长期保存该菌种，可采纳的方法是________。eq\a\vs4\al(题组二)刷提升小卷——培素养6．[2024·湖北襄阳市模拟]下列有关细菌培育的叙述，正确的是()A．不同细菌的菌落特征一般相同B．在培育基中加入青霉素可促进细菌生长C．用液体培育基培育破伤风杆菌的过程中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D．培育醋酸杆菌时，往培育液中通入氧气可以促进菌体快速增殖7．[2024·辽宁沈阳市模拟]下列关于微生物试验操作的叙述，错误的是()A．微生物培育基中并不都必需添加碳源或氮源B.倒平板时，应将打开的培育皿皿盖放到一边，以免培育基溅到皿盖上C．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧D．试验结束后，带菌的培育基必需经灭菌处理后才能倒掉8．[2024·浙江杭州其次中学校联考模拟]下列有关微生物培育基的配制表述错误的是()A.培育硝化细菌的培育基中的铵盐可作为氮源和能源B．尿素固体培育基中的K2HPO4能用于维持培育基的pHC．培育光能自养型的蓝细菌的培育基中不需供应有机物D．马铃薯蔗糖固体培育基中的琼脂能作为酵母菌的碳源9．[2024·浙江模拟]微生物的培育须要相宜的条件。下列相关叙述正确的是()A．培育基中必需添加水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等B．培育基制备过程中须要将pH调至中性，然后灭菌C．利用微生物发酵生产谷氨酸时，C/N为4∶1时更有利于菌体繁殖D．为便于接种，培育基中都要添加琼脂或其他的凝固剂10．[2024·广东模拟]刚果红能与纤维素形成红色复合物，但对纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖无作用。某同学利用刚果红配制选择培育基，分别土壤中能水解纤维素的微生物并视察菌落数。下列叙述正确的是()A.划线接种后统计平板上的菌落数，统计值比活菌实际数高B．选择培育基中应以刚果红作为唯一碳源，并加入琼脂糖作凝固剂C.培育基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从电源插上起先计时D．可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选目的菌11．[2024·浙江模拟]稀释涂布平板法和平板划线法是分别和纯化微生物的两种重要方法，关于二者的比较，下列说法错误的是()A．稀释涂布平板法易形成单菌落并可对微生物进行计数B．利用稀释涂布平板法进行统计数据时应选择相同稀释度下的培育基C．平板划线中用蘸有菌液的接种环划一条线后，再次蘸取菌液接着划线D．二者接种菌液时分别须要用到的工具是涂布器和接种环12．[2024·浙江宁波一模]某爱好小组探究庆大霉素和阿米卡星两种抗生素对大肠杆菌的选择作用，获得如下试验结果。爱好小组还设置含不同浓度抗生素的液体培育基培育大肠杆菌，结果显示抗生素浓度越低，液体越浑浊。下列叙述错误的是()A．抑菌圈的直径越大，说明抗生素的抑菌实力越强B．抑菌圈随大肠杆菌代数增加而变小，说明抗生素对大肠杆菌有选择作用C．阿米卡星的抑菌效果比庆大霉素小，所以药用效果相对不够志向D．为了避开产生耐药菌，服用抗生素时要足量、足药程，刚好停用对细菌不敏感的药13．[2024·福建一模]获得纯净的微生物培育物是发酵工程的基础。下列叙述错误的是()A．获得纯净的微生物培育物的关键是防止杂菌污染B．稀释涂布平板法和显微镜干脆计数法是测定微生物数量的常用方法C．平板划线法和稀释涂布平板法是试验室中进行微生物分别和纯化的常用方法D．接种于培育基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为纯培育物14．[2024·湖北一模]药物敏感试验简称药敏试验，旨在了解某病原微生物对各种抗生素的敏感程度，以指导临床合理选用抗生素。纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法，在纸片四周会形成透亮的抑菌圈。下列叙述正确的是()A．图1所示操作需待培育基冷却至50℃左右时进行，不须要在酒精灯旁操作B．图3中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落可能是该病原微生物发生了基因突变C．进行药敏试验，需将平板上布满测试菌，需运用的接种工具是接种环D．接种后的平板在培育时的放置应如图2中②所示，可以防止污染15．[2024·湖北模拟]某爱好小组为探讨“运用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3盘，一盘取样冷藏，一盘运用公筷，一盘不用公筷，试验过程如下图。下列叙述正确的是()A．在固体培育基X上用稀释涂布平板法进行接种B.固体培育基X对菜品中的细菌有选择作用C．依据菌落的特征可以精确推断细菌的种类D．理论上，不食用组的培育基上不会有菌落出现eq\a\vs4\al(题组三)刷真题小卷——登顶峰16．[2024·辽宁卷]为避开航天器在执行载人航天任务时出现微生物污染风险，须要对航天器及干净的组装车间进行环境微生物检测。下列叙述错误的是()A．航天器上存在适应养分物质匮乏等环境的极端微生物B．细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀C．在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品D.采纳平板划线法等分别培育微生物，视察菌落特征17．[2024·江苏卷]下列是某同学分别高产脲酶菌的试验设计，不合理的是()A．选择农田或公园土壤作为样品分别目的菌株B.在选择培育基中需添加尿素作为唯一氮源C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌18．[2024·山东卷]解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并汲取利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能干脆汲取脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培育。甲菌菌落四周呈现深蓝色，乙菌菌落四周不变色，下列说法错误的是()A.甲菌属于解脂菌B．试验中所用培育基以脂肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的实力19．[2024·北京卷]人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分别出葡萄球菌。下述操作不正确的是()A．对配制的培育基进行高压蒸汽灭菌B．运用无菌棉拭子从皮肤表面取样C．用取样后的棉拭子在固体培育基上涂布D．视察菌落的形态和颜色等进行初步推断20．[2024·山东卷]含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动实力，用穿刺接种的方法分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培育基上进行培育，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是()A.乙菌的运动实力比甲菌强B．为不影响菌的运动需选用液体培育基C．该试验不能比较出两种菌产生硫化氢的量D.穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染21．[2024·海南卷]为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某爱好小组采集园内土壤样本并开展相关试验。下列有关叙述错误的是()A．采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本B．培育细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培育基C.土壤溶液稀释倍数越低，越简单得到单菌落D.鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法其次关大题自助餐自选精做eq\a\vs4\al(题组一)等级考试题专项练1．[2024·河北卷]番茄灰霉病菌严峻影响番茄生产，枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，探讨者设计了相关试验。回答下列问题：(1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时，取适量________菌液涂布于固体培育基上，将无菌滤纸片(直径5mm)在________菌液中浸泡后覆盖于固体培育基中心，数秒后取出滤纸片，培育皿倒置培育后测量________大小以判定抑菌效果。(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培育时应采纳________(填“静置”或“摇床振荡”)培育。培育过程中抽样检测活菌数量时，应采纳________(填“稀释涂布平板法”或“显微镜干脆计数法”)，其缘由是________________________________________。(3)电泳分别蛋白质混合样品的原理是________________________________________。利用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定枯草芽孢杆菌的抗菌蛋白分子量时，SDS的作用是____________________________________________________。(4)枯草芽孢杆菌长期保藏时，常以其________作为保藏对象。2．[2024·浙江1月，节选]回答下列(一)小题：(一)某环保公司从淤泥中分别到一种高效降解富养分化污水污染物的细菌菌株，制备了固定化菌株。(1)从淤泥中分别细菌时常用划线分别法或________法，两种方法均能在固体培育基上形成________。对分别的菌株进行诱变、________和鉴定，从而获得能高效降解富养分化污水污染物的菌株。该菌株只能在添加了特定成分X的培育基上繁殖。3．[2024·广东卷]中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖)为原料，在试验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。回答下列问题：(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受实力和利用效率，可在液体培育基中将蔗糖作为________，并不断提高其浓度，经多次传代培育(指培育一段时间后，将部分培育物转入新配的培育基中接着培育)以获得目标菌株。培育过程中定期取样并用______________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有____________________(答出两种方法即可)等。(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受实力强等特性，探讨人员设计了一种不须要灭菌的发酵系统，其培育基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不须要灭菌的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(答出两点即可)(3)探讨人员在工厂进行扩大培育，在相宜的养分物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发觉发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中________可能是高密度培育的限制因素。(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾(主要含蛋白质、淀粉、油脂等)来生产PHA，说明其能分泌________________________。4．[2024·浙江6月，节选]回答下列(一)小题：(一)回答与甘蔗醋制作有关的问题：(1)为了获得酿造甘蔗醋的高产菌株，以自然发酵的甘蔗渣为材料进行筛选。首先配制醋酸菌选择培育基：将适量的葡萄糖、KH2PO4、MgSO4溶解并定容，调整pH，再高压蒸汽灭菌，经________后加入3%体积的无水乙醇。然后将10g自然发酵的甘蔗渣加入选择培育基，振荡培育24h。用________将少量上述培育液涂布到含CaCO3的分别培育基上，在30℃培育48h。再挑取分别培育基上具有________的单菌落若干，分别接种到与分别培育基成分相同的________培育基上培育24h后，置于4℃冰箱中保存。(2)优良产酸菌种筛选。将冰箱保存的菌种分别接入选择培育基，培育一段时间后，取合适接种量的菌液在30℃、150r/min条件下振荡培育。持续培育至培育液中醋酸浓度不再上升，或者培育液中________含量达到最低时，发酵结束。筛选得到的优良菌种除了产酸量高外，还应有________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2点即可)等特点。5．[2024·全国甲卷]某同学从被石油污染的土壤中分别得到A和B两株可以降解石油的细菌，在此基础上采纳平板培育法比较二者降解石油的实力，并分析两个菌株的其他生理功能。试验所用的培育基成分如下。培育基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培育基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步骤：①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培育基Ⅰ中培育，得到A、B菌液；②液体培育基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。回答下列问题：(1)试验所用培育基中作为碳源的成分是____________。培育基中NH4NO3的作用是为菌株的生长供应氮源，氮源在菌体内可以参加合成______________________(答出2种即可)等生物大分子。(2)步骤①中，在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种N0个A细菌，繁殖n代后细菌的数量是________。(3)为了比较A、B降解石油的实力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行试验，结果如表所示(“＋”表示有透亮圈，“＋”越多表示透亮圈越大，“－”表示无透亮圈)，推想该同学的试验思路是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤，依据上表所示试验结果，治理石油污染应选用的菌株是________，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。6．[2024·全国乙卷]化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培育所利用的碳源关系亲密。为此，某小组通过试验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。碳源细胞干重(g/L)S产量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18回答下列问题。(1)通常在试验室培育微生物时，须要对所用的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有______________________(答出2点即可)。(2)由试验结果可知，菌株C生长的最适碳源是________________；用菌株C生产S的最适碳源是________________。菌株C的生长除须要碳源外，还须要________________(答出2点即可)等养分物质。(3)由试验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其缘由是____________________。(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关试验。请简要写出试验思路：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是____________________________(答出1点即可)。eq\a\vs4\al(题组二)科学探究类专项练7．[2024·广西北海市模拟]某探讨小组发觉类产碱假单胞菌对黄脊竹蝗有较强的感染力，并可引起其发病死亡，该小组成员以此绽开试验探究。回答下列问题：(1)用来培育类产碱假单胞菌的培育基为牛肉膏蛋白胨培育基，在此培育基中，为微生物供应碳源的物质是________________________。培育基配制时，灭菌和调pH的先后依次为__________________。对培育基进行灭菌所用的仪器是______________。(2)在培育类产碱假单胞菌的过程中，培育皿应倒置培育，其缘由是________________________________________________________________________。(3)进行试验时，若要频繁运用类产碱假单胞菌，可以采纳________________________方法对其进行保存，这种方法的缺点是________________________________。(4)探讨发觉：黄脊竹蝗幼虫在自然状态下感染类产碱假单胞菌后，于24小时后起先死亡，72小时达到死亡高峰，染病后出现行动迟缓，伴有稍微痉挛的现象。为验证此菌是蝗虫致死的缘由，该探讨小组成员从病死虫尸中提取并分别得到该菌，并用该菌__________________，视察到的现象是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。8．[2024·广东卷]探讨深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对中国南海科考中，中国科学家采集了某海疆1146米深海冷泉旁边沉积物样品，分别、鉴定得到新的微生物菌株并进一步探讨了其生物学特性。回答下列问题：(1)探讨者先制备富集培育基，然后采纳________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培育一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培育物，为了获得纯种培育物，除了稀释涂布平板法，还可采纳______________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以________为碳源时生长状况最好。(2)探讨发觉，将采集的样品置于各种培育基中培育，仍有很多微生物不能被分别筛选出来，推想其缘由可能是____________________________________。(答一点即可)(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉环境特别，推想此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能还有__________。9．[2024·吉林长春市高三模拟]2024年6月1日起，江浙沪Starbucks全部门店将全面试用Foopak生物可降解饮品杯。该饮品杯经填埋处理后，能被微生物经分解作用完全降解，可替代传统塑料及一般部分降解饮品杯，从而避开“白色污染”。回答下列问题：(1)从填埋Foopak生物可降解饮品杯的土壤中分别Foopak分解菌时，应先从土壤取样，并接种在液体培育基上进行选择培育，目的是________________；再将选择后的样品进行梯度稀释，________________接种到固体培育基上，需进行梯度稀释的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在整个分别过程中无杂菌污染，培育基上出现多种菌落特征，最可能的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)在测定培育液中Foopak分解菌的数量时，需至少做三个重复试验。做重复试验的目的是________________，做重复试验的方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。10．[2024·广东高三模拟]苹果醋是当下流行的风味饮品，是苹果汁经发酵后，再添加适量苹果汁等原料而制成的饮品。苹果醋中的乙酸有软化血管、降低血压，能有效预防高血压和心脑血管疾病。下图是苹果醋饮品的工厂生产过程图。回答下列有关问题：(1)得到果醋醪液须要经过两次发酵，发酵②须要的发酵条件是________________________________________________________________________________________________________________________________________________(写出2点)。(2)苹果醋含有较高浓度的乙酸，能够引起____________________________，导致细菌死亡，使得大多数微生物不能生长繁殖，但市场保质期内的苹果醋饮品有时会发生“变质”问题。某同学分析出现“变质”的缘由可能如下：①可能在灌装或包装过程中无菌操作不够规范，引起了耐酸性细菌污染；②两次无菌操作采纳________________，虽然使得饮品风味口感保持不变，但不能杀死耐热性微生物；③苹果浓缩汁中出现了食品污染常见的某种杆菌，在不利条件下形成芽孢或孢子，在条件相宜时其大量繁殖，引起变质。11．[2024·黑龙江佳木斯市模拟]谷氨酸钠是味精的主要成分，工业生产中常用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸。下表是生物爱好小组探究发酵条件对微生物数量和产物生产的影响。组别发酵条件谷氨酸棒状杆菌繁殖速率单个菌体产谷氨酸量第一组通入无菌空气C/N＝3∶1较慢较多其次组通入无菌空气C/N＝4∶1较快较少请分析回答下列问题：(1)谷氨酸棒状杆菌发酵的培育基中主要养分物质有______________________________，该培育基是一种________培育基。(2)得到谷氨酸棒状杆菌数目可采纳的计数方法是______________，用该方法计数过程：取其次组的100倍的稀释液滴加到计数板(由25×16＝400个小室组成，容纳液体总体积为0.1mm3)上，经检测共有菌体42个，则1mL的其次组发酵液中有菌体________个。(3)由上述探究可知，要通过发酵得到大量谷氨酸，需首先不断向发酵液中通入________，将碳氮比设为________培育一段时间，然后将发酵液中碳氮比改为________接着培育。12．[2024·辽宁高三模拟]大肠杆菌是一类引起人和幼畜腹泻的重要病原菌，可通过食物和水源等途径传染。某生物爱好小组欲从某患病犊牛粪便中检测大肠杆菌的数量，并分别培育及鉴定。请回答下列问题。(1)取10g簇新的犊牛粪便按图示方法分别大肠杆菌，通过统计①平板上的菌落数，可推想出样品中大约含有的活菌数，其原理是______________________________。若依据图中①平板上的菌落数来计算，每克犊牛粪便中活菌数应为________。(2)分别出的大肠杆菌可通过图中两种接种方法进一步纯化，A所示的方法应如何使菌液在培育基上匀称分布？________________________；B所示的接种方法中用到的接种用具应如何灭菌？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)接种好的培育基放入恒温箱中应倒置培育，这样做是为了________________。为检测培育基的制备是否合格，应当怎么做______________________________。(4)爱好小组进一步采纳滤膜法测定犊牛饮用水中大肠杆菌的数量，过滤器滤膜的孔径需________(填“大于”或“小于”)大肠杆菌的直径，先将1000mL饮用水进行过滤，再将滤膜转移到________培育基上，最终培育基置于相宜条件下培育，得到________(填颜色)的菌落，依据菌落数可推断大肠杆菌的数量。(5)某位爱好小组的同学用未经稀释的菌液涂布平板，结果培育基上被菌铺满，他把沾有噬菌体的小纸片放在该培育基上接着培育，结果如图，请推想出现透亮圈的缘由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。考点35微生物的培育技术及应用第一关小题自助餐自选狂刷1．D平板冷却凝固后将平板倒置是为了防止皿盖冷却水落入培育基后造成污染，D正确；此操作不是利于大肠杆菌的生长，A错误；空气仍旧可以进入到平板中，B错误；倒置对于培育基冷却没有太大影响，C错误。2．B分析表中成分可知，该培育基中没有凝固剂，为液体培育基，该培育基的养分成分齐全，但存在伊红、美蓝等鉴别物质，属于鉴别培育基，A错误；该培育基中的蛋白胨既是唯一的氮源，也是碳源，而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源，B正确；该培育基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子，C错误；对培育基调整完pH后还要进行灭菌处理等操作才能运用，D错误。3．D无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培育基、添加剂（指示剂或染色剂）等。煮沸可以杀死微生物的养分细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中杂菌的污染，接种时要在酒精灯火焰旁边进行；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭菌；培育基常用高压蒸汽灭菌。故④⑥操作错误。4．D试验用过的带菌培育基要经高压蒸汽灭菌后才能倒掉，以免污染环境，A错误；应利用稀释涂布平板法对细菌进行分别、纯化并计数，B错误；要使该试验所得结果牢靠，还应当同时在另一平板上接种无菌水作为比照进行试验，C错误；培育基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培育供应了氮源和碳源，D正确。5．答案：（1）干热灭菌（2）50防止皿盖上的冷凝水落入培育基造成污染（3）抗生素X­gal（4）A（5）甘油管藏法解析：（1）玻璃和金属材质的试验器材可用干热灭菌的方法进行灭菌。（2）培育基灭菌后，须要冷却到50℃左右时才能倒平板。倒平板后，平板冷凝要将平板倒置，这样做可防止皿盖上的冷凝水落入培育基而造成污染。（3）为防止杂菌污染，培育基中要添加抗生素。β­半乳糖苷酶能够作用于一种无色化合物X­gal，使其变成蓝色物质，蓝白斑筛选能胜利，是因为培育基中添加了X­gal。（4）由于用于蓝白斑筛选的质粒载体一般含有抗性基因和将宿主菌β­半乳糖苷酶缺失部分补全的序列，因此最终培育基中出现的白色的菌落是目的基因和载体结合的菌落，故选A。（5）若须要长期保存该菌种，可采纳的方法是甘油管藏法。6．D不同细菌的菌落特征一般不同，因此可以依据菌落的特征进行菌种的鉴定，A错误；细菌对抗生素敏感，在培育基中加入青霉素可抑制细菌而促进真菌生长，B错误；破伤风杆菌是严格厌氧型细菌，向液体培育基中通入氧气能抑制破伤风杆菌的生长，C错误；醋酸杆菌属于好氧型细菌，因此在培育醋酸杆菌时，向培育液中通入氧气促进其有氧呼吸，有利于菌体快速增殖，D正确。7．B有些微生物可以利用空气中的无机碳源或无机氮源，故微生物培育基中并不都必需添加碳源或氮源，A正确；倒平板时，应将培育皿皿盖打开一条缝，若放到一边，简单造成杂菌污染，B错误；接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，C正确；试验结束后，带菌的培育基必需经灭菌处理后才能倒掉，以免污染环境或操作者，D正确。8．D硝化细菌是化能自养型生物，可利用NH3氧化获得能量，将无机物转化为有机物，故培育硝化细菌的培育基中的铵盐可作为氮源和能源，A正确；尿素固体培育基中的K2HPO4能用于维持培育基的pH，保证微生物生长、繁殖所需的酸碱环境，B正确；培育光能自养型的蓝细菌的培育基中不需供应有机物，蓝细菌可利用二氧化碳和水合成有机物，C正确；琼脂的作用是凝固剂，不能作为碳源，D错误。9．C培育基中不肯定都要添加水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，比如培育能利用CO2的自养型微生物，培育基中可以不添加碳源，A错误；培育基制备过程中须要调整pH然后灭菌，但要依据微生物的生长需求调整，B错误；利用微生物发酵生产谷氨酸时，C/N为4∶1时更有利于菌体繁殖，当碳氮质量比为3∶1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增，C正确；须要将菌种接种到固体培育基时才要在培育基中添加琼脂或其他的凝固剂，D错误。10．D划线接种不能用于菌落的计数，A错误；刚果红相当于指示剂，要用以纤维素为唯一碳源的选择培育基，B错误；培育基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从达到设定的温度或压力值起先计时，C错误；滤纸的主要成分是纤维素，可以通过此操作获得能够分解纤维素的微生物，D正确。11．C用稀释涂布平板法接种，当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，并可统计平板上的菌落数，推想出样品中大约含有多少活菌，A正确；利用稀释涂布平板法进行统计数据时应选择相同稀释度下的培育基，取平均值以削减试验误差，B正确；平板划线时接种环只蘸取一次菌液，C错误；稀释涂布平板法接种菌液时须要用到的工具是涂布器，平板划线法的接种工具是接种环，D正确。12．C抑菌圈的直径越大，抗生素对细菌的作用越强，即抗生素的抑菌实力越强，A正确；由图可知，连续培育几代后，抑菌圈的直径渐渐变小，抗生素对细菌起到了选择作用，B正确；由图可知，相同浓度的两种抗生素，庆大霉素的抑菌圈直径大，则抑菌效果好于阿米卡星；不同浓度下两者的效果无法得知，所以不能得出该结论，C错误；变异先于环境变更之前，所以运用抗生素是进行筛选；因此，为了避开产生耐药菌，服用抗生素时要足量、足药程，刚好停用对细菌不敏感的药，D正确。13．D获得纯净培育物的关键是无菌技术，即防止外来杂菌的入侵，A正确；测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜干脆计数法，故稀释涂布平板法和显微镜干脆计数法是测定微生物数量的常用方法，B正确；试验室中进行微生物分别和纯化最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，C正确；纯培育物是由单一个体繁殖所获得的微生物群体，特定种类微生物的群体不肯定是由单一个体繁殖而来，D错误。14．B图1所示操作是倒平板，须要在酒精灯旁操作，以防止杂菌污染，A错误；图3中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落可能是该病原微生物发生了基因突变，产生了耐药性，从而存活下来，B正确；进行药敏试验，需将平板上布满测试菌，利用的接种方法是稀释涂布平板法，需运用的接种工具是涂布器，C错误；接种后的平板在培育时须要倒置培育，即图2中①所示，图2中②是培育皿正置，倒置培育既能防止培育基中水分过快蒸发，又能防止冷凝形成的水珠倒流污染培育基，D错误。15．A由图分析可知，图中对菌落进行了计数，采纳的计数方法是稀释涂布平板法，A正确；固体培育基没有做任何处理，所以对菜品中的细菌没有选择性，B错误；在肯定培育条件下，不同的微生物表现出各自稳定的菌落特征，依据菌落的性状、大小、颜色等特征，可以初步区分出不同种微生物，但不能精确推断，C错误；不食用的菜品，正常状况下也有微生物存在，D错误。16．D嗜极微生物适应极端环境的特性使它们有在空间暴露环境或地外星球环境中存活的可能，因此航天器上存在适应养分物质匮乏等环境的极端微生物，A正确；细菌形成菌膜粘附于航天器设备表面产生生物腐蚀，会腐蚀舱内材料以及设备线路、元器件，B正确；对航天器及干净的组装车间进行环境微生物检测，须要在组装车间地面和设备表面采集环境微生物样品，C正确；航天器及干净的组装车间环境微生物很少，分别培育微生物，视察菌落特征，不须要采纳平板划线法，D错误。17．D农田或公园土壤中含有较多的含脲酶的微生物，A正确；为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培育基应选择尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培育基上能生长，B正确；当样品的稀释度足够高时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，C正确；在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培育基的pH上升，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂，能对分别的菌种做进一步鉴定，D错误。18．B依据题干信息“甲菌菌落四周呈现深蓝色”，说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确；乙菌落四周没有出现深蓝色，说明乙菌落不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌落也可以在培育基上生存，说明该培育基不是以脂肪为唯一碳源，B错误；可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C正确；可以利用该平板来比较解脂菌分泌脂肪酶的实力，视察指标以菌落四周深蓝色圈的大小为依据，D正确。19．C为避开杂菌污染干扰，需对配制的培育基进行高压蒸汽灭菌，A正确；葡萄球菌需从人体皮肤的微生物中分别，为避开杂菌污染，故须要运用无菌棉拭子从皮肤表面取样，B正确；棉拭子上的微生物须要用平板划线法在培育基上进行接种，C错误；依据微生物在固体平板培育基表面形成的菌落的形态、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别，D正确。20．B由题图可知，乙菌的运动实力比甲菌强，A正确；试验所用培育基应为固体培育基，B错误；硫化氢与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀，该试验只能对甲、乙菌能否产生硫化氢进行定性分析，并不能比较出两种菌产生硫化氢的量，C正确；穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌污染，D正确。21．C采集植物园中土壤样本的原则之一是要随机采样，A正确；牛肉膏蛋白胨固体培育基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等，可用于细菌的培育，B正确；土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的细菌分散开，有助于在培育基表面形成单菌落，C错误；不同种类细菌的理化特性一般不同，鉴定细菌种类时，除依据菌落特征进行形态学鉴定外，还可以借助生物化学的方法进行鉴定，D正确。其次关大题自助餐自选精做1．答案：（1）番茄灰霉病菌枯草芽孢杆菌抑菌圈（2）摇床振荡稀释涂布平板法用稀释涂布平板法在培育基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜干脆计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内（3）利用待分别样品中各种分子带电性质的差异及分子本身的大小、形态的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分别SDS带有大量的负电荷，且能使蛋白质变性成为肽链，使蛋白质的迁移速率只与蛋白质的相对分子质量有关，而与所带电荷性质无关（4）菌液解析：（1）分析题意，要检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用，先把适量的番茄灰霉病菌菌液涂布于固体培育基上，将无菌滤纸片在枯草芽孢杆菌菌液中浸泡后覆盖于固体培育基中心，若对番茄灰霉病菌有抑制作用，被覆盖的位置的番茄灰霉病菌就会被杀死，培育皿倒置培育后会出现抑菌圈，测量抑菌圈大小以判定抑菌效果强弱。（2）枯草芽孢杆菌为好氧微生物，采纳摇床振荡培育可增大培育液的溶氧量，有利于枯草芽孢杆菌的生长繁殖。培育过程中要抽样检测活菌数量，应当采纳稀释涂布平板法，用稀释涂布平板法在培育基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜干脆计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内。（3）电泳分别蛋白质混合样品的原理是：利用待分别样品中各种分子带电性质的差异及分子本身的大小、形态的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分别。SDS带有大量的负电荷，且能使蛋白质变性成为肽链，使蛋白质的迁移速率只与蛋白质的相对分子质量有关，而与所带电荷性质无关。（4）长期保藏枯草芽孢杆菌，应当将培育的菌液转移到灭菌好的甘油瓶中，与甘油充分混合，放在－20℃的冷冻箱中保存。2．答案：（一）（1）涂布分别单菌落筛选解析：（1）分别纯化细菌最常用的方法是划线分别法或涂布分别法，两种方法均能在固体培育基上形成单菌落。为了获得能高效降解富养分化污水污染物的菌株，还需对分别的菌株进行诱变处理，再经筛选和鉴定。3．答案：（1）唯一碳源血细胞计数板计数诱变育种、基因工程育种（2）盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制（3）氧气（O2或溶解氧）（4）蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等解析：（1）依据题意分析，该试验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受实力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培育基应当以蔗糖作为唯一碳源。并不断提高其浓度，经多次传代培育（指培育一段时间后，将部分培育物转入新配的培育基中接着培育）以获得目标菌株。培育过程中定期取样并用血细胞计数板计数的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有诱变育种、基因工程育种等。（2）已知菌株H具有嗜盐、酸碱耐受实力强等特性，因此当培育基盐浓度为60g/L、pH为10时，菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶变性失活，生长繁殖受抑制，故该系统不须要灭菌。（3）分析题意，扩大培育时，养分物浓度、温度、pH等条件相宜，而发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中氧气不足，使菌种进行无氧呼吸产生乙醇，即氧气（O2或溶解氧）是限制高密度培育的重要因素。（4）依据酶的专一性可知，菌株H之所以能通过分解主要含蛋白质、淀粉、油脂等的餐厨垃圾来生产PHA，说明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。4．答案：（1）冷却玻璃刮刀较大透亮圈斜面（2）乙醇耐酒精度高、耐酸高解析：（一）（1）高压蒸汽灭菌刚结束时，培育基温度较高，要待培育基冷却后再加入3%体积的无水乙醇。涂布分别法可用于单菌落分别，运用玻璃刮刀将待分别的菌液涂布到分别培育基的整个平面上。醋酸菌发酵产生的醋酸会使培育基中的CaCO3分解，形成透亮圈。菌落小，透亮圈大，代表着高产醋酸菌。菌种的贮存方法：在无菌操作下将单菌落用接种环取出，再用划线法接种在斜面培育基上，培育24h后，置于4℃冰箱中保存。（2）醋酸发酵结束的标记：产物不再增加（醋酸浓度不再上升）或原料消耗到最低值（乙醇含量达到最低）。优质菌种不仅要求产酸高，还要耐高酸，同时还要耐酒精（原料）等特点。5．答案：（1）石油DNA、RNA、蛋白质（2）N0·2n（3）在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且相宜条件下培育一段时间，比较两个平板的两孔处的透亮圈大小并作记录，依据透亮圈大降解实力强，透亮圈小降解实力弱，进而比较A、B降解石油的实力（4）AA菌株降解石油的实力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培育基中也能生长解析：（1）培育基的成分有碳源、氮源、无机盐和水等，从组成培育基的物质所含化学元素可知，作为碳源的成分是石油。生物大分子DNA、RNA、蛋白质都含有N元素，故氮源在菌体内可以参加合成这些物质。（2）由题意“资源和空间不受限制”可知，细菌的增殖呈“J”形曲线增长，细菌每繁殖一代就是上一代的2倍，依据公式Nt＝N0·λt，λ＝2，繁殖n代后细菌的数量是N0·2n。（3）分析表格数据可知，试验的结果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解石油的实力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍旧能降解石油，而B菌株不能降解，依据试验的单一变量和比照原则，推想该同学的思路是：在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且相宜条件下培育一段时间，比较两个平板的两孔处的透亮圈大小并作记录，依据透亮圈大降解实力强，透亮圈小降解实力弱，进而比较A、B降解石油的实力。（4）由表格数据可知，在平板Ⅱ（无氮源的培育基）上，A菌株仍旧能降解石油，而B菌株不能降解，所以要治理贫氮且被石油污染的土壤，应当选用A菌株，因为A菌株降解石油的实力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培育基中也能生长。6．答案：（1）高压蒸汽灭菌、干热灭菌（2）葡萄糖制糖废液水、氮源、无机盐（3）菌株C缺少淀粉酶（4）用一系列浓度梯度的制糖废液分别培育菌株C，测定不同浓度制糖废液中的S产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为最适碳源浓度（5）削减污染、节约原料、降低生产成本解析：（1）试验室通常采纳高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法对玻璃器皿进行灭菌处理。（2）表格中，可用细胞干重来表示细胞生长状况，当碳源为葡萄糖时，细胞干重最大，最适合菌株C生长；当碳源为制糖废液时，菌株C生产S的产量最高。一般培育基都含有水、碳源、氮源和无机盐等养分物质。（3）菌株C缺乏淀粉酶，不能将淀粉水解为菌株可利用的葡萄糖，故碳源为淀粉时菌株C不能生长。（4）要测定生产S的最适制糖废液浓度，可配制一系列浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培育基，分别培育菌株C，其他条件保持相同且相宜。一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液培育基中的S产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度。（5）利用制糖废液生产S不仅能节约原料、降低生产成本，还削减了环境污染。7．答案：（1）牛肉膏、蛋白胨先调pH，后灭菌高压蒸汽灭菌锅（2）防止皿盖上凝聚的水珠滴落到培育基上造成污染（3）临时保藏保存的时间不长，菌种简单被污染或产生变异（4）感染生理状况良好的黄脊竹蝗幼虫感染后的幼虫出现行动迟缓，伴有稍微痉挛现象解析：（1）牛肉膏蛋白胨培育基，为微生物供应碳源的是牛肉膏和蛋白胨；配制培育基时，应先调整pH，再灭菌，防止杂菌污染；灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法，所以须要用到高压蒸汽灭菌锅。（2）为了防止皿盖上凝聚的水珠滴落到培育基上造成污染，所以培育皿应倒置培育。（3）频繁运用类产碱假单胞菌，可以采纳临时保藏的方法保存；该方法保存的时间不长，菌种简单被污染或产生变异。（4）为证明类产碱假单胞菌是蝗虫致死的缘由，须要从病死虫尸中提取并分别得到该菌，并用该菌感染生理状况良好的黄脊竹蝗幼虫，假如感染后的幼虫出现行动迟缓，伴有稍微痉挛现象，即可证明。8．答案：（1）高压蒸汽灭菌平板划线纤维素（2）某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存（或须要在深海冷泉的特定环境中才能存活）（3）拟杆菌作为分解者，将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到无机环境中，有利于碳循环的顺当进行（4）耐低温解析：（1）培育基通常采纳高压蒸汽灭菌法进行灭菌。可以采纳稀释涂布平板法或平板划线法，将单个微生物分散在固体培育基上，经过培育