农业部2122号公告-7-2014 转基因植物及其产品成分检测 耐除草剂苜蓿J101及其衍生品种定性PCR方法_第1页
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农业部2122号公告一7—2014耐除草剂苜蓿J101及其衍生品种定性I农业部2122号公告一7—20141农业部2122号公告—7—2014耐除草剂苜蓿J101及其衍生品种定性PC本标准规定了转基因耐除草剂苜蓿J101转化体特异性定性PCR检测方法。本标准适用于转基因耐除草剂苜蓿J101及其衍生品种，以及制品中J101转化体成分的定性PCR农业部1485号公告—4—2010转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化农业部2031号公告—19-2013转基因植物及其产品成分检测抽样NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求根据耐除草剂苜蓿J101转化体特异性序列设计特异性引物，对试样进行PCR扩增。依据是否扩增获得预期的DNA片段，判断样品中是否含有耐除草剂苜2农业部2122号公告—7-2014Acc-F:5'-GATCAGTGAACTTCGCAAAAcc-R:5'-GAGGGATGCTGCTACTTTJ101-F:5'-CACAACTAATTGTGTJ101-R:5'-GCTTTGGACTGAGAATTA3按NY/T672和农业部2031号公告—7.5.1试样PCR反应终浓度水10XPCR缓冲液dNTPs混合溶液(各2.5mmol/L)10pmol/L下游引物总体积“一”表示体积不确定。如果PCR缓冲液中含有氯化镁，则不加氯化镁溶液。根据TaqDNA聚合酶的浓度确定其体积，并相应调整水的体积，使反应体系总体积达注：苜蓿内标准基因PCR检测反应体系中，上、下游引物分别为Acc-F和Acc-R;J101转化体特异性序列PCR检测反应体系中，上、下游引物分别为J101-F和J101-R。7.5.2对照PCR反应5农业部2122号公告—7-2014(资料性附录)61ATGCACTCATGTTGTAGTG61CTTTACAGTGACAATGTATA

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