动物繁殖学：生殖激素的测定

生殖激素第8讲生殖激素的测定生物测定法免疫测定法受体测定法其它理化测定法生物测定法（bioassay）主要根据生殖激素的生物学作用而设计的方法，是研究某种新的激素及其制剂最基本的检测手段。该方法虽然灵敏度不高，但其结果能直接体现生殖激素的生物学活性，因此是其他任何方法都不可替代的方法。一、生物测定法生殖激素生殖激素

常规生物测定法

按一定比例稀释，注射到某种实验动物体内，观察靶器官的反应。能使实验动物产生生物学效应的最低激素用量，规定为一个生物学单位。子宫增重反应适于雌激素测定

鸡冠发育反应适于雄激素测定

卵巢增重反应适于PMSG测定一、生物测定法生殖激素

微量生物测定法(细胞培养生物测定法)在添加待测激素条件下，体外培养待测激素的靶细胞，测定激素作用后靶细胞的分泌物含量，可以间接计算激素的生物活性。生殖激素测定条件靶细胞可以分泌某种可以测定的物质。测定靶细胞分泌物的方法灵敏度高，操作简便、快速，一般为RIA或ELISA法。激素作用的靶细胞容易分离，而且分离培养后在一定时期内具有分泌功能。

生殖激素二、免疫测定法

用同位素、酶、荧光素或化学发光物质标记抗原（半抗原）/抗体，通过检测免疫反应产物中结合（即抗原或半抗原-抗体结合物）物的活性，间接计算激素含量。放射免疫测定技术（radio-immunoassay，RIA）酶免疫测定技术（enzymeimmunoassay，EIA）荧光免疫测定技术（fluorescenceimmunoassay，FIA）结合相游离相RIA洗涤洗涤A.抗原吸附EB.加酶标抗体EC.加底物显色直接法EIA间接法EIA夹心法EIA竞争法EIA生殖激素三、受体测定法激素与其靶细胞上的受体特异性结合的亲和力很高，因此可用激素的受体代替免疫测定方法中的抗体对激素进行测定。与免疫测定法相比，用受体测定法得到的结果更接近于生物测定，因为激素只有与其受体结合后，才能表现其生物学活性。生殖激素四、其他理化测定方法早期用有机溶剂将待测物进行提取和纯化，然后将激素分子中某些特定基团与化学试剂进行颜色反应，利用分光光度法测定激素含量。该法灵敏度较低，只能检出mg/ml水平的样本。色谱法：激素的定量测定、提取与纯化。灵敏度较低（约达

g/ml水平），操作繁锁，所以一般用于大规模提取或人工合成激素的检测，如激素生产厂家的质量控制。电泳法：蛋白质、肽类等可在惰性支持介质中，在电场的作用下，向其对应的电极方向泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量（%）的方法，还可用于测定蛋白质激素的分子量。生殖激素雌性动物生殖激素生殖激素雄性动物生殖激素中枢神经递质（内源性阿片肽、儿茶酚胺、5-羟色胺等）内皮素：血管收缩、类固醇激素（黄体）瘦素：白色脂肪细胞、胎盘促生长因子（IGFs,EGF,TGF,PAF,IL,IFN）生殖激素生殖激素本单元小结重点各种生殖激素的化学特性、生理作用及其应用难点激素分泌的调节及激素间的相互关系生殖激素思考题生殖激素的作用特点是什么？GnRH的生理作用是什么？其分泌受到哪些因素的调节？在动物生产中有何具体应用？促性腺激素有哪些？其