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文档简介
检测生物组织中的糖类脂肪
1.还原糖的鉴定根据是否具有还原性,分为:还原性糖:(单糖、麦芽糖、乳糖)非还原性糖:(蔗糖、多糖)
可溶性还原糖与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。还原糖+斐林试剂——砖红色沉淀斐林试剂(现配现用)
甲液:0.1g/ml的NaOH溶液,乙液:0.05g/ml的CuSO4溶液1、还原糖的鉴定原理反应式NaOH+CuSO4→Cu(OH)2↓葡萄糖+2Cu(OH)2
→葡萄酸+Cu2O↓+2H2O砖红色沉淀蓝色原因:Cu(OH)2是沉淀,现配的菲林试剂中Cu(OH)2还是悬浊液,能与菲林试剂反应,配置久了沉淀就会析出而无法与菲林试剂反应,所以要现配菲林试剂。还原糖(葡萄糖、果糖)+菲林试剂水浴加热砖红色?2min
还原糖与菲林试剂反应过程鉴定可溶性还原糖为什么要水浴加热?用其它热源加热不易控制温度,很容易导致反应失败,而且斐林试剂里的蓝色氢氧化铜沉淀热稳定性较差,受热(80℃以上)很容易分解生成黑色的氧化铜沉淀和水,不能生成砖红色氧化亚铜沉淀。苹果和梨是比较理想的实验材料。2、材料用具:苹果、研钵、小刀斐林试剂A液、斐林试剂B液、二氧化硅量筒、试管架、吸管、试管夹、试管、滴管漏斗、纱布火柴、酒精灯、三脚架、石棉网、烧杯3、实验步骤:取一个洗净的苹果切下一块,去皮,然后切成小块,取一部分切成小块的苹果放在研钵中,加入少许二氧化硅(石英砂),然后研磨,将研钵中加入少量水继续研磨。将玻璃漏斗插入试管中,在漏斗上垫一层纱布,将组织研磨液进行过滤,得到苹果的组织样液。用量筒取两毫升组织样液,再用量筒取两毫升新配制好的斐林试剂。取一只试管,将量好的苹果组织样液倒入试管中,然后将量好的斐林试剂倒入试管中,震荡试管使溶液混合均匀,我们可以看到此时溶液呈蓝色。将这只试管放入盛有开水的大烧杯中,用酒精灯隔水加热。溶液的颜色开始是蓝色,然后慢慢变成砖红色。这个实验就证明了,苹果中含有还原性糖的存在。4、实验现象:溶液的颜色从蓝色变成棕色,最终变成砖红色。5、结论:苹果中含有还原性的糖。1、为什么要选白色或近于白色的材料进行试验?
2、为什么加入组织样液与菲林试剂后溶液或显蓝色?答:减少试验材料对试验现象的干扰,使得试验现象明显。答:菲林试剂中的Cu(OH)2在溶液中显蓝色。
2、淀粉的鉴定实验设计应遵循的基本原则:1、对照性原则:即实验中设立对照组,使实验结果具有说服力。2、单一变量原则:即控制其他因素不变而只改变其中某一变量,观察其对实验结果的影响。3、平行重复原则:在进行实验时,有些情况的出现是有偶然性的,多重复几次实验,对得出结果进行分析,更具说服力。
3.脂肪的鉴定脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹Ⅳ染液染成红色1、脂肪的鉴定原理2、材料用具:芝麻,脂肪含量丰富,但种子颗粒太小,不利于切片制作。玉米,脂肪含量较少,种子颗粒也较小,因此也不适合做实验材料。花生是比较理想的实验材料我们选用花生光学显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿50%的酒精、苏丹Ⅲ、清水3、实验步骤:取一粒浸泡过的花生种子,去皮,分开两片子叶,将子叶切成薄片,然后用毛笔将这些材料放入盛有清水的培养皿中。取一片载玻片,用纱布擦净,用毛笔取一片最薄的材料,放在载玻片中央。用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹Ⅲ染液,染色2至3分钟,用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。在薄片上滴1至2滴体积分数为50%的酒精,洗去浮色,用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。在薄片上滴一滴清水,盖上盖玻片,制成临时装片。在低倍镜下寻找花生种子薄片的最薄处,将这部分移至视野中央,换高倍镜观察。用显微镜观察花生种子薄片。我们可以看到细胞中一个个圆形的小颗粒,这就是脂肪颗粒。低倍镜下观察高倍镜下观察4、实验现象:5、结论:显微镜下观察到橘黄色的颗粒。花生种子细胞中含有脂肪。1、为什么染色时间是2-3分钟,时间过长或过短会怎么样?2、洗去浮色的时间不能过长,为什么?3、临时装片制作好后,为什么要立即观察?课堂检测1.可用于鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂()A.斐林试剂B.双缩脲试剂C.苏丹Ⅲ染液D.苏丹Ⅳ染液2.下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是A.淀粉B.果糖C.蔗糖D.纤维素3.下列哪个实验用到显微镜()A.可溶性还原糖的鉴定B.蛋白质的鉴定C.脂肪的鉴定D.淀粉的鉴定ACB4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液颜色的变化过程为()A.无色一砖红色(沉淀)B.浅蓝色一砖红色(沉淀)C.浅蓝色一蓝色一砖红色(沉淀)D.浅蓝色一棕色一砖红色(沉淀)5.下列物质中,能被苏丹IV染液染成红色的是()A.马铃薯块茎B.浸软的蓖麻种子C.蛋清液D.苹果DB7、某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是:
这些叶子的颜色较深,对还原性
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