湖北省宜昌市秭归县第二中学2025届高三压轴卷生物试卷含解析

湖北省宜昌市秭归县第二中学2025届高三压轴卷生物试卷注意事项1．考生要认真填写考场号和座位序号。2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．千岛湖中的主要鱼类及食性如下：银鱼主要以浮游动物为食；鲢鱼和鳙鱼主要以藻类和浮游动物为食；鲤、鲴和华鳊为食碎屑鱼类；鳡鱼等为凶猛的肉食性鱼类。研究人员于2000年在千岛湖实施保水渔业，即大规模放养人们日常食用的鲢鱼和鳙鱼，并且大力捕杀鳡鱼。调查1999、2000年主要鱼类的生物积累量（单位面积中生物的总量）如下图所示。下列相关分析错误的是（）A．银鱼生物积累量大幅度下降，可能是由于实施保水渔业加剧了银鱼与鲢、鳙之间的竞争B．食碎屑鱼类的增长有利于千岛湖生态系统的物质循环和水质的净化作用C．实施保水渔业，定期适度捕捞鲢、鳙，可增加经济效益D．大量放养的鲢、鳙增加了第一和第二营养级的生物积累量，减少了能量损失2．下图表示酵母菌培养过程中其数量的变化情况，下列分析正确的是（）A．酵母菌达到的最大值与起始数量有直接关系B．ab段酵母菌数量下降可能是营养不足或pH下降导致的C．若bc段过滤掉培养液中的有害物质并增加营养，酵母菌数量将持续增加D．cd段酵母菌的数量基本不变，说明在这个阶段酵母菌不进行繁殖3．某研究小组从某湖泊中选取了四种不同的生物，并对其消化道内食物组成进行了分析，结果如下表所示。下列说法正确的是（）生物种类鱼甲河虾鱼乙水蚤消化道内食物组成鱼乙、河虾水蚤、小球藻水蚤、河虾小球藻A．小球藻、水蚤在生态系统中属于生产者B．表中生物形成的食物网共有4条食物链C．鱼乙在该湖泊生态系统中的营养级最高D．河虾与水蚤二者间的关系是捕食和竞争4．“调控植物生长—代谢平衡实现可持续农业发展”入选2018年度中国科学十大进展，其研究证实DELLA蛋白通过阻遏某些基因的转录从而抑制植物生长发育，而赤霉素能解除细胞中已经存在的DELLA蛋白的阻遏效果。以下叙述不合理的是A．植物合成赤霉素的部位主要是未成熟的种子、幼根和幼芽B．植物生长—代谢的平衡是体内基因与环境共同作用的结果C．赤霉素通过抑制DELLA蛋白基因的表达解除其阻遏效果D．DELLA蛋白分子上可能存在具有不同生物学功能的区域5．某动物的性染色体组成为ZW型，该种群中出现一个显性突变体，为确定该突变基因的位置，进行了一系列杂交实验，下列杂交组合及结果（如表所示）正确的是（）亲本子代基因所在位置A纯合突变体（♀）与纯合正常个体（♂）雄性全为突变体，雌性全为正常个体基因只能位于Z染色体上B纯合突变体（♀）与纯合正常个体（♂）突变体：正常体=1:1基因只能位于常染色体上C纯合突变体（♂）与纯合正常个体（♀）全为突变体基因只能位于Z染色体上D纯合突变体（♂）与纯合正常个体（♀）全为突变体基因只能位于常染色体上A．A B．B C．C D．D6．光合作用是生物界最基本的同化作用，下列相关叙述不正确的是A．流经森林生态系统的总能量是该生态系统的生产者固定的太阳能B．净光合速率为零时，蓝藻细胞产生ATP的场所主要有线粒体和叶绿体C．光反应产生的ATP是暗反应中将CO2合成糖类的能源物质D．用H218O培养小球藻，一段时间后可在其产生的糖类和氧气中检测到18O7．PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时()。A．仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸B．与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸C．同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链的延伸D．无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链8．（10分）图为某哺乳动物(基因型为AaBbDd)体内一个细胞的分裂示意图。据图分析，下列说法正确的是（）A．该细胞分裂产生的子细胞可能是精细胞或卵细胞B．该细胞形成过程中发生了基因重组、染色体数目变异和染色体结构变异C．与该细胞来自同一个亲代细胞的另一个细胞中最多含有8条染色体D．该细胞中含有同源染色体，正处于有丝分裂后期二、非选择题9．（10分）神经纤毛蛋白-1（NRP-1）能在肿瘤细胞内表达，是血管内皮生长因子家族成员的受体，通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。研究人员从肿瘤细胞中扩增出NRP-1基因并将其导入大肠杆菌体内进行发酵培养，分离提纯相应NRP-1，并将其免疫小鼠，以制备抗NRP-1的单克隆抗体（NRP-1MAb）。分析回答下列回题：（1）利用PCR技术可以从肿瘤细胞的基因组中分离扩增得到完整的NRP基因，其原因是__________。将扩增后的目的基因构建成表达载体后，导入用__________处理的大肠杆菌体内完成转化。（2）研究人员将分离提纯的NRP-1免疫小鼠后，取其脾脏中B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上不能存活的是__________。选取检测抗体阳性的杂交瘤细胞进行体外培养时需要的气体环境是__________。（3）为进一步确定NRP-1MAb靶向治疗时的用药方式，研究人员将直肠癌组织块制成单细胞悬液，等量注入4组裸鼠右前腋下，接种3后天开始向培养液中施加NRP-1MAb药物，每隔10天给药1次，共4次。给药后测算一次肿瘤体积，结果如下图所示：分析上图可以得出的结论是__________。根据实验结果，请给出使用NRP-1MAb进行靶向治疗癌症时的临床建议：__________。10．（14分）家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。科学家将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。回答下列相关问题：（1）进行转基因操作前，需将获得的幼蚕组织先剪碎，并用_____酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞作为受体细胞。（2）在培养获得单个细胞时，为避免杂菌污染，除进行一系列无菌处理外，还应在培养液中添加一定量的_______________。培养家蚕细胞时，细胞会产生贴壁生长和_______现象，通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。（3）将干扰素基因导入培养的家蚕细胞时，需要载体协助，而载体一般不选择_______（填“噬菌体”或“昆虫病毒”），原因是_____________________________________________。（4）若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，采用的技术有__________和___________________。11．（14分）科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图1所示，图2、图3分别表示了干扰素基因及质粒的相关信息。（1）在图1治疗过程中是否体现细胞的全能性____（是/否），为什么？________________________。（2）图1步骤③将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有__________________。（3）据图2、图3，对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用的限制酶组合为________________。（4）为了得到实验所需的大量干扰素基因，研究人员利用PCR技术进行扩增。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，因此可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取_____________作为引物。若要将1个干扰素基因复制4次，则需要在缓冲液中至少加入_______个引物。（5）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发_____________色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用_____________方法进行检测。12．某双子叶植物种子子叶的颜色有绿色和白色，由两对独立遗传的等位基因控制。已知子叶颜色由基因A、a控制，另一对等位基因B、b影响A、a基因的表达。利用绿色子叶种子发育的植株（甲）、白色子叶种子发育的植株（乙和丙）进行下列实验：组别亲代F1表现型F1自交F2的表现型及比例实验一甲×乙绿色子叶绿色子叶：白色子叶=3：1实验二乙×丙白色子叶绿色子叶：白色子叶=3：13回答下列问题：（1）由实验一推知，种子子叶颜色这一相对性状中白色对绿色为____________性。（2）分析以上实验可知，基因B、b对基因A、a表达的影响是______________。（3）实验二中，丙的基因型为_______________，F2代白色种子的基因型有_____________种。（4）实验二中，F2白色种子有的是纯合子有的是杂合子，能否通过测交实验进行鉴别_________？并作出解释_________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

本题考查了生态系统的营养结构、能量流动和物质循环的相关知识。由题干可知千岛湖的生产者主要是藻类，初级消费者是浮游动物、鲢鱼和鳙鱼，次级消费者是银鱼、鲢鱼和鳙鱼，最高级消费者是鳡鱼，鲤、鲴和华鳊为食碎屑鱼类；是该生态系统的分解者的一部分，结合题干所给的柱状图，对所给选项进行逐项分析解答。【详解】由题干可知银鱼、鲢鱼和鳙鱼在以浮游动物为食物中它们是竞争关系，由于人们大规模放养人们日常食用的鲢鱼和鳙鱼，加剧了银鱼与鲢、鳙之间的竞争，结果使得银鱼生物积累量大幅度下降，A正确；食碎屑鱼类是该生态系统分解者的一部分，分解者能够把有机物还原成无机物，促进了千岛湖生态系统的物质循环和水质的净化作用，B正确；由图可知，大规模放养人们日常食用的鲢鱼和鳙鱼，并且大力捕杀鳡鱼，提高了鲢鱼和鳙鱼的产量，定期适度捕捞鲢、鳙，可增加经济效益，C正确；大量放养的鲢、鳙增加了第二和第三营养级的生物积累量，D错误。【点睛】从题干中梳理出相关生物在生态系统中的地位并在此基础上正确理解生态系统各成分在生态系统中的作用是解题的关键。2、B【解析】

“S”型曲线是受限制的指数增长函数，描述食物、空间都有限，有天敌捕食的真实生物数量增长情况，存在环境容纳的最大值K。酵母菌培养过程较为符合S型增长趋势，据此分析作答。【详解】A、酵母菌达到的最大值（K值）与环境条件有关，起始数量可能会影响达到K值的时间，但不会改变K的数量，A错误；B、ab段酵母菌数量下降可能是酵母菌数目增多导致营养不足或代谢产物引起pH下降导致的，B正确；C、若bc段过滤掉培养液中的有害物质并增加营养，酵母菌数量可能会增加，但由于环境条件限制，不会一直增加，C错误；D、cd段酵母菌的数量基本不变，说明在该阶段酵母菌的出生率与死亡率基本相等，D错误。故选B。【点睛】本题考查种群数量变化的相关知识，属于图形分析题，利用好相关的知识，读懂图意，进行图文转换即可得出正确选项。3、D【解析】

从消化道中的食物组成来看，河虾捕食水蚤、小球藻，水蚤捕食小球藻，鱼乙捕食水蚤、河虾，鱼甲捕食鱼乙、河虾，故形成的食物链有：小球藻→水蚤→鱼乙→鱼甲，小球藻→水蚤→河虾→鱼乙→鱼甲，小球藻→水蚤→河虾→鱼甲，小球藻→河虾→鱼乙→鱼甲，小球藻→河虾→鱼甲。【详解】A、小球藻在生态系统中属于生产者，但水蚤属于初级消费者，A错误；B、表中生物形成的食物网共有5条食物链，B错误；C、鱼乙在该湖泊生态系统中处于3、4两个营养级，鱼甲处于3、4、5三个营养级，因此处于最高营养级的生物是鱼甲，C错误；D、河虾与水蚤二者的种间关系是捕食和竞争，D正确。故选D。【点睛】此题考查生态系统的成分、结构和种间关系，侧重考查信息能力和理解能力。4、C【解析】【分析】赤霉素主要是未成熟的种子、幼根和幼芽促进细胞伸长，从而引起植株增高；促进种子萌发和果实发育促进矮生性植物茎秆伸长；解除种子休眠，提早用来播种细胞分裂素主要是根尖促进细胞分裂和组织分化蔬菜贮藏中，常用它来保持蔬菜鲜绿，延长贮藏时间乙烯广泛存在于多种植物的

组织中，成

熟的果实中

更多促进果实成熟促进香蕉、凤梨等果实成熟脱落酸根冠、萎蔫的叶片等，

将要脱落的

器官和组织

中含量多抑制细胞分裂，抑制植物的生长，也能抑制种子的萌发；促进叶和果实的衰老和脱落落叶或棉铃在未成熟前的大量脱落【详解】植物合成赤霉素的部位主要是未成熟的种子、幼根和幼芽，A正确；植物生长—代谢的平衡从根本上是受到体内基因控制调节的结果，除外还受到环境作用的影响，B正确；赤霉素能解除细胞中已经存在的DELLA蛋白的阻遏效果。可见赤霉素并不能抑制DELLA蛋白基因的表达，C错误；DELLA蛋白通过阻遏某些基因的转录从而抑制植物生长发育。赤霉素能解除细胞中已经存在的DELLA蛋白的阻遏效果，可见DELLA蛋白分子上可能存在具有不同生物学功能的区域，D正确。5、A【解析】

性染色体组成为ZW型的生物体，雄性的性染色体组成为ZZ，雌性的性染色体组成为ZW，当基因位于Z染色体上时，若选择隐性雄性和显性雌性的个体杂交，则子代中雄性均为显性性状，雌性均为隐性性状。当基因位于常染色体上时，隐性雄性和纯合显性雌性的个体杂交，后代都是显性性状。【详解】A、为判定突变基因的位置，若选择显性纯合体为母本，隐性纯合体为父本，当基因位于Z染色体上，则亲本基因型为ZaZa×ZAW，子代的基因型为ZAZa与ZaW，表现型是雄性全为突变体、雌性全为正常个体，A正确；B、若基因位于常染色体上，则亲本基因型为AA×aa，子代的基因型为Aa，表现型全为突变型，B错误；CD、若选择纯合突变体（♂）与纯合正常个体（♀），当基因位于Z染色体上时，则亲本基因型为ZAZA×ZaW，子代基因型为ZAZa与ZAW，子代表现型全为突变体；当基因位于常染色体上时，则亲本基因型为AA与aa，子代基因型为Aa，表现型也全为突变体，所以若选择纯合突变体（♂）与纯合正常个体（♀）为亲本，则不能通过子代的表现型判定基因的位置，CD错误。故选A。【点睛】本题考查伴性遗传和常染色体遗传的区别，意在考查考生对伴性遗传规律的理解能力，易错点为ZW型决定的生物雌雄的性染色体组成分不清。6、B【解析】

1、有氧呼吸的第一、二、三阶段的场所依次是细胞质基质、线粒体基质和线粒体内膜。有氧呼吸第一阶段是葡萄糖分解成丙酮酸和[H]，合成少量ATP；第二阶段是丙酮酸和水反应生成二氧化碳和[H]，合成少量ATP；第三阶段是氧气和[H]反应生成水，合成大量ATP。2、光合作用的光反应阶段（场所是叶绿体的类囊体膜上）：水的光解产生[H]与氧气，以及ATP的形成。光合作用的暗反应阶段（场所是叶绿体的基质中）：CO2被C5固定形成C3，C3在光反应提供的ATP和[H]的作用下还原生成糖类等有机物。【详解】A、生产者固定的太阳能总量是流经该生态系统的总能量，A正确；

B、蓝藻是原核生物，没有线粒体和叶绿体，B错误；

C、光反应产生的ATP和NADPH是碳反应中将二氧化碳还原为糖的能源物质，C正确；

D、用H218O培养小球藻，在叶绿体中进行光合作用，进行水的光解形成氧气和[H]，则最先检测到含有放射性的产物是氧气。氧气可参与有氧呼吸的第二阶段，在CO2中可检测到被标记的O，再通过光合作用的暗反应阶段，转移到糖类等有机物中，D正确。

故选B。【点睛】本题主要考查了光合作用和呼吸作用的过程。考查了学生运用所学知识分析和解决问题的能力。光合作用和呼吸作用过程是考查的重点和难点。光合作用合成有机物，而呼吸作用分解有机物。光合作用为呼吸作用提供有机物和氧气，呼吸作用为光合作用提供二氧化碳和水。7、B【解析】

关于PCR技术的相关知识：

1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2、原理：DNA复制。

3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。【详解】当由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物固定端为5′端，因此与它互补的子链从另一端开始合成，即与引物II结合进行DNA子链的延伸。

故选B。8、B【解析】

识图分析可知，图中染色体的着丝点分裂，且只有A、a等位基因所在的一对同源染色体，其它染色体均为非同源染色体，故该细胞处于减数第二次分裂的后期。图中细胞内出现了A、a等位基因所在的同源染色体是由于减数第一次分裂的后期A、a所在的同源染色体移向一极导致的，图中B基因所在的染色体的一段移接到了A所在的染色体上，因此发生了染色体结构的变异中的易位。【详解】A、根据以上分析可知，该细胞处于减数第二次分裂的后期，由于细胞质均等分裂，因此该细胞分裂产生的子细胞可能是精细胞或极体，A错误；B、由于该细胞经过了减数第一次分裂，在减数第一次分裂的后期发生了非同源染色体上的非等位基因自由组合，即基因重组，由于细胞中A、a所在的同源染色体移向一极，因此发生了染色体数目变异，由于B基因所在的染色体的一段移接到A所在的非同源染色体上，因此发生了染色体结构变异中的易位，B正确；C、根据以上分析可知，该细胞发生了染色体数目的变异，正常情况下该细胞内此时含有6条染色体，因此与该细胞来自同一个亲代细胞的另一个细胞中最多含有4条染色体，C错误；D、根据以上分析可知该细胞中含有同源染色体是由于减数第一次分裂后期有一对同源染色体移向一极导致的，该细胞处于减数第二次分裂的后期，D错误。故选B。二、非选择题9、使用与NRP-1基因两端特异性结合的引物可以从模板DNA中扩增出该基因Ca2+未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞95%的空气和5%的CO2NRP-1MAb能有效的降低肿瘤的体积，中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著使用中剂量给药【解析】

1、利用PCR技术扩增目的基因时，由于DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链，因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增；引物I延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸，这样，DNA聚合酶能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列。2、分析图可知，实验组与对照组比较，NRP-1MAb能有效的降低肿瘤的体积；低、中、高剂量组比较可知，中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著。【详解】（1）由分析可知，使用与NRP-1基因两端特异性结合的引物，可以从模板DNA中扩增出处于两个引物之间的该基因。将目的基因导入大肠杆菌，最常用的转化方法是，用Ca2+处理细胞使其处于感受态。（2）用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上不能存活的是B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B淋巴细胞与B淋巴细胞融合的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞。进行动物细胞培养时，通常将培养基放置于95%的空气和5%的CO2的混合气体的培养箱中进行培养。（3）由图示可以看出，与对照组比较，NRP-1MAb能有效的降低肿瘤的体积；低、中、高剂量组比较可知，中、高剂量抗体的降低效果比低剂量的更显著，因此使用NRP-1MAb进行靶向治疗癌症时采用中剂量给药，用药量少，效果明显。【点睛】本题考查PCR扩增目的基因和单克隆抗体的相关知识，要求考生识记PCR技术的原理、动物细胞培养的条件；识记制备单克隆抗体的原理及过程，能结合所学的知识准确答题。10、胰蛋白酶抗生素接触抑制增大细胞贴壁生长的附着面积噬菌体噬菌体的宿主细胞是细菌而不是家蚕分子杂交技术抗原—抗体杂交技术【解析】

1、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。2、细胞的接触抑制：细胞表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖。【详解】（1）要将动物组织细胞分散开需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）酶短时处理动物组织。（2）在培养动物细胞时，为避免杂菌污染，除进行一系列无菌处理外，还应在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴满瓶壁的细胞会产生接触抑制现象。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积，从而增加培养的细胞数量，也有利于气体交换。（3）若将干扰素基因导入培养的家蚕细胞时，需要载体协助，而载体一般不选择噬菌体，原因是噬菌体的宿主细胞是细菌而不是家蚕。（4）基因的表达过程包括转录和翻译，因此若要检测某基因是否表达，可检测表达过程中的产物mRNA和蛋白质。因此，若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，采用的技术有分子杂交技术和抗原—抗体杂交技术。【点睛】本题考查基因工程和动物细胞培养的相关知识，要求考生识记PCR技术的条件；识记动物细胞培养的条件，能结合所学的知识准确答题。11、否并没有发育成完整个体发育的全能性HindIII和PstI或EcoRI和PstIB和C30绿色抗原-抗体杂交【解析】

1.细胞的全能性是指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。目前已经证明了植物细胞具有全能性，动物细胞的细胞核具有全能性。通常情况下分化程度越高的细胞全能性越低，生殖细胞的全能性高于体细胞，植物细胞的全能性高于植物细胞。2.哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。3.目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原--抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）在图1治疗过程中并未体现细胞的全能性，因为整个过程中并未发育成完整个体。（2）因为ES细胞具有发育的全能性，所以在进行基因治疗时，选择ES细胞进行改造，即图1中的步骤③。（3）据图2、图3中的酶切位点分析可知，SamI不能选用，因为该酶的识别位点位于目的基因内部，目的基因两端的酶切位点在质粒当中都包含，而且使用这些酶切割后依然能保留一种标记基因的存在，所以构建基因表达载体是可以选择目的基因两端的酶切位点进行组合，据此可知，在对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用的限制酶组合为HindIII和PstI或EcoRI和PstI。（4）用PCR技术进行扩增目的基因时。由于DNA复制过程中子链只能由5′向3′方向延伸，又因DNA分子中的两条链是反向平行的，因此可以选为引物的单链DNA片段为B和C。由于每个新合成的DNA单链中都需要有引物才能合成，因此，若要将1个干扰素基因复制4次，则需要加入的引物数量为24×2-2=30个。（5）由于在构建基因表达载体时，绿色荧光蛋白基因没有被破坏，因此，在进行筛选时，可用该基因作为标记基因进行检测，据此可知，将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察时应选择发绿色荧光的细胞进行体外诱导，因