微生物的培养需要适宜条件同步课时作业 高二下学期生物学浙科版（2019）选择性必修三

1.1微生物的培养需要适宜条件

一、单选题1．培养微生物就需要配制培养基，所配制的培养基都需()A.用蒸馏水配制 B.高压灭菌 C.进行倒平板处理 D.加热融化琼脂2．培养基的主要成分是()A.水,琼脂,碳源 B.水,碳源,氮源C.水,碳源,氮源,无机盐 D.水,无机盐3．获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术围绕如何避免杂菌污染而展开，包括消毒和灭菌。下列叙述错误的是()A.消毒采用较温和的物理、化学或生物方法B.灭菌不仅能杀死微生物，还能杀死芽孢和孢子C.不同的操作对象需要采取不同的消毒或灭菌方法D.消毒只能杀死物体表面的部分微生物4．接种环、培养皿、培养基、实验操作者的双手所采用的灭菌、消毒方法依次是()①煮沸消毒法②灼烧灭菌③干热灭菌④化学药剂消毒⑤高压蒸汽灭菌A.①②③⑤ B.②③⑤④ C.②③④⑤ D.①②⑤④5．下列关于消毒和灭菌的叙述，正确的是()A.为预防杂菌污染，应用无水酒精对操作者双手、操作空间等进行消毒B.在100℃条件下煮沸5~6分钟属于灭菌方法，可杀死微生物和部分芽孢C.吸管、培养皿、培养基、金属用具等可以采用干热灭菌法进行灭菌D.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触6．消毒、灭菌、无菌操作是生物学实验中常见的操作。相关叙述正确的是()A.对菊花外植体消毒，要用无水酒精配合使用一定浓度的次氯酸钠溶液B.可用干热灭菌法对实验中所使用的培养皿、金属用具等进行灭菌C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D.对操作者的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒7．酵母菌纯培养时，会用到多种药品和器械。下列对材料、用具进行相应的消毒或灭菌处理，最恰当的一组是()A.马铃薯培养基——干热灭菌 B.微量移液器枪头——酒精消毒C.超净工作台——苯酚和紫外线 D.接种环、涂布器——湿热灭菌8．下列关于无菌技术的相关叙述，正确的是()A.试管用棉塞封口不能防止培养的目标微生物外漏B.组培苗锻炼时所用的蛭石和珍珠岩通常不需要高压蒸汽灭菌C.动物细胞培养液的配制需要过滤灭菌D.使用后培养基需要高压蒸汽灭菌（0.5kg/cm2压力、121℃）处理9．灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是()A.可用干热灭菌法对实验中所使用的玻璃器皿、金属用具等进行灭菌B.消毒能杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行10．下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项()①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存④用紫外线消毒前，适量喷洒石炭酸，可以加强消毒效果⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌A.2项 B.3项 C.4项 D.5项二、多选题11．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，正确的是()A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D.水是该微生物的营养要素之一12．筛选是生物学中培养生物新类型常用的手段，下列做法可筛选成功的是()A.在培养基中加入10%的酚溶液可以抑制细菌和霉菌的生长，筛选出放线菌B.在含有精氨酸的培养基中筛选能合成精氨酸的微生物C.在培养基中加入青霉素、四环素等可以抑制某些细菌或放线菌的生长，筛选酵母菌和霉菌D.用不含碳源的培养基筛选根瘤菌三、读图填空题13．某兴趣小组按下列配方配制培养基用于微生物的筛选和鉴定。编号成分含量①NaCl5.0g②KH2PO4、Na2HPO4适量③MgSO4·7H2O0.2g④葡萄糖、乳糖10.0g⑤X适量⑥琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL回答下列问题：（1）培养基配制的一般流程是计算、称量、_____、灭菌、倒平板，判断培养基灭菌是否合格以及培养条件是否符合要求的思路是_____。（2）上表成分中能为微生物提供氮源的物质是_____，KH2PO4和Na2HPO4的作用是_____。（3）纯化菌株时，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误：①_____；②_____。14．下表为某生物兴趣小组的同学在培养某种微生物时制定的培养基组分，请回答下列问题：KH2PO4NaHPO4MgSO4·7H2OKNO3蒸馏水1.4g2.1g0.2g2.0g定容至100mL(1)该培养基缺少的营养成分是_____________，只能用来培养_____________型微生物，若要分离土壤中的尿素分解菌，该培养基中需加入_____________、_____________、琼脂，去掉KNO3。(2)制备固体培养基，需要计算→称量→_____________→灭菌→_____________。接种前，某同学取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，其目的是：_________________。(3)若要长时间保存大肠杆菌，可以采用__________________；使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止_________________。

参考答案1．答案：A解析：A、为排除其他物质的影响，配置培养基一般选择蒸馏水，A正确；B、如果培养基中含有热敏感的成分，则不能进行高压灭菌，应该采用过滤灭菌，B错误；C、液体培养基的配置过程不需要进行倒平板处理，C错误；D、培养基含凝固剂（如琼脂）是固体培养基，不含凝固剂的成液状态的是液体培养基，D错误。故选A。2．答案：C解析：培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源和氮源，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。培养基的成分为水、无机盐、碳源、氮源，故ABD错误，C正确。故选C。3．答案：D解析：消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包芽孢和孢子),D错误4．答案：B解析：接种环采用灼烧灭菌法灭菌；培养皿采用干热灭菌法进行灭菌；培养基采用高压蒸汽灭菌法灭菌；实验操作者的双手采用化学药剂消毒。则对应的顺序为②③⑤④。故选：B。5．答案：D解析：A、为更好的预防杂菌污染，操作者双手、试验台等应用体积分数70%的酒精进行消毒，A错误；B、在100℃条件下煮沸5～6分钟属于消毒方法，可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，B错误；C、吸管、培养皿、金属用具等可以采用干热灭菌法进行灭菌，培养基应采用湿热灭菌法，C错误；D、为避免杂菌污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，D正确。故选D。6．答案：B解析：A、对菊花外植体消毒，要用70%的酒精配合使用一定浓度的次氯酸钠溶液，A错误；B、微生物操作应注意无菌操作，可用干热灭菌法对实验中所使用的培养皿、金属用具等进行灭菌，B正确；C、对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌的方法是湿热灭菌法，常用的是高压蒸汽灭菌法，C错误；D、对操作者的双手采用酒精进行消毒，紫外线会对人体造成伤害，衣着和操作空间可采用紫外线进行消毒，D错误。故选B。7．答案：B解析：A、培养基的灭菌方法是湿热灭菌，通常用高压蒸汽灭菌，A错误;B、PCR实验所需的枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理，而微量移液器可用酒精消毒，B正确;C、苯酚能使蛋白质变性，可用苯酚水溶液进行环境消毒，超净工作台通常用紫外线进行消毒，C错误;D、接种环、涂布器需要用灼烧灭菌，D错误。故选B。8．答案：C解析：A、试管用棉塞封口能防止培养的目标微生物外漏，A错误；B、组培苗锻炼时所用的培养基质中的蛭石和珍珠岩，不需要用高压蒸汽灭菌锅灭菌，消过毒就可以使用，B错误；C、为避免破坏培养液中的营养成分，动物细胞培养液的配制需要过滤灭菌，C正确；D、为避免污染，使用后的培养基需要灭菌后再丢弃，可采用高压蒸汽灭菌（1kg/cm2压力、121℃）处理，D错误。故选C。9．答案：A解析：A、耐高温的和需要保持干燥的物品，如实验中使用的玻璃器皿、金属用具等，可以采用干热灭菌法，A正确；B、消毒只能杀死物体内外一部分的微生物，灭菌能杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，B错误；C、可以用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，C错误；D、动、植物细胞DNA的提取无须在无菌条件下进行，D错误。故选A。10．答案：C解析：①无菌技术的关键是防止杂菌的污染，①错误；②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟只能杀死部分生活状态的微生物细胞，不能杀死芽孢、孢子，②错误；③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，还含有微生物的芽孢和孢子，所以不能在常温长期保存，③正确；④用紫外线照射30min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果，④正确；⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧（温度更高），可以迅速彻底地灭菌，⑤正确；⑥培养皿、吸管等玻璃器皿可用干热灭菌法灭菌，⑥正确。故选C。11．答案：ACD解析：A、微生物生长繁殖需要氮源,氮源物质为该微生物提供必要的氮素,A正确;B、该碳源是二氧化碳,属于无机物,不能作为微生物的能源物质,B错误;C、无机盐是微生物生长繁殖不可缺少的营养物质,C正确;D、生命活动离不开水,水是该微生物的营养要素之一,D正确。故选B。12．答案：AC解析：A、在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌生长，因此利用该培养基可以筛选出放线菌，A正确；B、在不含精氨酸的培养基中可筛选能合成精氨酸的微生物，在含有精氨酸的培养基中能合成精氨酸的微生物也能生长，B错误；C、在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌生长，从而分离出酵母菌和霉菌等真菌，C正确；D、根瘤菌为异养型，在不含碳源的培养基上不能生长，D错误。故选AC。13．答案：（1）熔化；将未接种的培养基和接种菌液的培养基一同放在适宜条件下培养，观察未接种的培养基上是否有菌落生长以及接种的培养基上菌落的生长情况（2）X；提供无机盐、调节培养基的酸碱度（3）接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始解析：（1）培养基配制的一般流程是计算、称量、熔化、灭菌、倒平板，判断培养基灭菌是否合格可以将未接种的培养基和接种菌液的培养基一同放在适宜条件下培养，观察未接种的培养基上是否有菌落生长以及接种的培养基上菌落的生长情况。若未接种的培养基上长出菌落，这说明灭菌失败，需要重新配制培养基进行灭菌。（2）培养基中一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，由培养基配方表分析可知，培养基成分中还缺少氮源，故成分表中能为微生物提供氮源的物质是X，KH2PO4和Na2HPO4是无机盐，它们的作用是提供无机盐、调节培养基的酸碱度。（3）纯化菌株时，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，结合第一区域的划线上不间断长满菌落可推测接种环灼烧后未冷却，导致接种环上的菌体受到灼伤，若划线未从第一区域末端开始，则第二划线区域所划的第一条线上也会无菌落。14．答案：(1)碳源；自养；尿素；葡萄糖(位置可互换)(2)溶化；倒平板；用于判断培养基是否被污染(3)甘油管藏法；灭菌；对环境造成污染解析：(1)培养基的营养成分一般含有碳源、氮源、水和无机盐,该培养基的成分缺少碳源,只能用来培养自养型微生物,而