2024年临床医学检验主管技师考试辅导之检验主管技师体验课

检查主管技師精选体验課一、重要血浆蛋白质的理化性质、功能和临床意义

（一）血浆蛋白质的构成

血浆蛋白质是血浆中含量最多、成分极為复杂、功能广泛的一类化合物。目前已分离出近于纯品者就有200多种。

近年来有許多新技术用于研究蛋白质，這些资料提供了有价值的病理生理信息，有助于疾病的诊断、治疗。血浆中重要蛋白质的性质和功能蛋白质参照值*（mg/L）半寿期（d）分子量（萬）等電點含糖量（%）功能前白蛋白200～4002.55.54.70营养指標白蛋白35000～515～196.634.7～4.9有较广泛的载体功能营养指標α1-抗胰蛋白酶900～45.184.812APR，抗胰蛋白水解酶先天性缺陷時易导致肺气肿、肝硬化α1-酸性蛋白酶500～120054.02.7～445APR結合珠蛋白300～28.5～404.112APR，結合Hb，溶血時減少α2-巨球蛋白1300～30005725.48抗蛋白水解酶，肾病期增長铜藍蛋白200～6004.513.24.4APR，含铜转铁蛋白～360077.965.76负性APR，运转Fe，在低色素性贫血時增長血紅素結合蛋白500～11505.7結合血紅素β2-微球蛋白1～21.18C-反应蛋白＜811.56.20APR，防御蛋白*参照值可随所用测定措施、年龄、性别而有所不一样（二）功能和临床意义

1.前白蛋白（PA）

電泳位于清蛋白前面，由肝细胞合成,半寿期為2～5天。

功能

（1）参与组织修补。

（2）运载蛋白：运送激素和维生素，如运送甲状腺激素和维生素A。临床意义

（1）营养不良敏感指標；

（2）肝功不全指標：在肝炎发病初期血清前白蛋白浓度下降往往早于其他血清蛋白成分的变化；

（3）急性炎症、惡性肿瘤、肾炎、创伤時其血清浓度減少。2.视黄醇結合蛋白（RBP）

由肝脏合成，是分子量21kD，半衰期為12小時。

RBP将视黄醇從肝脏转运到多种靶组织，保护其不被氧化损伤。

在血浆中RBP与TTR（甲状腺素转运蛋白）以1:1結合，可防止小分子RBP從肾小球滤過。在靶细胞内，随TTR-RBP复合物的降解，视黄醇被摄入细胞。3.白蛋白（Alb）

Alb由肝细胞合成。白蛋白是血浆中含量最多的蛋白质，占總蛋白的57%～68%。

功能

（1）内源性氨基酸营养源；

（2）维持血浆的胶体渗透压；

（3）具有酸碱缓冲能力，维持血浆的正常pH；

（4）运送和储存作用：是血浆中重要的非特异性载体。

可运送許多水溶性差的物质如胆紅素、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子、多种药物等。

因分子量较小，它在血管外体液中的浓度可作為多种膜屏障完整性的良好指標。临床意义

（1）個体营养状态的评价指標。

（2）血浆蛋白质浓度明显下降時，可以影响某些内源性的代謝物、激素和外源性的药物在血液循环中的存在形式。

（3）血浆的清蛋白增高较少見，血液浓缩如严重脱水、休克、饮水局限性等。

（4）浓度減少見于

①白蛋白合成減少，如急、慢性肝病；

②营养或吸取不良；

③组织损伤或炎症引起的白蛋白分解代謝增長如大面积组织损伤；

④消耗性疾病（惡性肿瘤，严重感染等）；

⑤白蛋白异常丢失，如肾病综合征、慢性肾炎等；

⑥白蛋白分布异常，如有门静脉高压腹水時；

⑦遗传性疾病等。

已发既有20种以上白蛋白的遗传性变异。

简朴說：摄入局限性；合成障碍；消耗增大；丢失增多；血液稀释及分布异常；遗传疾病。4.α1-酸性糖蛋白（AAG）

α1-酸性糖蛋白包括等分子的已糖、已糖胺和唾液酸，是重要的急性時相反应蛋白，与抗体的免疫防御功能有关。

临床意义：α1-酸性糖蛋白的测定目前重要作為急性時相反应的指標。

增高：在風湿病、惡性肿瘤及心肌梗死患者。

減少：在营养不良、严重肝损害等。5.α1-抗胰蛋白酶（AAT）

肝脏合成，α1-抗胰蛋白酶是α1-区带显色的重要成分。

是血液中最重要的蛋白酶克制剂，可克制多种蛋白酶的活性。

一般认為α1-抗胰蛋白酶的重要功能是對抗由多形核白细胞吞噬作用時释放的溶酶体蛋白水解酶。

临床意义

（1）浓度升高：見于急性炎症、外科手术（急性時相反应蛋白）妊娠、長期服用可的松、雌激素等药物也可升高。

（2）減少：可見于胎儿呼吸窘迫综合征。

α1-抗胰蛋白酶缺陷可引起肝细胞的损害而致肝硬化，严重的遗传性缺陷常伴有早年（20～40岁）肺气肿。6.血紅素結合蛋白（haptoglobin，Hp）：結合珠蛋白、触珠蛋白。

是肝脏合成的一种急性時相反应蛋白。

在琼脂糖凝胶電泳中位于α2区带。

功能：

在血浆中結合游离的血紅蛋白，防止其由肾脏丢失，有效的保留铁。一分子Hp結合两分子Hb。

临床意义：

（1）急性時相反应時浓度增長。

（2）烧伤、肾病综合征引起大量Alb丢失，可使其含量升高。

（3）血管内溶血如溶血性贫血、输血反应、疟疾時，Hp含量明显下降。

（4）严重肝病患者Hp合成減少。7.α2-巨球蛋白（α2-MG或AMG）是血浆中分子量最大的蛋白质。由肝细胞与單核吞噬细胞系统合成。

功能：可与不少蛋白水解酶結合影响這些酶的活性，选择性保护某些蛋白酶的活性，也許与免疫反应有关。

临床意义：

升高：見于低白蛋白血症（代偿，保持血浆渗透压）；妊娠、口服避孕药也可使其升高。

減少：胰腺炎及前列腺癌時含量減少。8.铜藍蛋白（ceruloplasmin，CER）

铜藍蛋白是肝脏合成的含铜α2-糖蛋白，有基因多形性。

具有氧化酶的功能，對多酚及多胺类底物有催化其氧化的能力。

CER也可使Fe2+氧化成Fe3+运送。

临床意义：

（1）最特殊的作用在于协助诊断Wilson病（肝豆状核变性）。

Wilson病患者血清總铜浓度不变，铜藍蛋白含量減少（10ml/dl如下），而伴有血浆可透析的铜（游离铜）含量增長，這是本病的特性。

（2）CER也是一种急性時相反应蛋白。

感染、创伤、肿瘤時升高。

肝癌（转移性）、胆石症、肿瘤引起的胆道阻塞、妊娠、口服避孕药時含量升高。

（3）減低見于肾病综合征、严重肝病。9.转铁蛋白（transferrin，TRF）

重要由肝细胞合成，半寿期為7d。是血浆中重要的含铁蛋白质，转铁蛋白可逆地結合多价离子，包括铁、铜、锌、钴等。

功能：以TRF-Fe3+的形式运送内源性与外源性铁，与成熟紅细胞的生成有关。TRF的浓度受Fe供应的调整，缺铁時TRF升高。自由铁對机体有害，与TRF結合，還可防止Fe從肾丢失。

临床意义：

（1）TRF用于贫血的诊断和治疗监测。

缺铁性低血色素贫血：TRF升高，但铁饱和度減少；

再生障碍性贫血：RBC對Fe运用低，TRF下降或正常，但铁饱和度高。

（2）急性時相反应TRF下降，炎症、惡性病变随Alb、PA同步下降。

（3）肾病综合征、营养不良、慢性肝病下降，可作為营养状态指標。

（4）妊娠、口服避孕药或注射雌激素可使TRF升高。10.β2-微球蛋白（β2-microglobulin，BMG）

由淋巴细胞合成的單链多肽，是分子量较低的蛋白质（分子量1.18萬）。存在于所有有核细胞表面，尤其是淋巴细胞和肿瘤细胞，并由此释放入血。

β2-微球蛋白可透過肾小球，在肾小管几乎所有被重吸取并被完全降解。

临床意义：

（1）血中浓度升高，見于肾衰、炎症、肿瘤。

（2）临床用于监测肾小管功能：肾移植後如有排斥反应影响肾小管功能時，尿中BMG排出量增多。

（3）脑脊液中浓度升高，見于急性白血病和淋巴瘤有神經系统浸润。11.C-反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）

C-反应蛋白是一种能与肺炎链球菌细胞壁C多糖反应的急性時相反应蛋白。由肝细胞合成，電泳時多分布在γ区带，有時可延伸至β区带。广泛分布于人体体液中，如胸腹水、心包液、关节液、血液等处。

临床意义：

是第一种被发現的急性時相反应蛋白。是急性時相反应的一种极敏捷的指標。

浓度升高：急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿瘤浸润、風湿病時血浆C-反应蛋白浓度迅速地明显升高可达正常浓度的数仟倍。

結合临床病史，有助于随访病程。小結

肝脏合成蛋白：PA、Alb、AAT、Hp、CER、CRP、AAG、TRF。

肝外合成：BMG、免疫球蛋白。

有转运功能：PA、RBP、Alb、Hp、CER、TRF。

分子量最小：BMG。

分子量最大：α2-MG。

考纲

●尿液生成

●尿液检查目的

●尿標本采集

●尿標本处理

尿液生成

（一）肾组织基本构造

肾單位是肾脏生成尿的基本功能單位，由肾小体和肾小管构成。肾脏基本构造与功能的完整性是完毕泌尿功能的基础。

（二）尿液生成机制

1.肾小球滤過

（1）屏障作用

①孔径屏障：

细胞屏障：直径50～100nm。

滤過屏障：＞7萬的物质（球蛋白、纤维蛋白原等）几乎不能通過。

②電荷屏障：制止带负電荷较多的大分子物质的滤過。

（2）滤過膜通透性

重要取决于被滤過物质相對分子质量大小及其所带的電荷性质。物质相對分子质量有效半径增大，滤過量则減低。带正電荷的物质较易被滤過，而带负電荷的物质则较难通過滤過膜。（3）原尿成分：原尿除了無血细胞及含很少蛋白质外，其他物质如葡萄糖、氯化物、無机磷酸盐、尿素、肌酐和尿酸等的浓度，渗透压及酸碱度几乎与血浆相似。

2.肾小管与集合管重吸取

在近曲小管，滤過液中的葡萄糖、小分子蛋白质、大部分水等重吸取，而肌酐则几乎不被重吸取而随尿排出体外。肾近曲小管是重吸取的重要場所。原尿物质，當其浓度超過肾小管重吸取能力時，则可出現于终尿中。在抗利尿激素的作用下，遠曲小管、集合管是肾脏最终实現浓缩和稀释尿液功能的重要場所。

3.肾小管分泌

肾小管分泌作用包括肾小管和集合管的泌H+、NH4+的作用及Na+-H+互换作用。

尿液检查目的

尿检查是临床上最常用的重要检测项目之一。

重要用于：

1.泌尿系统疾病诊断和治疗监测

2.其他系统疾病诊断

3.安全用药监测

4.职业病辅助诊断

5.健康状况评估

尿標本采集

（一）患者准备

1.清洁標本采集部位；

2.明确標识標本；

3.防止月經、阴道分泌物、粪便、清洁剂等多种物质的污染；

4.使用合格容器，细菌培养的標本，应使用消毒培养瓶或無菌、有盖的容器。

清洁尿：包括中段尿、导尿標本或耻骨上穿刺尿。（二）標本容器准备

一般应能容纳50ml以上尿的容积；必须干燥、清洁，無污染物、無渗漏、無化學物质。

尿液常规检查每次留取尿標本的量不应少于15ml（三）尿標本采集种类

尿標本种类重要有：

1.晨尿

即清晨起床後第一次排尿時搜集的尿標本，即為初次晨尿。這种標本尿较為浓缩，可用于肾脏浓缩能力评价。初次晨尿常偏酸性，其中的血细胞、上皮细胞、病理细胞、管型等有形成分，以及如人绒毛膜促性腺激素（hCG）等的浓度较高。但夜尿在膀胱内停留時间過長，硝酸盐及葡萄糖易被分解，不利于检出在酸性环境中易变的物质，因而推荐采集第2次晨尿替代初次晨尿。

2.随机尿

這种標本不受時间限制。但此尿標本仅反应某一時段的現象，且易受多种原因（如运動、饮食、用药、情绪、体位等）的影响，可致尿检成分浓度減低或增高。3.计時尿按特定期间采集尿標本。

（1）3h尿：一般是搜集上午6～9點時段内的尿，多用于检查尿有形成分，如1h尿排泄率检查等。

（2）餐後尿：一般搜集午餐後至下午2時的尿。這种尿標本，有助于检出病理性糖尿、蛋白尿或尿胆原，有助于肝胆疾病、肾脏疾病、糖尿病、溶血性疾病等的临床诊断。

（3）24h尿：患者上午8時排尿一次，将膀胱排空，弃去尿，此後搜集各次排出的尿，直至次曰上午8時最终一次排尿的所有尿。尿中某些成分24h不一样步间内的排泄浓度不一样，如肌酐、總蛋白质、電解质等。為了较精确地定量分析這些成分，必须采集24h尿。

（4）特殊试验尿：①尿三杯试验：多用于男性下尿路及生殖系统疾病定位初步判断。②耐受性试验尿：如經前列腺按摩後排尿搜集尿標本。4.無菌尿

常用的措施：

（1）中段尿：留尿前先清洗外阴，在不间断排尿過程中，弃去前、後時段的尿，用無菌容器接留中间時段的尿。

（2）导管尿、耻骨上穿刺尿：患者发生尿潴留或排尿困难時采用。

尿標本处理

（一）尿標本保留

尿標本采集後，一般应在2h内及時送检，最佳在30min内完毕检查，或進行如下处理：

1.保留

多保留在2～8℃冰箱内，或保留于冰浴中。低温可克制微生物迅速生長，可保持尿中

存在的有形成分形态基本不变。

2.防腐常用的防腐剂：

甲醛：又称福尔馬林。對尿细胞、管型等有形成分的形态构造有很好的固定作用。

甲苯：可在尿標本表面形成一层薄膜，制止尿中化學成分与空气接触。常用于尿糖、尿蛋白等化學成分的定性或定量检查。

麝香草酚：可克制细菌生長，保留尿有形成分，用于尿显微镜检查、尿浓缩結核杆菌检查，以及化學成分保留。

浓盐酸：用作定量测定尿17-羟、17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺、Ca2+等標本防腐。

冰乙酸：用于检测尿5-羟色胺、醛固酮等的尿防腐。

戊二醛：用于尿沉淀物的固定和防腐。（二）质量控制

1.冷藏時间尿標本冷藏時间最佳不超過6h。

2.甲醛是一种還原性物质，可产生假阳性。用量過大可与尿素产生沉淀，干扰显微镜检查。

3.甲苯用量必须足够。取样检查時，应插入穿過甲苯液层，吸取尿。

4.麝香草酚用量過多時，可使尿蛋白加热乙酸法呈假阳性反应，干扰尿胆色素检出。原尿中不能被肾小管重吸取的成分是

A.葡萄糖

B.肌酐

C.氨基酸

D.小分子蛋白质

E.K+

『對的答案』B

『答案解析』在近曲小管，滤過液中的葡萄糖、小分子蛋白质、大部分水等被肾小管与集合管重吸取，而肌酐则几乎不被重吸取而随尿排出体外。原尿成分与血浆成分不一样的是

A.葡萄糖

B.肌酐

C.尿酸

D.蛋白质

E.钾的含量

『對的答案』D

『答案解析』原尿除了無血细胞及含很少蛋白质外，其他物质如葡萄糖、氯化物、無机磷酸盐、尿素、肌酐和尿酸等的浓度，渗透压及酸碱度几乎与血浆相似。尿常规分析標本最佳在多長時间内完毕检查

A.30分钟

B.2小時

C.4小時

D.6小時

E.12小時

『對的答案』A

『答案解析』尿標本采集後，一般应在2h内及時送检，最佳在30min内完毕检查。检查尿中管型（cast）最合适標本為

A.初次晨尿標本

B.餐後尿標本

C.8小時尿標本

D.随机尿標本

E.24小時尿標本

『對的答案』A

『答案解析』晨尿即清晨起床後第一次排尿時搜集的尿標本，即為初次晨尿。這种標本尿较為浓缩，可用于肾脏浓缩能力评价。初次晨尿常偏酸性，其中的血细胞、上皮细胞、病理细胞、管型等有形成分，以及如人绒毛膜促性腺激素等的浓度较高。蛋白尿、糖尿检查首选的尿液標本类型是

A.随机尿

B.晨尿

C.餐後尿

D.12小時尿

E.24小時尿

『對的答案』C

『答案解析』餐後尿一般搜集午餐後至下午2時的尿。這种尿標本有助于检出病理性糖尿、蛋白尿或尿胆原。常用作尿液有形成分保留的防腐剂是

A.浓盐酸

B.冰醋酸

C.甲苯

D.甲醛

E.二甲苯

『對的答案』D

『答案解析』甲醛對尿细胞、管型等有形成分的形态构造有很好的固定作用。患者，女，24岁。停經约50天，考虑為妊娠。检查hCG的最佳標本是

A.12h尿

B.晨尿

C.餐後尿

D.中段尿

E.3h尿

『對的答案』B

『答案解析』初次晨尿常偏酸性，其中的血细胞、上皮细胞、病理细胞、管型等有形成分，以及如人绒毛膜促性腺激素等的浓度较高。患者，男，因尿频、尿急、尿痛就诊，细菌學检查時最合适的尿標本是

A.晨尿

B.随机尿

C.清洁中段尿

D.12h尿

E.24h尿

『對的答案』C

『答案解析』中段尿：留尿前先清洗外阴，在不间断排尿過程中，弃去前、後時段的尿，用無菌容器接留中间時段的尿。属于無菌尿中的一种。细菌、紅细胞等颗粒抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒結合成致敏颗粒後，它們与對应抗体（或抗原）在合适電解质存在下，形成肉眼可見的凝集現象，称為凝集反应。第一节凝集反应的特點

凝集试验是一种定性的检测措施，即根据凝集現象的出現与否鉴定成果阴性或阳性；

也可進行半定量检测，即将抗体作一系列稀释，与抗原結合产生凝集的最高稀释倍数作為其效价或滴度。

凝集反应分為两個阶段：①抗原抗体的特异性結合；②出現可見的颗粒凝聚。第二节直接凝集反应

一、原理

细菌、螺旋体和紅细胞等颗粒性抗原，在合适的電解质参与下可直接与對应抗体結合出現凝集。参与凝集反应的抗原称凝集原，抗体则称為凝集素。

二、措施

有玻片法和试管法两类。

（一）玻片凝集试验重要用于抗原的定性分析，短時间便能观测成果。

一般用来鉴定菌种或分型；也用于人类ABO血型的测定。

（二）试管凝集试验是用定量抗原悬液与一系列梯度倍比稀释的待检血清混合，保温静置後，根据每管内颗粒凝集的程度，以判断待检血清中有無對应抗体及其效价。

可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。例如肥达试验、外斐试验、输血時也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。第三节间接凝集反应

间接凝集反应是将可溶性抗原（或抗体）先吸附于合适大小的颗粒性载体表面，然後与對应抗体（或抗原）作用，在合适電解质存在的条件下，出現特异性凝集現象。

一、间接凝集反应的类型

（一）正向间接凝集反应可溶性抗原致敏载体，用以检测標本中待测抗体的凝集反应，称為正向间接凝集反应。

（二）反向间接凝集反应特异性抗体致敏载体，用以检测標本中待测抗原的凝集反应，称為反向间接凝集反应。

（三）间接凝集克制反应先将可溶性抗原（或抗体）与對应的抗体（或抗原）混合，然後再加入抗原（或抗体）致敏的载体颗粒，若出現凝集現象，则阐明標本中不存在相似抗原，抗体试剂未被結合。若存在相似抗原，抗体与之結合，凝集反应被克制，称為正向（或反向）间接凝集克制试验。间接血凝克制试验可用于检测抗体也可测定抗原。

（四）协同凝集反应协同凝集反应与间接凝集反应的原理相类似，但所用载体為金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）。SPA具有与IgG的Fc段結合的特性，因此當這种葡萄球菌与IgG抗体连接時，就成為抗体致敏的颗粒载体。如与對应抗原接触，即出現反向间接凝集反应。协同凝集反应也合用于细菌病毒的直接检测。

二、间接血凝试验

（一）原理：抗原（或抗体）包被于紅细胞表面，成為致敏载体，然後与對应的抗体（或抗原）結合，從而使紅细胞被動的凝聚在一起，出現可見的紅细胞凝集現象。

（二）载体：最常用的為绵羊、家兔、鸡的紅细胞及O型人紅细胞。

致敏的新鲜紅细胞只能使用2～3天。因此在致敏前先将紅细胞醛化，可長期保留而不溶血。常用的醛类有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。紅细胞經醛化後体积略有增大，两面突起呈圆盘状。

（三）致敏：致敏用的抗原或抗体规定纯度高，并保持良好的免疫活性。

（四）血凝试验：可在微量滴定板或试管中進行，将標本倍比稀释，一般為1:64。凡紅细胞沉积于孔底，集中呈一圆點的為不凝集（－）。如紅细胞凝集，则分布于孔底周围。以＋＋凝集（紅细胞沉积于管底呈环状，四面有凝集的小块）的孔為滴度终點。

三、胶乳凝集试验

是一种间接凝集试验，载体為聚苯乙烯胶乳，带有负電荷，可物理性吸附蛋白分子，但這种結合牢固性差。

胶乳凝集试验分试管法和玻片法两种。

四、明胶凝集试验

是一种间接凝集试验，将病毒抗原或重组抗原吸附于粉紅色明胶颗粒上，當致敏颗粒与样品血清作用時，若血清具有抗病毒抗体则可形成肉眼可見的粉紅色凝集。

该措施应用于HIV-1抗体和抗精子抗体检测等。

五、间接凝集反应的应用

（一）抗原的检测反向间接凝集试验用于检测病原体可溶性抗原，也可用于检测多种蛋白质成分。

（二）抗体的检测可用于检测细菌、病毒和寄生虫等感染後产生的抗体，例如间接凝集试验或明胶颗粒凝集试验用于检测抗人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体以诊断艾滋病、胶乳凝集试验用于检测抗溶血素O等。第四节自身紅细胞凝集试验

原理：抗人O型紅细胞的單克隆抗体能与任何种血型的紅细胞結合，但不引起凝集反应，這种抗体与另一特异性抗体（或抗原）连接成，检测標本中的抗原（或抗体）。该反应中的紅细胞是未經致敏的受检者新鲜紅细胞，因此反应中的標本為受检者的全血。自身紅细胞凝集可用于HIV抗体、HBsAg的检测。第五节抗球蛋白试验

又称Coombs试验，检测抗紅细胞的不完全抗体。

直接Coombs试验——检测紅细胞上的不完全抗体。

间接Coombs试验——检测游离在血清中的不完全抗体。

该试验应用于血液病的检测：如自身免疫性溶血性贫血、药物诱导的溶血、新生儿溶血症等。還可分析結合于紅细胞上的不完全抗体的免疫球蛋白亚类。颗粒性抗原在合适的電解质参与下与對应的抗体結合，出現凝集的试验称為

A.正向间接凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.直接凝集反应

D.协同凝集法

E.间接凝集机制反应

『對的答案』C

『答案解析』直接凝集反应：细菌、螺旋体和紅细胞等颗粒性抗原，在合适的電解质参与下可直接与對应抗体結合出現凝集。如下物质属于颗粒性抗原的有

A.破伤風杆菌及其外毒素

B.SRBC和破伤風外毒素

C.SRBC和伤寒沙门菌

D.白喉棒状杆菌和青霉素

E.糖蛋白和脂蛋白

『對的答案』C

『答案解析』颗粒性抗原：如多种细胞、细菌、寄生虫等皆為颗粒性抗原。目前试验室常采用的以肺炎支原体细胞膜成分致敏人工明胶粒子检测血清中對应的抗体属于

A.协同凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.间接凝集克制反应

D.明胶凝集试验

E.直接凝集反应

『對的答案』D

『答案解析』明胶凝集试验是一种间接凝集试验，将病毒抗原或重组抗原吸附于粉紅色明胶颗粒上，當致敏颗粒与样品血清作用時，若血清具有抗病毒抗体则可形成肉眼可見的粉紅色凝集。下述试验措施中，不能用于可溶性抗原检出的是

A.间接血凝试验

B.反向间接凝集试验

C.间接凝集克制试验

D.直接凝集试验

E.间接凝集试验

『對的答案』D

『答案解析』直接凝集试验是细菌、螺旋体和紅细胞等颗粒性抗原，在合适的電解质参与下可直接与對应抗体結合出現凝集。检测抗紅细胞不完全抗体可使用的凝集反应為

A.协同凝集反应

B.间接凝集反应

C.间接血凝试验

D.Coombs试验

E.直接凝集反应

『對的答案』D

『答案解析』Coombs试验，检测抗紅细胞的不完全抗体。有关不完全抗体，下列說法對的的是

A.不能与抗原結合

B.与抗原結合并出現凝集

C.与抗原結合不出現凝集

D.常為IgM类抗体

E.為多克隆抗体

『對的答案』C

『答案解析』不完全抗体能与抗原牢固結合，但因分子量较小，不能与抗原結合并出現凝集。胶乳凝集试验属于

A.沉淀反应

B.直接凝集反应

C.间接凝集反应

D.间接血凝试验

E.补体結合试验

『對的答案』C

『答案解析』胶乳凝集试验是一种间接凝集试验，载体為聚苯乙烯胶乳，带有负電荷，可物理性吸附蛋白分子，但這种結合牢固性差。临床中，不能用直接Coombs试验進行检测的疾病是

A.新生儿溶血症

B.缺铁性贫血

C.自身免疫性溶血症

D.检测母体Rh（D）抗体

E.药物诱导溶血

『對的答案』B

『答案解析』缺铁性贫血是铁剂缺乏导致的，不能用直接Coombs试验检测。临床中進行肥达试验最常采用的措施為

A.正向间接凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.玻片凝集法

D.试管凝集法

E.间接凝集克制反应

『對的答案』D

『答案解析』直接凝集反应试管凝集法可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。例如肥达试验、外斐试验、输血時也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。将VDRL抗原吸附于活性炭颗粒表面检测人血清中的梅毒螺旋体血清反应素试验属于

A.正向间接凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.协同凝集反应

D.直接凝集反应

E.间接凝集克制反应

『對的答案』A

『答案解析』将VDRL抗原吸附于活性炭颗粒表面检测人血清中的梅毒螺旋体血清反应素试验是通過抗原检测抗体，属于正向间接凝集反应。临床中進行外斐试验最常采用的措施為

A.正向间接凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.协同凝集反应

D.试管凝集反应

E.间接凝集克制反应

『對的答案』D

『答案解析』直接凝集反应试管凝集法可以用来协助临床诊断或流行病原调查研究。例如肥达试验、外斐试验、输血時也常用于受体和供体两者间的交叉配血试验。临床输血時用于受体和供体两者间的交叉配血试验属于

A.正向间接凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.协同凝集反应

D.试管凝集反应

E.间接凝集克制反应

『對的答案』D

『答案解析』临床输血時用于受体和供体两者间的交叉配血试验直接用颗粒抗原（细胞）测定抗体，属于试管凝集反应。以自身紅细胞或“O”型紅细胞检测患者血清中冷凝集素的试验属于

A.正向间接凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.协同凝集反应

D.直接凝集反应

E.间接凝集克制反应

『對的答案』D

『答案解析』以自身紅细胞或“O”型紅细胞检测患者血清中冷凝集素的试验是用颗粒抗原（紅细胞）测定抗体，属于直接凝集反应。临床中常用的以紅细胞包被抗原检测人血清中的梅毒螺旋体抗体的试验属于

A.正向间接凝集反应

B.反向间接凝集反应

C.协同凝集反应

D.直接凝集反应

E.间接凝集克制反应

『對的答案』A

『答案解析』以紅细胞包被抗原检测人血清中的梅毒螺旋体抗体的试验是用抗原检测抗体，属于正向间接凝集反应。葡萄球菌——分类

按色素及生化反应

金黄色葡萄球菌：金黄色。

表皮葡萄球菌：白色。

腐生葡萄球菌：柠檬色。

按血浆凝固酶

凝固酶阳性葡萄球菌：金黄色葡萄球菌。

凝固酶阴性葡萄球菌：表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。葡萄球菌——生物學特性

形态与构造

形态：球形。

大小：0.5～1.5μm（中等）。

排列：葡萄状。

染色：G+。

特殊构造：無鞭毛和芽胞，個别有荚膜。

培养特性

营养规定：一般。

气体环境：需氧或兼性厌氧。

温度环境：35～37℃；pH7.4。

菌落特性：一般琼脂平板24～48小時培养，形成直径2～3mm、圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整洁不透明、色素、溶血环。

抗原

蛋白抗原：完全抗原，有种属特异性。結合在细胞壁的肽聚糖部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。

多糖抗原：半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。

抵御力：耐热，耐干燥，耐高盐，是抵御力最强的無芽胞细菌。葡萄球菌——微生物检查及鉴定

標本采集：脓汁、渗出液、血液、尿液、粪便、痰液等。

形态學检查：革兰阳性球菌呈葡萄串状排列。

分离培养：

血標本肉汤增菌35℃24h後或脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物接种血琼脂平板。35℃18～24h，可見經典产生不一样色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明溶血环。

粪便、呕吐物接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板，經35℃18～24h培养，可形成细小菌落，48h後形成經典菌落。生化试验（鉴定）触酶试验血浆凝固酶试验甘露醇发酵试验新生霉素敏感试验金黄色葡萄球菌++++表皮葡萄球菌+-+腐生葡萄球菌+--耐药性检测：

苯唑西林耐药的葡萄球菌（MRS），耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐萬古的金黄色葡萄球菌（VRSA），耐萬古的表皮葡萄球菌（VRSE）。葡萄球菌——致病性及临床意义感染类型疾病致病原因侵袭性疾病（化脓性感染）

皮肤软组织感染：如毛囊炎、疖、痈等血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素全身性感染：如败血症、脓毒血症、骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎等醫院内感染毒素性疾病食物中毒，急性胃肠炎肠毒素、表皮溶解毒素、毒性休克综合征毒素烫伤样皮肤综合征中毒性休克综合征葡萄球菌性肠炎（假膜性肠炎）金黄色葡萄球菌：引起疖、痈、外科伤口、创伤的局部化脓性感染，播散入血後可引起深部组织的化脓性感染；其产生的肠毒素可引起食物中毒，体現為急性胃肠炎。

表皮葡萄球菌：皮肤正常菌群，是导致血培养污染的常見细菌。已成為醫院感染的重要条件致病菌。

腐生葡萄球菌：导致尿路感染的常見病原菌之一。链球菌——分类

按血琼脂平板溶血現象：

甲型（α）溶血性链球菌：草绿色链球菌，条件致病菌。

乙型（β）溶血性链球菌：溶血性链球菌，致病菌。

丙型（γ）链球菌：非致病菌。

按细胞壁抗原（C抗原）分类：A、B、C、D……共18個群，對人致病的90%為A群。

链球菌——生物學特性

形态与构造

形态：球形。

大小：0.8～1.0μm。

排列：链状。

染色：G+。

特殊构造：無鞭毛和芽胞，個别有荚膜。

培养特性

营养规定：较高。

气体环境：需氧或兼性厌氧，5%CO2最佳。

温度环境：35～37℃；pH7.4～7.6。

菌落特性：血清肉汤中，溶血性菌株呈絮状或颗粒状沉淀生長。不溶血菌株均匀浑浊生長。

血琼脂平板上培养可形成灰白色、圆形、透明或半透明，似针尖大小、凸起，菌落周围可出現α-溶血或β-溶血，也可不出現溶血。

抗原性：细胞壁抗原（即C抗原）。

抵御力：不强，對多种常用消毒剂敏感，60℃加热30min即可杀灭。链球菌——微生物检查及鉴定

標本采集：脓汁、咽拭、痰、血、尿等標本。

形态學检查：革兰染色阳性，圆形呈链状排列。

分离培养：

血標本：肉汤培养基，分别置需氧和厌氧环境中增菌，然後接种于血平板，置需氧和厌氧环境中培养。

脓汁和咽拭標本：接种血平板并涂片染色镜检，見形态酷似链球菌，并革兰阳性。上述的培养物經35℃18～24h培养後，观测菌落特性和溶血状况。（甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌可产生α-溶血）生化试验（鉴定）触酶试验杆菌肽敏感试验CAMP试验胆汁七叶苷试验奥普托欣试验胆汁溶菌馬尿酸盐水解试验A群链球菌-+B群链球菌-++D群链球菌-可生長肺炎链球菌-敏感甲型（α）溶血性链

球菌--其他试验：直接检测抗原。链球菌——致病性及临床意义

A群、B群及肺炎链球菌是链球菌属的3种重要致病菌。感染类型疾病病原菌致病原因急性化脓性感染丹毒、痈、蜂窝组织炎A群侵袭性：

透明质酸酶

链激酶

链道酶

M蛋白咽炎、鼻窦炎、中耳炎脑膜炎、产褥热猩紅热变态反应性疾病風湿热和肾小球肾炎毒素：

链球菌溶血素

致热外毒素其他感染亚急性心内膜炎草绿色链球菌（条件致病）新生儿肺炎、脑膜炎和败血症B群链球菌呼吸道和泌尿道感染D群链球菌肺炎链球菌——生物學特性

形态与构造

形态：革兰阳性球菌。

大小：0.5～1.25μm。

排列：矛尖状，钝面成双排列，有時呈短链状。

染色：G+。

特殊构造：有荚膜，無鞭毛，無芽胞。

培养特性

营养规定：较高。

气体环境：需氧或兼性厌氧。

温度环境：35～37℃；pH7.6～8.0。

菌落特性：在肉汤及琼脂培养基上生長不良，在含3%～5%兔或羊血清肉汤中生長良好。在血琼脂平板上可形成灰色扁平、中心凹陷直径為0.5～1.0mm的菌落（脐窝状），周围有草绿色溶血圈。在液体培养基中培养24h，呈均匀混浊，培养時间過長，可因自溶，培养液变澄清，管底沉淀。

抗原性：荚膜多糖抗原。

抵御力：较弱。肺炎链球菌——微生物检查及鉴定

標本采集

形态學检查：革兰阳性矛尖状双球菌。

分离培养：

血液、脑脊液經葡萄糖硫酸镁肉汤增菌後，可呈均匀混浊，并且有绿色荧光。

脓汁或脑脊液沉渣接种于血琼脂，置5%～10%C02环境中，經35℃18～24h培养後观测菌落。

生化试验（鉴定）触酶试验動物试验荚膜肿胀试验奥普托欣试验胆汁溶解菊糖发酵试验肺炎链球菌-敏感+敏感++甲型（α）溶血性链球菌

草绿色链球菌-耐药--肺炎链球菌——致病性及临床意义

致病物质：荚膜、溶血素。

所致疾病：大叶性肺炎、支气管炎。可继发胸膜炎、脓胸，也可引起中耳炎、鼻窦炎、脑膜炎及败血症。<大纲要點>

一、血紅蛋白的构造与功能

二、血紅蛋白异常的检查及其应用

三、血紅蛋白病的试验诊断一、血紅蛋白的构造与功能

（1）血紅素血紅素是Hb、肌紅蛋白、多种酶（如過氧化氢酶）和多种细胞色素的辅基，其合成的場所重要在骨髓内的幼紅细胞和肝细胞线粒体。与临床有关的是尿卟啉、粪卟啉和原卟啉，當卟啉代謝障碍時，血紅素合成不全，并也許产生卟啉病。

（2）珠蛋白人类的珠蛋白肽链有α、β、γ、δ、ε、ζ链；這些肽链按四级构造形成Hb。

（3）生理性血紅蛋白几种正常生理性血紅蛋白在胎儿時期和出生後有明显的不一样。新生儿期内HbF（α2γ2）仍高，後来2～4個月渐下降，1岁左右靠近成人水平。成人血紅蛋白HbA（α2β2）出生後逐渐增多，占95%～97%，HbA2（α2δ2）出生後占1.2%～3.5%。（纯熟掌握）

血紅蛋白构造及功能示意图

正常生理性珠蛋白链的合成二、血紅蛋白异常的检查及其应用

1.血紅蛋白電泳（原理理解，其他掌握）

2.抗碱血紅蛋白测定（纯熟掌握）

3.异丙醇沉淀试验（掌握）

4.紅细胞包涵体试验（掌握）

5.HbA2测定（纯熟掌握）

6.珠蛋白肽链分析（掌握）

7.紅细胞镰变试验（掌握）1.血紅蛋白電泳

原理：根据不一样的血紅蛋白带有不一样的電荷，等電點不一样，在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH不小于Hb的等電點時其带负電荷，電泳時在電場中向阳极泳動，反之，Hb带正電荷向阴极泳動。經一定電压和時间的電泳，不一样的血紅蛋白所带電荷不一样、相對分子质量不一样，其泳動方向和速度不一样，可分离出各自的区带，同步對電泳出的各区带進行電泳扫描，可進行多种血紅蛋白的定量分析。

参照值：

pH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜電泳，正常血紅蛋白電泳区带：HbA＞95%、HbF＜2%、HbA2為1.0%～3.1%。pH8.6TEB缓冲液适合于检出HbA、HbA2、HbS、HbC，但HbF不易与HbA分開，HbH与HbBarts不能分開和显示，应再选择其他缓冲液進行電泳分离。

pH6.5TEB缓冲液醋酸纤维膜電泳，重要用于HbH和HbBarts的检出。HbH等電點為5.6，在pH6.5TEB缓冲液中電泳時泳向阳极，HbBarts则在點样點不動，而其他的血紅蛋白都向阴极移動。临床意义

通過与正常人的血紅蛋白電泳图谱進行比较，可发現异常血紅蛋白区带，如HbH、HbE、HbBarts、HbS、HbD和HbC等。

HbA2增多，見于β珠蛋白合成障碍性贫血，為杂合子的重要试验室诊断指標。HbE病時也在HbA2区带位置处增長，但含量很大（在10%以上）。HbA2轻度增長亦可見于肝病、肿瘤和某些血液病。

β-地贫血紅蛋白電泳成果示意图2.抗碱血紅蛋白测定

原理：又称碱变性试验。胎儿血紅蛋白（HbF）具有抗碱和抗酸作用。其抗碱作用比HbA更强。将待检的溶血液与一定量的NaOH溶液混合，作用1min後加入半饱和硫酸铵中断碱变性反应。HbF抗碱变性作用强，没有变性的存在于上清液中，HbA变性沉淀，取上清液于540nm处测定吸光度，检测出HbF的浓度。此试验也称為碱变性试验，其检测的是抗碱血紅蛋白，除HbF外，HbBarts和部分HbH也具有抗碱能力，需通過電泳鉴别。

参照值：新生儿＜40%，2岁後来至成人＜2.5%。

临床意义：珠蛋白生成障碍性贫血HbF增長，持续性胎儿血紅蛋白症HbF高至100%。

某些疾病時HbF相對增長，包括惡性疾病如放射疗法後骨髓纤维化、惡性肿瘤骨髓转移、急性或慢性白血病、浆细胞瘤；非惡性疾病有再生障碍性贫血、纯紅细胞再障、PNH、未治疗惡性贫血、卟啉病等。3.异丙醇沉淀试验

原理：不稳定血紅蛋白较正常血紅蛋白更轻易裂解，在异丙醇這种能減少血紅蛋白分子内部的氢键的非极性溶剂中，不稳定血紅蛋白更快地沉淀。通過观测血紅蛋白液在异丙醇中的沉淀現象對不稳定血紅蛋白進行筛检。

成果：正常人血紅蛋白液為阴性（30min内不沉淀）。

临床意义：不稳定血紅蛋白（包括HbH）于5min時出現沉淀，20min内沉淀逐渐增長，甚至成絮状或粗颗粒状。血液中具有较多HbF、HbH、HbE時也可出現阳性成果。

4.紅细胞包涵体试验

原理：将煌焦油藍液与新鲜血液一起孵育，不稳定血紅蛋白易变性沉淀形成包涵体。

成果：阴性。

临床意义：不稳定血紅蛋白病、HbH病呈阳性。

紅细胞包涵体形成试验阳性5.HbA2测定

原理：同血紅蛋白電泳。

参照值：1.2%～3.5%。

临床意义：同血紅蛋白電泳。

6.珠蛋白肽链分析

（1）原理：尿素或對氯汞苯甲酸能破壞血紅蛋白的空间构造，血紅蛋白的珠蛋白可被裂解成肽链亚單位，通過聚丙烯酰胺凝胶電泳可分离出各肽链区带。

参照值：HbA裂解後有四条带，可泳出四条带，分别為β、HbA、HbA2、α带。

（2）临床意义：

①若有异常血紅蛋白，则出現异常Hb和异常肽链。

②肽链合成速率检测對地中海贫血诊断有参照价值。

③聚合酶链反应（PCR）扩增結合等位特异寡核苷酸（ASO）探针杂交诊断法（PCR-ASO法）是目前采用的最常用的诊断α-珠蛋白生成障碍性贫血或β-珠蛋白生成障碍性贫血的措施。7.紅细胞镰变试验

（1）原理：在低氧分压条件下，HbS转变為還原状态後溶解度減少，從而聚合成短棒状凝胶使紅细胞变形，呈镰刀状。

成果：阴性，無镰变细胞。

（2）临床意义：阳性見于镰状细胞贫血（HbS病）、HbBart、HbI病可見少許镰状细胞。

镰状紅细胞溶解度減少，左為HbS患者，右為正常對照三、血紅蛋白病的试验诊断

1.血紅蛋白病的定义和分类（纯熟掌握）

2.镰状细胞性贫血（理解）

3.血紅蛋白E病（理解）

4.高铁血紅蛋白血症（HbM）（理解）

5.不稳定血紅蛋白病（理解）

6.珠蛋白生成障碍性贫血（纯熟掌握）

1.血紅蛋白病的定义和分类（纯熟掌握）

一组由于生成血紅蛋白的珠蛋白肽链（α、β、γ、δ）的构造异常或合成肽链速率的变化，而引起血紅蛋白功能异常所致的疾病。血紅蛋白病分类Ⅰ.构造性血紅蛋白病：Hb氨基酸序列变化，引起物理化學功能异常异常血紅蛋白HbS：异常Hb聚合作用，O2亲和力变化高亲和力：紅细胞增多症低亲和力