白膜法制备血小板细节_第1页
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文档简介

目录白膜法制备血小板条件(tiáojiàn)分离白膜分离血小板共十五页1.白膜法制备(zhìbèi)血小板条件献血员条件:随机无要求。运输条件:18-22℃血袋要求及品牌:四联袋血小板专用袋(有透气功能)离心机要求:大型低温离心机(贺利氏6000i)时间要求:采血2小时内开始制作(zhìzuò),6小时内完成制作存储条件:20℃~24℃震荡保存72小时共十五页2.分离(fēnlí)白膜2.1装杯离心⑴对全血进行(jìnxíng)血小板计数,目的是计算出该全血中血小板总量。⑵装杯时需要将血袋竖直塞满离心杯,防止未竖直而出现红细胞挂壁现象。建议多垫水袋或者空袋子。装完后将塞口红细胞敲下去。放入离心机离心.共十五页2.2离心完成后上机操作⑴将离心后好的血液往外拿时一定要注意轻拿轻放,防止白膜层严重晃荡。⑵上机挂袋将全血袋挂在称重(chēnɡzhònɡ)一位置挂杆上,需要注意的是血袋不能紧贴住设备前壁,这样更利于分离白膜层。共十五页

2.3程序控制第一步分浆步骤:利用光感控制,红细胞液面上升至M1

光感位置停止,分浆步骤结束。第二步分离白膜步骤:利用重量控制,白膜重量达到

44g,分离白膜步骤结束。第三步排气步骤:利用时间控制,目的是将血浆袋内的空气排除至全血袋内。第四步回浆至白膜袋:利用重量控制,白膜重量增加

39g血浆,回浆步骤结束。以上为整个分离白膜步骤,白膜量可以根据实际情况进行调试,以达到最佳效果,实现(shíxiàn)白膜定量。共十五页2.4制备完成后对白膜的处理(chǔlǐ)

将白膜袋静置在22℃左右室温条件下一小时。目的是使白膜块解聚。解聚完成后装杯进行第二次离心。共十五页

2.5离心参数的调整方法⑴肉眼观察(guānchá)

离心后的血液从离心机取出来后,首先对离心效果有一个大概的判断,先观察白膜层:如果白膜层聚集太厚,说明离心力过高;反则离心力过轻。如图:⑵对血浆进行血小板计数

对血浆进行血小板计数,如果血浆中血小板总量多则说明离心力轻;根据以上两个判断就可以正确调整白膜离心参数。共十五页3.分离(fēnlí)血小板

3.1装杯离心

因为白膜量非常少,所以装杯的时候(shíhou)一定要注意需要用硬东西将白膜竖起来离心,如图:

同样道理,将导管口红细胞敲下去,然后进行离心。共十五页

3.2离心完成后上机操作⑴将离心后好的白膜往出拿时一定要注意轻拿轻放,防止红细胞层晃荡。稍微晃荡起来的可以挂在设备上沉淀(chéndiàn)一会,待红细胞层清晰时再开始执行程序。如图:⑵挂导管时尽量使A卡钳导管留的长点,这样血小板袋离A卡钳距离缩短。因为程序控制是使用的卡钳光感控制,这样可以尽最大量的分离血小板。共十五页

3.3

程序控制分离(fēnlí)血小板步骤采用的是光感和重量联合控制:程序中设定两个控制条件:血小板的重量达到60g;红细胞上升到E1光感位置(A卡钳光感)。两个条件有一个满足时,程序结束。并且程序中都设置流速调节控制,这样做既保证了血小板重量的准确,同时控制了血小板中红细胞的混入量。共十五页3.4离心参数调整⑴肉眼观察

离心后的血液从离心机取出来(chūlái)后,首先对离心效果有一个大概的判断,先观察分层:如果能看出来(chūlái)轻微白膜层,说明离心力有点重或者是离心时间长,如果发现血小板中悬浮有红细胞,则证明离心力轻或者离心时间过短了。⑵对残留红细胞进行血小板计数

对残留的红细胞进行血小板计数,如果红细胞中血小板总量多,则证明离心力大或者离心时间长;⑶对成品血小板进行计数对成品血小板计数,血小板中红细胞的量超标的话说明第二次离心力过轻。结合以上三种判断方法就可以正确调整第二次离心参数。

共十五页

3.4

血小板得率的计算(jìsuàn)成品血小板总量=成品血小板计数×成品血小板体积;全血血小板总量=全血血小板计数×全血体积;血小板得率=(成品血小板计数×成品血小板体积)÷(全血血小板计数×全血体积)血小板中红细胞总量=血小板中红细胞计数×血小板体积共十五页3.5合格血小板要求(yāoqiú)血小板容量为25-30ml/200ml;50-60ml/400ml.

血小板含量≥2.0X1010/200ml;4.0X1010/400ml.红细胞混入量≤1.0X109/200ml;2.0X109/400ml

共十五页3.6血小板储存

将制备好的成品血小板放置(fàngzhì)在血小板震荡箱中保存。保存温度为18-24℃,保存72小时。

共十五页内容(nèiróng)总结目录。时间要求:采血2小时内开始制作,6小时内完成制作。⑴将离心(líxīn)后好的血液往外拿时一定要注意轻拿轻放,防止白膜层严重晃荡。第四步回浆至白膜袋:利用重量控制,白膜

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