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DB34DB34/T2850—2017番鸭细小病毒PCR检测方法DetectionMethodofMuscovyDuckParvovirusbyPCR安徽省质量技术监督局发布I1番鸭细小病毒MuscovyDuckParvovirus属于细小病毒科、细小病毒亚科、依赖病毒属,基因组为线性、3.1.2台式低温高速离心机,温控范围:-4℃~25℃。3.1.7水浴锅,温控范围:37℃~100℃。3.1.8微量移液器,可调量程:0.5~10ul,10~103.2.9磷酸盐缓冲液(PBS,0.01mol/L,p2GCTCTTTGCTTCAGTTGCTC-3’,下游引物53.2.14阳性对照样品:MDPV接c)MDPV接种的番鸭胚尿囊液),3当阳性对照出现861bp扩增条带,阴性对照未出现目的条带时,实验结果成立。被检样品出现861bp扩增条带为MDPV核酸阳性,未出现861bp扩增条带的样品判为MDPV核酸阴性。图1为检测结果图示。MM1234bp1、2,阳性样品;3,阳性对照样品;4,阴性对照样品。4A.1细胞裂解液的配制A.2.10.2mol/L磷酸氢二钠溶液:称取磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O)71.6g,先加适量灭菌双蒸水A.2.20.2mol/L磷酸二氢钠溶液:称取磷酸二氢钠(NaH2PO4•H2O)27.6g,先加适量灭菌双蒸水溶A.2.3量取0.2moL/L磷酸氢二钠溶液36mL,0.2mol/L磷酸二氢钠溶液14mL,称取Nag,用灭菌双蒸水溶解稀释至1000mA.350×TAE缓冲液(贮存液)配制Tris碱242g,冰醋酸57.0mL,0.5mol/LEDTA(pH8.0)100mL搅拌溶解后,用Na至8.3,加灭菌双蒸水定容至1000mL,常温保持备用。A.41%琼脂糖凝胶的配制
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