9.-植化方法学-鞣-质

九、鞣质一、概述鞣质又称单宁（tannin），是存在于植物界的一类比较复杂的多元酚类化合物，性质不稳定，易变色沉淀。鞣质能与蛋白质相结合形成不溶于水的沉淀，故能与生兽皮中的蛋白质结合形成致密、柔韧、不易腐败又难以透水的皮革。鞣质具有收敛止泻作用，用于治疗急性肠胃炎的鞣酸蛋白是鞣质与蛋白质的结合物，服用后在胃内不分解，至小肠分解出鞣质产生收敛作用。2二、化学分类1.可水解鞣质由酚酸和多元醇通过苷键或酯键形成，可被酸、碱、酶催化水解。2.缩合鞣质是羟基黄烷类化合物以碳-碳键缩合而成，不能被水解。缩合鞣质的水溶液与空气接触或久置能进一步缩合成分子量更大、难溶于水的暗红色沉淀，称为鞣红。如切开的水果放置后变红棕色。3.新型鞣质兼有上述两者结构和性质的鞣质。34肉桂鞣质C256三、提取分离1.样品预试TLC后以茴香醛-硫酸显色，缩合鞣质类显橙色；可水解鞣质不显色。但可水解鞣质遇亚硝酸钠-醋酸显色剂后显棕或黄色。2.提取溶剂常用50%丙酮水溶液提取，工业常选用水作为提取溶剂，避免用铁、铜等金属容器。73.分离纯化①溶剂法鞣质水液加入乙酸乙酯萃取；鞣质乙酸乙酯溶液加入乙醚得沉淀。②沉淀法醋酸铅、碳酸铅、氢氧化铜或氢氧化铝均能与鞣质结合形成不溶于水的沉淀。鞣质水溶液中分批加入明胶溶液，滤取沉淀，用丙酮回流，鞣质溶于丙酮，蛋白质不溶于丙酮而析出。8③层析法SephadexLH-20常用于分离鞣质，水洗脱时可得到糖类、氨基酸等；10~30%甲醇水洗脱时主要得到酚性苷类如黄酮苷；40~80%甲醇水洗脱时可以得到分子量300~700的鞣质；80~100%甲醇水洗脱时可以得到分子量700~1000的鞣质；50%丙酮水洗脱可得到分子量大于1000的鞣质。MCI-CHP-20P柱层析HPLC制备柱色谱9四、理化性质1.分子量多在500~3000之间，多有邻位酚羟基，易被氧化。2.极性较强，可溶于水、乙醇、丙酮等强极性溶剂，也可溶于乙酸乙酯，不溶于氯仿、乙醚等小极性溶剂。3.水溶液显弱酸性，能与生物碱结合形成不溶或难溶于水的沉淀，可用作生物碱的沉淀试剂。4.与稀酸共沸，缩合鞣质成鞣红沉淀；可水解鞣质水解成酚酸。105.缩合鞣质的降解缩合鞣质分子中黄烷间的碳-碳键不能被酸、碱或酶催化断裂，但可被苄硫醇所断裂。6.可水解鞣质的降解可水解鞣质能受酸、碱、鞣酶的催化而水解成小分子，水解程度随水解条件而异。在鞣酶催化下只发生选择性水解。111213五、生物活性1.鞣质具有收敛性，内服可用于治疗胃肠道出血、溃疡等症。外用于创伤、灼伤的创面，可使创伤表面渗出物中的蛋白质凝固，形成痂膜，可保护创面，以减少分泌和血浆损失，还可防止细菌感染。2.鞣质能凝固微生物体内的原生质，故有一定抑菌作用，有些鞣质还有抗病毒作用。如贯众对多种流感病毒均有较强的抑制作用，该作用与其所含鞣质有关。143.鞣质可用作生物碱和一些重金属中毒时的解毒剂，因为它们能结合形成沉淀，减少被机体的吸收。含缩合鞣质量较高的罗布麻水提液喷于烟丝上制成低毒香烟，是因为鞣质与尼古丁相结合形成难以挥发的络合物，减少了烟雾中尼古丁的含量。4.因为鞣质具有较多邻位酚羟基的结构，所以具有很强的还原性，在生物体内具有强的清除超氧自由基的作用而延缓衰老。5.降血压作用。15六、波谱特征1.氢谱缩合鞣质儿茶素单体H4的δ值一般位于2.5~3.2ppm，当4位有另一儿茶素取代时，受芳环A影响，该H4的δ值将向低场位移至4.5～4.8ppm。可水解鞣质没食子酰基上的二个对称芳氢呈一个单峰，位于7.1～7.3ppm。1617182.碳谱末端儿茶素的C2位于最低场，约78～79ppm，末端儿茶素的C3位于较高场，约66ppm，根据C2或C3所出现的峰数可辅助判断缩合鞣质的聚合度。193.质谱常采用FAB-MS等软电离质谱测定分子量，且负离子质谱比通常