毒理学-期末复习

毒理学复习题季晖一.名词解释成外源化学物：在人类生活的外界环境中存在，可能与机体接触病进入机体，在体内呈现一定的生物学作用的化学物质，又称为“外源生物活性物质”，包括药物、农药、食品添加剂、化工产品及环境化合物等。蓄积毒性：当较长时间连续反复给药，或者说给药的时间间隔和剂量超过机体消除药物的能力时，出现药物进入机体的速度或总量超过排出的速度或总量的现象。这时，药物就有可能在体内逐渐增加并贮存起来产生毒性。选择毒性：指一种化学物质只对某种生物产生损害作用，而对其他生物无害，或只对机体内某一器官发挥毒性，而对其他组织器官不具毒作用。代偿能力：当体内组织或器官局部发生病变时，病变处功能降低，此时非病变出组织通过自身功能的加强来弥补病变处功能不足的能力最大无作用剂量：指药物在一定时间内，按一定方式与机体接触，按一定的检测方法或观察指标，不能观察到任何损害作用的最高剂量中毒阈剂量：是指能使机体的某项指标发生异常变化所需的最小剂量，即能使机体开始出现毒性反应的最低剂量。急性毒作用带：用于表示一种药物的急性毒性，用药物的半数致死量与急性毒性最小作用剂量的比值表示。慢性毒作用带：用药物的急性毒性最小作用剂量与长期毒性最小有作用剂量表示，亦可用于表示一种药物的长期毒性。QAU：质量保证部门，指负责保证安全性研究机构的各项研究工作符合本规定要求的机构。SOP：标准操作规程，为得到准确的实验数据，要求正确而且统一的操作，对所有实验操作应以SOP为标准，是GLP中最重要的工作软件。一.名词解释近似致死量：是指介于最小致死量和最大非致死量之间的剂量SPF动物：是指无特定病原体动物，指机体内无特殊的微生物和寄生虫存在的实验动物。移码突变：指DNA多核苷酸链上碱基序列丢失一个或几个碱基，或插入一个或几个化合物分子，结果使突变位点以下的碱基序列发生变更，以致使三联密码转录和翻译时，发生较多遗传信息改变的基因突变类型。转换型突变：是指DNA多核苷酸链上的碱基中，嘌呤互相取代或嘧啶互相取代所引起的基因突变。可导致转录时的一个RNA密码子改变和翻译时的多肽链的一个氨基酸的改变。染色体畸变：是指某一个或几个染色体结构或数目发生改变的突变碱基类似物：有些物质（包括药物）的化学结构与DNA链上四种天然碱基非常相似，称为碱基类似物。多倍体：正常的生殖细胞染色体为单倍体，体细胞为双倍体，在突变细胞中，染色体可以成整倍的发生变化，以致形成三倍体四倍体等，二倍体以上统称为多倍体。间接致突变物：是指那些本身不引起突变，必须在体内经代谢活化后才具有致突变作用的药物。微核：染色体发生畸变导致断裂，断裂的碎片在分裂间期留在子代细胞中形成的规则的圆形或椭圆形结构的小块物质，又与他比普通细胞核小，故称微核。程序外DNA合成二.问答题:1.影响化学物毒性作用的因素有哪些?答：1)药物理化性质2）种属和个体差异3）药物赋形剂，添加剂4）给药途径5）环境因素2.损害作用具有哪些特点?答：损害作用的特点如下：机体的功能形态、生长发育过程受到严重影响，导致寿命缩短功能的容量下降对外界不利因素的易感性增强，对应激状态的代偿能力下降维持内环境稳态能力下降且为不可逆剂量增加，而代谢转化消除减少酶受抑制或者活力发生改变天然底物浓度上升，负荷试验中对专一性底物代谢能力下降3试述毒性作用的分类。（1）局部作用，全身作用（2）可逆作用，不可逆作用（3）速发作用，迟发作用（4）变态反应（有接触史，不是典型的S型剂量反应曲线），特异质反应（遗传性异常反应）4.试述毒性作用的常用参数。毒性上限参数：在急性毒性实验中以死亡为终点的各项毒性参数。包括①绝对致死量：LD100或LC100只引起一群实验动物全部死亡的最低剂量或浓度。②半数致死量：LD50或LC50③最小致死量（MLD）或浓度(MLC)指药物在最低剂量组的一群实验动物中仅引起个别动物死亡的剂量或浓度。④最大耐受量或最大耐受浓度：LD0或LC0指药物在实验动物中不引起实验动物死亡的最大剂量或最大浓度。⑤致死剂量或致死浓度：LD或LC笼统的表示药物对实验动物引起死亡的剂量或浓度。毒性下限参数：有害作用阈剂量及】最大未观察到有害作用的剂量。包括①急性阈剂量或阈浓度，指一次接触药物所得的阈剂量或阈浓度②慢性阈剂量或阈浓度：指长期连续接触药物所得的阈剂量或阈浓度③最大无作用剂量或浓度：ED0或EC0指药物在一定时间内，按一定方式与机体接触，按一定的检测方法或观察指标，不能观察到任何损害作用的最高剂量。④中毒阈剂量或中毒阈浓度：即最小中毒量，一群实验动物中只有少数个别动物某项生理指标改变。5.A型损害性反应与B型损害性反应有何异同?答：A型为一过性的，是常用剂量下出现的药理作用的延伸，具有可预测性，剂量相关性，发生率高，死亡率低，可通过调整剂量来降低或避免。B型为完全异常的反应，不可预测，通常与剂量无关，发生率低但死亡率高，如发生则需停药6.试述LD50测定的意义。答：LD50是药物重要特征性参数之一有助于计算其他相关的毒性参数为药物急性毒性分级依据为长期毒性试验、特殊毒性试验和临床药理评价提供指标及剂量设计依据为毒效应靶器官确定和机制分析提供线索作为生产过程中的质量监控的检测措施7.试述实验动物按微生物控制标准的分级.答：分为五级：国内：普通级动物 CV，清洁级动物CL，无特定病原体动物SPF，无菌动物GF，国外：清洁级动物CL，无特定病原体动物SPF，无菌动物GF，悉生动物8.试述长期毒性试验中主要的血液生化学指标及其意义.答：主要有氨基转移酶：ALT，其含量与肝细胞病变程度大致平行，对于判断肝损伤有重要意义；AST，在心肌中含量较高，可用于辅助诊断心肌炎、心肌梗塞等疾病。总胆红素：当肝胆管阻塞或肝细胞受损的情况下，胆红素会返流入血液出现高胆红素血症而使组织黄染。碱性磷酸酶：成骨细胞活性增强，肝功能损伤，胆汁淤积时该酶活性升高，而营养缺乏时下降。尿素氮：指示肾功能损伤、痛风和肌肉损伤等。乳酸脱氢酶：根据同工酶谱分析可判断什么组织损或器官出现损伤血糖：相关激素水平和腺体功能。蛋白：包括白蛋白，球蛋白，血红蛋白电解质：钠，钾，钙，氯，磷酸根离子等肌酸磷酸激酶：肌肉异常、心肌梗塞和肺循环异常时改酶增高R-谷氨酰转肽酶：肝胆疾病指标9.基因突变有哪些常见的类型?点突变：置换型和颠换型突变；移码突变10.Ames试验原理及方法评价.（P190）原理：组氨酸缺陷型的鼠伤寒沙门氏菌在缺乏组氨酸的培养基上不能生长，但在加有突变原的培养基上培养，则可使突变型产生回复突变成野生型，即恢复合成组氨酸的能力，能在缺乏组氨酸的培养基上生长成菌落，通过计数菌落出现数目就可以估算药物诱变性得强弱。方法评价：可靠，我国新药审批办法推荐其为致突变试验首选方法。但对于有明显杀菌作用的药物来说不适合。11.Ames试验菌株鉴定及试验方法.答：1）组氨酸营养缺陷鉴定2）rfa鉴定（结晶紫杀伤抑菌圈）3）uvrB缺失鉴定（紫外线敏感试验）4）R因子测定（氨苄青霉素耐药试验）5）自发回变数测定。12.微核试验的原理及方法.P197原理：骨髓细胞经致突变物作用，染色体发生畸变断裂，在子代细胞中形成微核，发育成骨髓红细胞后检察微核出现率方法：一般选择NIH小鼠，每组10只雌雄各半的性成熟动物，分高（1/2LD50）、中、低三个剂量给药，给药途径尽量与临床拟用途径相同，以溶酶为阴性对照，环磷酰胺为阳性对照，进行试验，骨髓采样，骨髓直接涂片法涂片，观察和鉴别。13.果蝇伴性隐性致死试验的原理及结果判定.P200，SLRL试验原理：阴性基因在伴性遗传中的交叉遗传特性，即雄性果蝇X染色体的突变传给F1代雌性果蝇，F1雌性果蝇为杂合子不能表达，传给F2代雄性果蝇时表达出来，由于其为隐性致死性突变，所以F2代雄性果蝇数目比雌性果蝇少一半。结果判断：将受试染色体数，给药的和无生育力的雄性数，F2代培养群数目，每一生殖细胞期检测的带有致死基因的染色体数按下式计算致死突变率：致死突变率%=致死管数/受试染色体数*100%。当致死率大于自然突变率的2倍并有剂量关系时记阳性；在F2代，有一支培养管中，若雌、雄合计有20只以上未发现有雄蝇者为阳性，反之，有2只以上雄蝇者为阴性；在F2代中，有一支培养管中，若雌雄果蝇合计少于20只时或至少有一只雄果蝇者为可以，需观察F3代；仅存雌雄果蝇亲本而无子代者为不育。14.啮齿类动物显性致死试验的原理。如何鉴别活胎、早期死亡胚胎和晚期死亡胚胎？原理：哺乳动物生殖细胞在减数分裂期和受精期最易发生突变，突变后失去与异性生殖细胞结合的能力，或者结合后发育成不正常的胚胎，以致使总着床数减少或早期胚胎死亡及畸胎等现象。通过观察计数算出突变指数=（总死胎数/总着床数）*100以及显性致死率=（1-试验组的平均生存胎仔数/阴性对照组的平均生存胎仔数）*100%可判断药物致哺乳动物显性致死的能力。鉴别：活胎：成型，色鲜红，有自然运动，机械刺激后有运动反应。早期死亡胚胎：胎盘小，不明显，颜色紫红，无自然运动。晚期死亡胚胎：有明显完整的胎盘，呈灰暗色，无自然运动。15.SOS显色试验的原理及评价.原理：通过直接监测DNA受损后的SOS修复反应来检测遗传毒性，SOSchromotest是一种特异性的β-半乳糖苷酶诱导实验，一旦DNA损伤，组成该系统的RecA蛋白即转化为RecA蛋白水解酶，此酶分解阻遏蛋白，使受阻遏的SfiA基因去阻遏，并启动lac基因转录翻译，产生Gal，此酶分解邻硝基苯β-D-半乳糖苷ONPG,产生黄色可溶性物质。评价：（1）快速，方便，7h（2）灵敏，被测试细胞只要产生或不产生SOS反应，测OD值（3）准确，直接，测定的是遗传物质对细胞原发的直接反应产物，阳性结果可信。朱燕老师部分名词解释肯定的人类致癌物：有足够的流行病学证据，支持因素接触与癌症发生的因果关系，这样的一类致癌物叫肯定的人类致癌物。非遗传毒性致癌物：部分致癌物用常规的致突变试验不能检出致突变性，但可促进细胞增殖诱发肿瘤。由于其不直接作用于遗传物质，称为非遗传毒性致癌物，如免疫抑制剂，石棉等。直接致癌物：不需代谢活化即具有亲电子活性，能与亲核分子（包括DNA）共价结合形成加合物而诱导细胞癌变，如致癌性烷化剂和金属致癌物。间接致癌物：需在体内代谢活化后才具有致癌活性。活化前的间接致癌物叫前致癌物，经活化代谢后的产物称为终代谢物，在活化过程中的中间产物叫近似致癌物。促癌物：本身不具有致癌性，单独作用不会诱发肿瘤，但当它与致癌物共同作用，或在致癌物作用之后，反复作用于细胞，具有促进启动细胞发展成为肿瘤的作用。原癌基因：细胞中存在的核酸水平及蛋白质产物水平与病毒癌基因高度相似的DNA序列称为原癌基因。抑癌基因：拮抗癌基因作用的一类基因，在正常细胞中能抑制细胞增殖和促进细胞分化。下丘脑-垂体-性腺轴：下丘脑弓状核分泌促性腺激素释放激素GnRH经垂体门脉系统至腺垂体远侧部，刺激腺垂体远侧部的黄体生成素细胞和卵泡刺激素细胞分别分泌黄体生成素LH和卵泡刺激素FSH。FSH、LH作用于性腺：MaleFemaleFSH促进曲细精管的增生和精子的成熟使卵泡成长发育LH刺激睾丸间质细胞发育和分泌雄激素使卵泡分泌雌激素，引起排卵和维持黄体并分泌孕激素血液中性激素和促性腺激素的水平可反馈性（负反馈）作用于大脑皮质、下丘脑和垂体的特定部位，影响它们的分泌活动，是精子或卵子的生成正常，并维持第二性征。反应停事件：1956年联邦德国生产了一种新的镇静剂，即反应停（沙利度胺），经常规毒理学方法检测，认为是安全的。该药上市后，广泛用于早孕反应。此后，陆续出现反应停致畸的事件，主要是短肢样畸形，称“海豹胎”。到1961年底，全世界由此致畸的婴儿达1万例以上。对药物致畸作用的警惕始于此，此后，美国和欧洲相继立法，把药物致畸作用的研究作为药物安全性评价的一部分。细胞凋亡：在一定的生理或病理条件下，细胞遵循自身的基因程序，激活核酸内切酶，自动结束生命过程，最终细胞从群体脱离，或裂解为若干凋亡小体，被其他细胞所吞噬。（细胞生物学中的定义：细胞凋亡是多细胞生物在发育过程中，一种由基因控制的主动的细胞生理性自杀行为。）激素干扰物：又叫内分泌干扰物。是指一类能干扰激素代谢而产生不良反应的化合物。植物性拟雌激素：植物中的很多天然物质具有拟雌激素活性，这些物质通过食物及饲料进入人体及动物体内，对机体产生影响。如很多黄酮类物质。问答题肿瘤的致病因素：⑴环境中致癌因素（环境化学物质如内分泌干扰物、物理性致癌因素如电离辐射、生物性致癌因素如病毒）；⑵医源性致癌如x射线等；⑶生活方式（吸烟、喝酒、饮食、化妆品）；⑷职业因素；⑸病理因素如慢性炎症；⑹社会心理因素。影响肿瘤发生发展的内在因素有哪些？遗传因素：对于单基因常染色体显性遗传疾病如视网膜母细胞瘤等，遗传因素其决定作用。对于单基因常染色体隐性遗传疾病如着色性干皮病，遗传因素不直接决定肿瘤的发生，仅决定肿瘤的易感性。但是大多数情况下，遗传因素和环境因素在肿瘤的发生中起协同作用，而且环境因素更加重要。免疫因素：当免疫缺陷时，诱发肿瘤的敏感性明显增高。宿主和肿瘤间的作用是相互的，一方面，宿主可以通过识别肿瘤抗原，启动免疫机制限制与杀灭肿瘤；另一方面，肿瘤可以破坏宿主免疫功能，从而免疫逃逸，得以继续增殖生长。激素因素性别与年龄因素种族因素化学致癌物代谢活化的特点有哪些？代谢以氧化过程为主。代谢活化主要在肝脏，但也可在多种组织、器官中进行，有组织器官特异性（P450氧化酶系在大多数组织细胞中都存在，某些组织细胞还含有特殊的酶）。代谢酶的活性存在种属、品系、家族和个体差异，个体间可相差30～100倍。简述DNA修复和化学致癌的理论。化学物可与DNA的碱基，戊糖或磷酸发生反应，形成稳定的等价加合物，也可迅速导致碱基脱氨或水合作用以及DNA断裂、碱基丢失、DNA双螺旋扭曲变形，引起移码突变，DNA链内交联等。尽管DNA易受到亲电子物质和自由基的攻击，但是DNA是相对稳定的，原因在于在长期的进化过程中，细胞形成了一套有效的DNA修复系统，以保持遗传稳定性和正常功能。但是DNA聚合酶在修复过程中并非绝对按照其模板上的顺序，因此存在错误配对形成突变的可能，特别是在切除大片断的时候（Bp>20）。DNA损伤如果不能得到修复或修复不正确，损伤可以经DNA复制传到子代细胞中，引起基因突变和细胞转化，成为发生肿瘤的潜在危险。发生基因突变的可能性有如下几种：①修复发生错误；②当DNA损伤不被修复系统所识别或损伤水平太高，超过了修复的能力,DNA损伤不会被修复；③当修复系统异常时，如存在DNA损伤修复缺陷时，某些损伤不会被修复。综上所述：化学致癌物作用于机体能否引发癌症，既取决于致癌物对DNA的损伤，也取决于机体对损伤DNA的修复能力。简述细胞凋亡和化学致癌理论。细胞凋亡是在一定的生理或病理条件下，细胞遵循自身的基因程序，激活核酸内切酶，自动结束生命的过程，最终细胞从群体脱离，或裂解为若干凋亡小体，被其他细胞所吞噬。以p53为例：DNA受损时，p53基因编码的蛋白质水平升高，阻断细胞周期的循环，使细胞停留在G1期，使DNA在复制之前有充分的时间修复。当DNA受损严重无法修复时，p53蛋白持续升高并诱导细胞凋亡，以免受损DNA传入子代细胞。突变后的p53会出现相反作用，DNA损伤时细胞周期不能暂停，使受损DNA无充分的修复时间；也不引起细胞凋亡，如此继续复制，导致突变细胞增多，为癌变创造了必要的条件。细胞凋亡的存在可抑制肿瘤的发生和发展，一旦细胞凋亡被抑制，可使正常细胞转化为肿瘤细胞的机率增加。简述化学致癌三阶段理论。化学致癌至少有三个阶段：启动阶段、促癌阶段和进展阶段。启动阶段：化学致癌物作用于DNA，造成DNA损伤，DNA损伤经细胞分裂增殖(一到数次)被固定下来，导致基因突变，使细胞发生了不可逆的遗传性改变，但此刻细胞并不表现出肿瘤细胞的生物学特性。启动细胞不一定都能存活下来，其他转归：①被机体的免疫系统清除；②通过细胞凋亡而消失；③在组织稳态因素控制下，保持休眠状态。促癌阶段：促癌物通过特定受体而影响信息传递，从而可逆地增加或减弱基因表达，促进已突变的启动细胞迅速分裂增殖，形成良性肿瘤。进展阶段：在肿瘤形成的促癌阶段中或之后，细胞表现出复杂的基因改变（染色体的结构变异、大段丢失、易位或嵌入），细胞形态或行为发生变化,如生长加速、高度的侵犯性、转移能力、对激素的反应性以及生化、免疫性能改变等，从而获得了恶性肿瘤细胞的特性。7.动物长期致癌试验耗费人力、物力较大，时间较长，目前的策略是怎样的?长期致癌试验耗费人力、财力、物力较大，时间较长。在长期动物试验前，可用致突变试验作初筛，必要时进行短期致癌试验，短期筛检试验阳性的受试物，若有重要使用价值，应安排哺乳动物长期致癌试验。根据结果，推测对人致癌的危险性。检测药物致癌的方法有：致突变试验：比如Ames试验，SOS显色试验，UDS试验，果蝇伴性隐性致死试验，微核试验等。短期致癌试验：如哺乳动物培养细胞恶性转化试验和动物短期致癌试验。动物长期致癌试验：又叫哺乳动物终生致癌试验。最具说服力的是动物长期致癌试验。8.试述动物长期致癌试验的基本方法（试验动物、年龄、数量、性别、给药途径、剂量选择和分组、试验期限、观察与检查等方面的原则内容）。⑴试验动物的选择：种属：选用两种啮齿类的动物，可选用大鼠，小鼠等。品系：要选择敏感、自发肿瘤低、生活力强的品系。⑵动物年龄：选用刚断奶的幼年动物，不迟于出生后7~9周。幼年动物肝药酶和免疫系统的发育还不完善，对受试物较敏感。可保证有较长的试验观察期，使致癌性较弱，潜伏期较长的致癌物有充分发挥作用的机会。⑶动物数量：每组动物至少雌雄各50只。⑷动物性别：为了接近人类实际情况，应选用同等数量的雌、雄两性动物。⑸给药途径：原则上与临床拟给药途径相同。口服给药可采用喂饲法和灌胃。⑹剂量选择和分组：至少设高中低三个剂量组。设立高剂量的原则：一般先进行短期预试验，根据其结果，同时参考长期毒性试验结果来确定高剂量。低剂量：临床拟用剂量的１~３倍。中间剂量与高低剂量成等比级数关系。另设空白对照组和溶媒或赋形剂对照组。必要时可设阳性对照组。一般选用与受试物结构相近的已知致癌物作阳性对照物。⑺试验期限：动物正常寿命的大部分时间或终生。另外，试验开始后不久若发生大量动物死亡时，应提早结束试验。⑻观察与检查：一般观察，大体解剖和病理组织学检查⑼统计分析：肿瘤发生率和潜伏期⑽结果判断：给药组肿瘤发生率显著高于对照组自发肿瘤率；给药组肿瘤发生的潜伏期显著短于对照组；给药组肿瘤发生部位多于对照组；给药组肿瘤类型与对照组不同（对照组应有历史对照资料）；符合上述情况之一，并有统计学意义时可判为阳性，如有明显的剂量反应关系，结果更可靠。⑾结果评价：从动物实验结果推论对人体致癌性应极为慎重。一种动物试验结果为阳性时，预示该受试药对人可能有致癌潜力。两种动物试验结果皆为阴性时，可初步认为该受试药对动物和人都没有致癌性。生殖与发育？生殖是人和哺乳动物繁衍种族的生理过程，包括配子的产生、配子的释放、性周期和性行为、卵细胞受精、受精卵卵裂、胚泡形成、受精卵着床、胚胎形成、胚胎发育、器官形成、胎儿发育、分娩和哺乳、出生后发育直至性成熟，又繁殖下一代。生殖过程是一个连续的过程，分为生殖（从配子产生到受精卵形成止）和发育（从受精卵形成到性成熟止）两个方面，但又不能截然分开。生殖是对亲代而言，发育是对子代而言。胚胎发育分为几个时期？哪个时期对致畸物最敏感？⑴着床前期：受精卵在着床前迅速分裂呈一个中空的球状物，即胚泡（约含1000个干细胞）。人类为最初的11~12d。⑵胚胎期（器官形成期）：细胞频繁分化、移行，形成大部分器官。人类为妊娠第3~8w。此期对致畸物特别敏感，容易诱发器官结构畸形，又称致畸敏感期。⑶胎儿期：是胎儿生长和功能成熟期。人类是妊娠第9~41w。此期对致畸物不敏感，但可诱发生长迟缓和功能缺陷。⑷新生儿期：是新生儿对子宫外生活适应的时期。组织器官继续发育成熟，功能继续完善。人类是从出生到出生后1m。化学物可通过母乳对新生儿造成损害，主要影响生长和功能成熟。发育毒性主要表现在哪些方面？⑴死亡：①着床前期死亡：在人类不易察觉；动物形成早起吸收胎。②胚胎期死亡：在人类表现为流产；动物形成晚期吸收胎。③胎儿期死亡：死胎。⑵畸形：器官形态、结构的异常，包括外观、内脏和骨骼畸形。⑶生长迟缓：胎儿的生长发育较正常胎儿缓慢（胎儿的平均体重低于正常对照组胎儿平均体重2个标准差），表现在体重、身长和骨骼钙化等方面。⑷功能发育不全：生化、生理、代谢、免疫、神经系统、行为等方面的缺陷或异常。某些功能缺陷要等出生后一定时间才能发现。激素干扰物的作用方式有哪些？⑴作为类固醇受体的配体起作用；⑵阻断类固醇受体；⑶改变类固醇激素代谢酶；⑷扰乱下丘脑、垂体激素释放。影响药物的致畸因素有哪些？⑴种属差异和个体差异。⑵接触药物的时间（是否会？是什么？）。器官形成期（胚胎期）最敏感。⑶接触药物的剂量：典型的致畸作用的剂量-效应曲线斜率很大，从“无作用”到“100%胚胎死亡”，剂量仅相差2~4倍。⑷药物的理化性质种属差异和个体差异产生的原因有哪些？⑴胚胎发育的遗传特征不同；⑵化学物在母体和胚胎体内代谢过程不同；⑶物种的胎盘构造差异使化学物透过胎盘的速度和量不同。检测药物生殖发育毒性的试验方法有哪些？阐述试验目的和给药时间。一代三段试验：一般生殖毒性试验，致畸试验和围产期毒性试验。一般生殖毒性试验： 目的：检测药物对生殖细胞(精子、卵细胞)的发生，卵细胞受精、着床、以及胚胎早期发育阶段的影响并作出评价。 给药时间：雄性交配前60~80天（大鼠的精原干细胞发育成精子至少需要56天），雌性交配前14天（相当于卵子发育的一个多周期）连续给药。交配后，雌性动物继续给药至妊娠第7~10天为止。致畸试验（申报第1、2类新药必须要！）： 目的：评价药物的发育毒性特别是致畸性。 染毒时间：选择胚胎对致畸物的易感期即器官形成期连续给药。大鼠孕第6~15天，小鼠孕第5~14天，家兔孕第6~18天。围产期毒性试验： 目的：检测药物对胎鼠发育后期、母代分娩过程给药时间：围绕分娩前后及哺乳期。在妊娠最后1/4时间开始给药，直到幼鼠断奶。 大、小鼠：妊娠第15d开始给药，至分娩后21d（小鼠）和28d（大鼠）。家兔：妊娠第22天开始给药，至分娩后31d。试述致畸试验的设计原则和基本要求。目的：评价药物的发育毒性特别是致畸性。①动物：一般选用两种哺乳动物，一种啮齿类，另一种非啮齿类。常选大鼠、小鼠和家兔。雌性动物宜选成年未怀孕过的动物。②动物受孕及检查方法：查找阴栓和阴道分泌物涂片查找精子。③剂量分组：至少分高、中、低三个剂量组。高剂量组应有母体毒性反应，或为最大给药量。低剂量组应无母体和胚胎毒性反应。设阴性对照组（溶剂与赋形剂），必要时设阳性对照组。④每组受孕动物数：大鼠和小鼠15~20只，家兔8~10只。⑤染毒途径：原则上与临床上拟用的给药途径相同，但不宜采用腹腔注射。⑥染毒时间：选择胚胎对致畸物的易感期即器官形成期连续给药。大鼠孕第6~15天，小鼠孕第5~14天，家兔孕第6~18天。⑦观察和检查李永齐30分常见的肝损伤有哪些类型？肝细胞死亡：调亡和坏死脂肪肝：大泡脂肪变性和微泡脂肪变性胆汁淤积