2022人教版高中生物选择性必修3第1章发酵工程 章末测评含答案解析

第1章发酵工程测评

第一套...........................................................................1

第二套...........................................................................12

第一套

一、选择题（本题共14小题,每小题2分，共28分。每小题给出的4个选项中，只有1个选项

是最符合题目要求的）

1.下列关于果酒、果醋、泡菜制作的叙述，正确的是（）

A.果酒、果醋和泡菜的制作都是利用自然的纯种微生物发酵生产的

B.分两阶段发酵果醋时，第一阶段的发酵温度比第二阶段要高一些

C.变酸的酒表面的菌膜含大量酵母菌

D.传统发酵技术制作的泡菜可能因操作不当，导致其中含有害的微生物

答案:D

解析:果酒、果醋和泡菜的制作都是利用微生物自然发酵生产的，没有专门的接种和灭菌环

节,所以利用的不是纯种微生物。分两阶段发酵果醋时，第一阶段即果酒的制作,所控制的温

度范围是18~30℃,第二阶段的发酵即果醋的制作,所控制的温度范围是30~35°C。变酸的

酒表面的菌膜含大量醋酸菌。

2.下列不属于传统发酵技术的是（）

A.通过微生物的培养生产胰岛素

B.果酒和果醋的制作

C.利用乳酸菌发酵制作泡菜

D.利用微生物发酵制作腐乳

答案:A

解析:传统发酵技术是指利用自然界存在的微生物的发酵作用来制作食品,B、C、D三项均

属于此类。

3.下列有关微生物发酵技术的叙述，错误的是（）

A.传统的发酵过程受技术条件限制，通常不进行无菌操作

B.制作果醋时应通入无菌空气，以保证有关菌种正常代谢

C.制作果酒、果醋和泡菜时，都是以建立种群优势作为发酵的基本条件

D.果醋发酵可以建立在果酒发酵的基础上，也可以直接利用葡萄汁进行发酵

答案:A

解析:传统的发酵过程受技术条件限制，通常灭菌不严格,但也进行无菌操作。制作果醋时利

用的醋酸菌是一种好氧菌，应通入无菌空气,以保证醋酸菌的正常代谢。制作果酒、果醋和

泡菜时，建立的种群优势依次是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌，以此作为发酵的基本条件。当氧

气、糖源都充足时，醋酸菌通过复杂的化学反应将果汁中的糖分解成醋酸，当氧气充足、缺

少糖源时，醋酸菌可以先直接将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为乙酸。因此，果醋发酵可以建立

在果酒发酵的基础上，也可以直接利用葡萄汁进行发酵。

4.无菌技术是微生物培养获得成功的关键，下列有关说法正确的是（）

①微生物培养时，关键是避免杂菌的入侵,对无菌操作的要求非常严格②对培养基及器械

用高压蒸汽灭菌③对实验空间及操作者的双手进行表面消毒时要考虑药剂的消毒效果

及实验者的安全④不同器械、不同用具区别对待，采用不同灭菌方法⑤对目的菌及培

养基可用高压蒸汽灭菌⑥如果不小心导致污染期可能造成培养工作前功尽弃

A.①②③④⑤B.①②③④

C.①②③④⑥D.①②③④⑤⑥

答案:C

5.下列关于微生物营养的叙述，正确的是（）

A.C02既是硝化细菌的碳源，也是其能源

B.将酵母菌培养在由硝酸铉、硫酸镁、氯化钙、磷酸二氢钾、必需的微量元素和水配成的

营养液中，一段时间内酵母菌的数量先增加后减少

C.糖类和N2是乳酸菌的碳源和氮源，该生物所需的能源来自乳酸的氧化分解

D.葡萄糖既是酵母菌的碳源，也是其能源，但CO?一定不是酵母菌的碳源

答案:D

解析:C02是硝化细菌的碳源，但不是其能源。该营养液中没有有机成分（葡萄糖），酵母菌是

异养型微生物，自身不能合成有机物，故C02不能作为其碳源。乳酸菌的氮源为无机盐。

6.在配制培养酵母菌的培养基时,常添加一定浓度的葡萄糖。但如果葡萄糖浓度过高，反而

会抑制酵母菌的生长，其原因最可能是（）

A.葡萄糖被合成了淀粉

B.酵母菌细胞失水

C.改变了培养液的pH

D.酵母菌发生了变异

答案:B

解析:酵母菌可利用葡萄糖进行代谢，但不会合成淀粉。葡萄糖不能改变培养液的pH,也不

能引发酵母菌的变异,但能提高培养液的渗透压，使酵母菌细胞失水。

7.下列有关细菌纯培养的说法，错误的是（）

A.实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒

B.每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌

C.培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞繁殖而来的

D.菌液梯度稀释后用涂布平板法接种，得到的单菌落便于计数

答案:C

解析:在培养细菌时要获得纯培养物,需要进行严格的消毒或灭菌，实验操作者接种前要用

70%的酒精棉球擦手消毒。每次划线后为了保证划线时的菌种只来自上次划线区域的末端,

每次划线后都要灼烧灭菌，最后一次是为了杀死菌种，防止污染环境。培养基上的单个菌落

不一定是一个细菌细胞繁殖而来的。菌液梯度稀释后用涂布平板法接种，得到单菌落便于

计数。

8.下列有关微生物的分离和培养的叙述，错误的是（）

A.分离和纯化培养微生物最常用的手段是平板分离微生物

B.微生物培养前，需对培养基进行消毒

C.测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法

D.分离和纯培养微生物最常用的培养基是琼脂固体培养基

答案:B

解析:微生物培养前，需对培养基进行灭菌。

9.下图是某实验室从葡萄果实上获取酵母菌菌种的简要操作步骤。下列有关叙述错误的是

（）

葡萄果实©收集冲洗液誓用选择培养基培养速等曳扩大培养

kA/\y/

A.图中接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法

B.图中①②③步骤都必须确保是无菌操作

C.图中用选择培养基培养时，应在培养皿的皿盖上做好标记，避免混淆

D.图中选择培养基为固体培养基，而扩大培养用的培养基为液体培养基

答案:C

解析:应在培养皿的皿底上做好标记，避免混淆。

10.下列叙述错误的是（）

A.土壤中各类微生物的数量不同，因此，若要获得不同类型的微生物，应按不同的稀释倍数进

行分离

B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量时,选用的稀释范围不同

C.如果在同一稀释度下，得到了多个菌落数在30~300的平板，则说明稀释操作比较成功

D.牛肉膏蛋白陈培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛

选出一些细菌菌落

答案:D

解析:选择培养基上的数目明显少于牛肉膏蛋白陈培养基上的菌落数目，说明选择培养基已

筛选出一些细菌菌落。

11.发酵工程的正确操作过程是（）

①发酵②培养基的配制③灭菌④产品的分离与提纯⑤菌种的选育⑥扩大培养

和接种

A.①③④⑤②⑥B.⑤②③⑥①④

C.②⑤③①⑥④D.⑥⑤②④③①

答案:B

12.下列根据相应实验现象分析得出的结论，错误的是（）

A.牛肉膏蛋白陈空白对照培养基上没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染

B.牛肉膏蛋白陈培养基的菌落数大于选择培养基,说明选择培养基有选择作用

C.稀释涂布平板法获得的培养基上菌落数小于30,说明可能稀释倍数太大

D.在接种大肠杆菌的培养基上观察到菌落有大有小，说明培养基已被杂菌污染

答案:D

解析:在接种大肠杆菌的培养基上观察到菌落有大有小，不能说明培养基已被杂菌污染，不能

仅通过菌落的大小判别不同种类的微生物。

13.某同学利用选择培养基成功分离出了土壤中的自生固氮菌，得到了下图所示的实验结

果。下列有关说法正确的是（）

土壤

浸出液

A.该实验使用了划线法接种

B.该实验使用了液体培养基

C.该实验使用了无氮培养基

D.该实验使用了无碳培养基

答案:c

解析:该实验使用的是稀释涂布平板法。图示中4属于固体培养基。由于自生固氟菌可以

空气中的氮气为氮源，而其他不能固氮的微生物不能以氟气为氮源，所以在无氮的培养基上

可以筛选出自生固氟菌，故图示中使用了无氮培养基。自生固氮微生物属于异养型微生物，

没有碳源不能生长，所以为了保证自生固氤菌能正常生长，培养基中应添加碳源。

14.下列不能达到微生物纯种分离目的的是（）

A.利用稀释涂布法分离某一种细菌

B.利用平板划线法分离某一种细菌

C.利用液体培养基振荡法培养土壤稀释液

D.利用选择培养基筛选某一种微生物

答案:C

解析:土壤稀释液中含有多种微生物，所以利用液体培养基振荡法培养土壤稀释液，不能达到

微生物纯种分离的目的。

二'选择题（本题共6小题,每小题3分，共18分。每小题给出的4个选项中,至少有1个选

项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分）

15.硝化细菌包括亚硝酸菌和硝酸菌，广泛存在于通气性较好的土壤中，其代谢反应如下图所

示。可以用人工配制的选择培养基筛选。下列关于硝化细菌培养条件的叙述，正确的是

（）

2NHJ+3O2亚硝暇菌-2HNO2+2H2。+能蜃

CO2+2H2O—；->-（CH2O）+O2+H2O

2HNO2+O2硝酸菌-2HN0,+能量

A.碳源为葡萄糖

B.氮源可以是氨气

C.培养时需隔绝空气

D.培养时不需光照

答案:BD

解析:硝化细菌利用的碳源为CO2o硝化细菌能利用NH3氧化释放的化学能量把C02和水

合成有机物，所以氮源可以是氮气。硝化细菌为需氧型细菌，培养时不能隔绝空气。硝化细

菌是化能自养型微生物,不需要光照。

16.下列关于制备牛肉膏蛋白陈固体培养基的叙述，正确的是（）

A.培养不同微生物的培养基的pH可能不同

B.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板

C.待平板冷却凝固约5~10分钟后将平板倒过来放置

D.配制培养基时先灭菌，再调pH,再倒平板

答案:ABC

解析:配制培养基时应先调pH,再灭菌，再倒平板。

17.下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是（）

A.土壤取样时应选取距地表约3~8cm的土壤层

B.为方便计数,应采用平板划线法进行接种

C.土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成麻酶

D.以尿素为唯一氮源的培养基可以鉴定分解尿素的细菌

答案:BD

解析:为方便计数，通常采用稀释涂布平板法进行接种，平板划线法能分离细菌，但不能用于

计数。以尿素为唯一氟源的培养基可以选择出分解尿素的细菌。要鉴定分解尿素的细菌

还需在选择培养基中加入指示剂。

18.某同学将土壤浸出液涂布在选择培养基上分离出分解尿素的细菌。下列操作错误的是

（）

A.首先需要用无菌水对样液进行梯度稀释，以便涂布平板时得到由单个细菌繁殖而成的菌

落

B.接种完成后,平板放入培养箱中培养时需要倒置

C.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离出分解尿素的细菌,该过程是否无菌操作

对实验影响很大

D.若在培养基中加入酚红指示剂，培养基上会长出带有红色环带的菌落

答案:C

解析:选择培养基是根据要培养的微生物的代谢特点配制的,一般的杂菌在其中很难生存，所

以是否无菌操作对土壤中特定微生物的分离影响不大。

19.下图是某种微生物体内合成氨基酸的途径。在发酵工程中利用该种微生物来生产大量

氨基酸甲，可以采取的措施是（）

底物中间产物金息1

I抑制I都过:

A.增加酶①浓度

B.设法将氨基酸乙分离或分解

C.对该种微生物进行诱变,选育出不能合成酶②的菌种

D.对该种微生物进行诱变,选育出不能合成酶③的菌种

答案:BD

解析:根据题意可知,当氨基酸甲和乙都过量时,会抑制中间产物的生成。而当氨基酸乙含量

不过量时该抑制作用被解除。因此，要提高氨基酸甲的产量,可以除去酶③，这需要对该种微

生物进行诱变，选育出不能合成酶③的菌种。将氨基酸乙分离或分解，降低氨基酸乙的含量,

也可以达到大量生产氨基酸甲的目的。

20.油炸臭豆腐是我国一些地方的风味小吃。制作时需要将豆腐浸入含有乳酸菌、芽抱杆

菌等微生物的卤汁中发酵。下列有关叙述正确的是（）

A.卤汁中的乳酸菌和芽抱杆菌不存在竞争关系

B.乳酸菌发酵产生了乳酸和CO2

C微生物发酵产生了不同的代谢产物，使得臭豆腐具有特殊的味道

D.乳酸菌是厌氧微生物

答案:CD

三、非选择题（本题包括5小题，共54分）

21.（14分X2019全国II理综）物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培养基中达到一

定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。

回答下列问题。

（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是o

（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如

图所示）。如果要得到目标菌，应该选择菌落进一步纯化，选择的依据

是O

（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、

乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，

即O

（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）o为

了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度

天然酶的缓冲液,C处滴加，三处滴加量相同。

②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明;若

A、B处形成的透明圈直径大小相近:说明。

答案：(1)W

(2)乙乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W

(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上,若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮

气作为氮源

(4)①缓冲液②缓冲液不能降解W酶E与天然酶降解W的能力相近

解析：(1)从土壤中分离能够降解含氮有机物W的细菌(目标菌)，选择培养基只能以W为氮

源，以保证该培养基只允许目标菌生活，抑制或阻止其他种类微生物的生长。(2)W在培养基

中达到一定量时培养基不透明。甲菌落周围未形成透明圈，说明所含细菌不能分解W;乙菌

落周围出现透明圈,说明乙菌落中的细菌能分解W。所以,如果要得到目标菌，应该选择乙菌

落进一步纯化。(3)若要确定甲、乙菌能否利用空气中的氟气作为氟源，只需将它们培养在

没有氟源的培养基上，若能够生长，则说明其能利用空气中的氨气作为氮源。(4)本实验中自

变量为酶的类型，因变量为透明圈的大小(表示酶降解W的能力大小)。为比较酶E与天然

酶的降解能力并排除缓冲液的干扰，需要设置A、B两个实验组(A组滴加含有酶E的缓冲

液,B组滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液)和一个只滴加缓冲液的对照组。若C处没有出

现透明圈，则说明缓冲液不能降解W;若A、B处形成的透明圈直径大小相近，则表明酶E与

天然酶降解W的能力相近。

22.(14分)(2019全国I理综)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环

境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。

I号培养基:在牛肉膏蛋白陈培养基中加入X(5g/L)o

II号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铉(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)0

III号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸筱(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)o

回答下列问题。

(1)在I号培养基中，为微生物提供氮源的是。II、III号培养基中为

微生物提供碳源的有机物是o

(2)若将土壤悬浮液接种在II号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例

会，其原因是。

(3)II号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落

进行计数，接种时,应采用的方法是o

(4)假设从III号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有

氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供和o

答案：(1)牛肉膏、蛋白豚X

(2)下降不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖

(3)稀释涂布平板法

(4)能量合成其他物质的原料

解析：(1)牛肉膏蛋白陈培养基是一种应用十分广泛的天然培养基，其中的牛肉膏和蛋白月东均

含氟元素,可为细菌提供氮源。II、III号培养基中为微生物提供碳源的有机物是X。(2)将

土壤悬浮液接种在II号液体培养基中，因培养基中只有有机物X提供有机碳源，不能降解X

的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖。(3)若用固体培养基培养目标菌

并对菌落进行计数，接种时应用稀释涂布平板法。(4)丙酮酸是细胞代谢中重要的中间产物,

既可以转化为其他有机物，又可以在有氧条件下继续氧化为细胞供能。

23.(5分)某研究团队对蓝细菌中的优势种四尾栅藻和铜绿微囊藻进行了培养实验，请结合四

尾栅藻和铜绿微囊藻在22°C、26°C、30℃条件下的纯培养和共培养实验,分析并回答下

列问题。

(1)实验室培养条件下微囊藻均以单细胞的形式出现，可以用法计数微囊藻细胞数

目。纯培养实验中三种温度下两种藻类的最大生物量都出现在26℃,说

明。另外两组温度下两种藻类生物量的明显区别

是o

(2)混合培养实验中22℃和26°C的四尾栅藻无显著差别，而铜绿微囊藻差别显著，说

明。由此推测,22℃时野外群落中还

没能成为优势种群。

答案：(1)抽样检测两种藻类的最适生长温度在26℃左右22°C时四尾栅藻生物量多于

30℃时，而铜绿微囊藻则相反

(2)22°C升至26°C,铜绿微囊藻的竞争优势明显铜绿微囊藻

24.(5分)某实验室在海泥中分离纯化得到多株海洋嗜盐细菌，经筛选发现其中某种嗜盐菌能

产生胡萝卜素。某微生物兴趣小组进行了如下的探究和分析，请据此回答下列问题。

(1)该小组用接种海泥的某种固体培养基获得海洋嗜盐细菌，所用的培养基从功能上看，属于_

培养基。该培养基的成分中的含量应该比通用培养基高。

(2)在海泥中获得产生胡萝卜素的嗜盐菌后，可用(填方法)进行

分离和纯化。

(3)为了探究该菌的最适生长条件,小组决定分组培养并用活菌计数法(间接计数法)对细菌

进行计数。统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏低，这是因为o最终

选取菌落数在30~300间的平板进行计数，大于300个菌落的平板不参与计数的原因

是o

答案:(1)选择无机盐

(2)平板划线法或稀释涂布平板法

(3)两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落菌落数大于300,菌落重叠

的概率大，将产生较大误差

25.(16分)豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质,保质期较短。科研人员对变质豆浆中

的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素(一种多肽，天然食品防腐剂)对腐败细菌的抑

制效果，为生产豆浆时优化保质方法提供依据。主要研究过程如下。

①豆浆变质处理:将两种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250

mL三角瓶中,密封、37°C条件下放置7d后，豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数:取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段

时间后，统计各培养基上菌落的种类和数量。结果如下表所示。

菌落数/个

细菌菌落直径

菌落特征豆浆豆浆自制

序号iron

AB豆浆

S1表面有白色绒毛，圆形边缘不规则5537

S2白色，表面无绒毛，有白色液滴1~2181124

S3黄色，表面无绒毛，如同黄色液斑20-3011715

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果。以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处

理后，在37C下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如下图所示。

50100150200250300350

孚L酸链球菌素添加量/(mg-kgT)

(1)日常生活中经常用到的消毒方法是，步骤②中培养基的灭菌方法

是。

(2)步骤②中适宜采用的接种方法是o固体培养基制备的步

骤为o培养过程中统计菌落种类和数

量时,要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防

止。

(3)步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是o为有效防止豆浆腐败，在生

产中乳酸链球菌素的添加量应控制在mg/kg左右。

(4)乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂,它是由34个氨基酸组成的多肽。与用抗生素防腐

相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是。

答案：(1)煮沸消毒法高压蒸汽灭菌

(2)稀释涂布平板法计算一称量-溶化-灭菌-倒平板因培养时间不足而导致遗漏菌

落的种类和数目

(3)S1250

(4)食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内的正常菌群

解析：(1)日常生活中经常用到煮沸消毒法。在实验室中，通常采用高压蒸汽灭菌法对培养基

进行灭菌。(2)步骤②需要对“腐败细菌进行初步分离和计数”，因此适宜采用的接种方法是

稀释涂布平板法。固体培养基制备的步骤为计算一称量-溶化―灭菌-倒平板。为了防

止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目，培养过程中统计菌落的种类和数量时，要

每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定。(3)分析曲线图可知,随着乳酸链球菌素添

加量的增大,S1细菌数量的相对值最高,由此表明最能耐受乳酸链球菌素的细菌是S1。当

乳酸链球菌素添加量小于250mg/kg时，随乳酸链球菌素添加量的增大，细菌数量相对值明

显降低;当乳酸链球菌素添加量为250~300mg/kg时,细菌数量相对数值基本维持稳定。可

见，为有效防止豆浆腐败,在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在250mg/kg左右。(4)乳

酸链球菌素是一种由34个氨基酸组成的多肽，食用后会被人体消化，不会改变人体肠道内的

正常菌群。

第二套

一、选择题（本题共14小题,每小题2分，共28分。每小题给出的4个选项中，只有1个选项

是最符合题目要求的）

1.关于无菌操作，下列叙述错误的是（）

A.无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌

B.用酒精擦拭双手的方法是对操作者进行消毒

C.实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行

D.玻璃器皿（吸管、培养皿）可用酒精擦拭

答案:D

解析:玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的。

2.下列有关培养基的叙述，正确的是（）

A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质

B.培养基都只含有水、碳源、氮源和无机盐

C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基

D.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌

答案:A

解析:培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，除此之外,可能还含有特殊营养物质。固

体培养基中加入少量水不能制成液体培养基。单个细菌肉眼看不到,微生物在固体培养基

上可形成肉眼可见的单个菌落。

3.下列有关微生物的分离与培养的叙述，错误的是（）

A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染

B.倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落造成污染

C.倒平板时将培养皿的盖拿开，以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿

D.检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养

答案:C

解析:为避免杂菌污染培养基，倒平板时，左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的

缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10~20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。

4.不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生

物的描述，错误的是（）

A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素

B.碳源物质也是该微生物的能源物质

C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D.水是该微生物的营养要素之一

答案:B

解析:C02是无机碳源，不能作为该微生物的能源物质。

5.微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列

有关微生物营养的说法，正确的是（）

A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的

B.微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物属于特殊营养物质

C.培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利

D.微生物在生长过程中需要的特殊营养物质往往可以自身合成

答案:B

6.平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述错误的是（）

A.平板划线法要求要连续多划几次,且除了第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划

线的终点

B.第一次划线需要将接种环灼烧灭菌，以后的划线可以不经灭菌直接划线

C.如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数

D.充分稀释和连续划线的目的都是使形成的菌落是由单一的细菌繁殖而成

答案:B

7.在适宜的温度条件下，下图所示装置中都加入干酵母（内有活酵母菌）,其中适于产生酒精的

装置是（）

答案:A

解析:酒精发酵的条件:①要有葡萄糖水溶液和酵母菌;②必须在密封的条件下（无氧条件

下）。若有氧气，酵母菌将进行有氧呼吸，产生C02和H2O。D项容易让人产生误解，因为D

项与A项加入的物质相同，并搅拌混合均匀，更有利于反应的进行,但它没有密封，暴露在有

氧的环境中，酵母菌只进行有氧呼吸，不进行无氧呼吸，不能产生酒精。

8.下列有关果酒、果醋和泡菜制作的叙述，错误的是（）

A.参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体

B.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长

C.制作果醋的适宜温度高于制作果酒的

D.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小

答案:A

解析:参与果酒发酵的酵母菌是真核生物，有线粒体;参与果醋发酵的醋酸菌是原核生物，无

线粒体。在果酒发酵后期,由于瓶中的营养物质减少,单位时间内产生的C02的量减少，所以

拧开瓶盖的间隔时间可以延长。酵母菌发酵的最适温度为18~30℃,醋酸菌生长的最适温

度为30-35℃o在果酒制作过程中，营养物质不断被消耗,并且有水生成，所以发酵液的密度

会逐渐减小。

9.下列关于发酵工程的说法，错误的是（）

A.在菌种选育过程中,可以利用人工诱变、基因工程等手段

B.虽然青霉素是抗生素，但在青霉素生产过程中仍然需要严格灭菌

C.在谷氨酸发酵过程中，在酸性条件下会积累谷氨酸，在碱性和中性条件下会形成谷氨酰胺

D.发酵工程的产品可以采用过滤、沉淀或其他适当方法提取

答案:C

解析:在谷氨酸发酵过程中，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下容易形成谷

氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。青霉素是抗生素，但不能杀灭所有微生物,所以其生产过程也要

灭菌。

10.下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是（）

A.为提高果酒品质，可加入人工培养的青霉菌

B.泡菜制作时需要加入香辛料，并且只能装八成满

C.乳酸菌是好氧细菌，有氧条件下将葡萄糖分解成乳酸

D.糖源充足时，醋酸菌将乙醇变为乙酸

答案:B

解析:果酒制作所需的微生物是酵母菌，不是青霉菌。泡菜制作时要注意装坛方法，先装至半

坛，再放入姜、蒜及其他香辛料，再装至八成满。乳酸菌是厌氧细菌，在有氧条件下乳酸菌会

死亡。当氧气、糖源充足时，醋酸菌通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸;当缺少糖源时，醋

酸菌直接将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为乙酸。

1L用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（）

A.未接种的选择培养基

B.未接种的牛肉膏蛋白陈培养基

C.接种了的牛肉膏蛋白陈培养基

D.接种了的选择培养基

答案:c

解析:选择的目的是分离、筛选。对照实验遵循单一变量原则。应该是有选择作用与无选

择作用对照，而有无选择作用取决于培养基中有无用来选择的物质。因此，应该用接种了的

普通培养基（牛肉膏蛋白陈培养基）和接种了的选择培养基进行对照。若牛肉膏蛋白陈培养

基上菌落的数目明显多于选择培养基上菌落的数目，则说明选择培养基起到了选择作用。

12.在做“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验时,下列操作需要在火焰旁进行的一组

是（）

①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养

A.①②③④⑤B.②③④⑤

C.③④⑤D.②③④

答案:D

解析:①土壤取样是在室外进行的，⑤微生物的培养是在恒温箱中进行的，二者均不需在火焰

旁进行。其余过程都需在火焰旁进行。

13.下列有关无菌技术的说法，正确的有（）

①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物②煮沸消毒法中」00℃煮沸5-6min可

以杀死微生物细胞和所有芽抱、抱子③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消

灭，所以不能在常温条件下长期保存④高压蒸汽灭菌时，若不将锅内冷空气排出，则达不到

预期的灭菌效果⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌

⑥无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌

A.2项B.3项

C.4项D.5项

答案:B

解析:无菌技术的关键是采用消毒或灭菌的方法消灭微生物,防止杂菌污染，并非杀灭实验室

中所有的微生物，①错误;煮沸消毒法中,100°C煮沸5~6min可以杀死微生物细胞和一部分

芽花、孑包子，②错误;经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温条件

下长期保存，③正确;由于空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以在使用高压蒸汽灭菌锅灭

菌时，若不将锅内冷空气排出，则达不到预期的灭菌效果，④正确;酒精灯火焰的充分燃烧层

温度高，将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，⑤正确;无菌

技术中，若处理对象为液体，可消毒，也可灭菌，⑥错误。

14.科赫采用一定的步骤来证明某种疾病是由特定细菌引起的，其步骤包括:①向动物体内注

射细菌以产生同原来一样的疾病;②从许多病例中分离到同样的细菌;③从感染的动物体得

到同原来一样的细菌;④将这种细菌进行纯培养。以上步骤正确的顺序是（）

A.①④②③B.①②③④

C.②④①③D.②①④③

答案:C

解析:明确某种疾病是否由特定细菌引起的，必须进行四项检验:⑴在所有的患者身上都能找

到这种病原体，而健康人没有;(2)从患者身上分离出的这种病原体能够在实验室中进行培养

和繁殖;(3)把从实验室中分离出来的病原体再注射到实验动物体中，可使该动物患与人同样

症状的疾病;(4)从患病实验动物体内分离出这种病原体。故步骤的正确顺序是②④①③。

二、选择题(本题共6小题,每小题3分，共18分。每小题给出的4个选项中,至少有1个选

项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分)

15.有三个盛放葡萄糖液的密封玻璃瓶,已知一瓶混有酵母菌，一瓶混有乳酸菌，一瓶只有葡

萄糖。下列叙述错误的是()

A.混有酵母菌的瓶子能够产生气泡

B.混有乳酸菌的瓶子能够产生气泡

C.混有酵母菌的瓶子能够发热

D.哪个瓶子发热多,哪个瓶子混有乳酸菌

答案:BD

解析:在混有酵母菌的密封瓶子内，酵母菌能利用瓶内的葡萄糖进行无氧呼吸产生C02,同时

释放能量，所以混有酵母菌的瓶子能够产生气泡，能够发热。混有乳酸菌的瓶子内，乳酸菌进

行无氧呼吸，能释放少量能量，使瓶子发热，不产生二氧化碳。

16.某同学设计了如右图所示的发酵装置，下列有关叙述正确的是()

A.该装置可阻止空气进入,用于果酒发酵

B.该装置便于果酒发酵中产生的气体排出

C.去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸

D.去除弯管中的水后,该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似

答案:ABD

解析:图示弯管中的水可以有效地阻止外来空气和杂菌进入发酵瓶，制造出密闭空间，用于果

酒发酵;图示导管插在液面之外,可用于排出发酵过程产生的气体;醋酸菌为好氧菌湾管去

除水后有适量气体进入,利于醋酸菌在液体中上层发酵，底层液体中缺氧，不利于醋酸菌发酵;

弯管去除水后，类似巴斯德的鹅颈瓶，既能导气,又能防止杂菌污染。

17.下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述，错误的是（）

A.用尿素为唯一氮源的培养基富集培养分解尿素的细菌

B.平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数

C.稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散

D.用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往偏大

答案:B

解析:分解尿素的细菌能产生腺酶，将尿素分解成氮，因此常用以尿素为唯一氮源的培养基富

集培养尿素分解菌。平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，然后培养,但不能用于微

生物的计数。稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散并计数。用血细胞计数

板计数微生物时，会将死的微生物计数在内，实验结果往往偏大。

18.纤维素分解菌能产生纤维素酶，纤维素在纤维素酶的作用下分解成葡萄糖。其他微生物

不能产生纤维素酶，不能利用纤维素。某生物兴趣小组欲从土壤中分离纤维素分解菌，大致

步骤如下:土壤取样一用液体培养基选择培养一梯度稀释一涂布培养一鉴定。使用液体选

择培养基培养纤维素分解菌的原因是（）

A.可获得大量纤维素分解菌

B.便于稀释涂布平板

C.纤维素分解菌只能在液体培养基中生长

D.用液体培养基可鉴别纤维素分解菌

答案:AB

解析:使用液体选择培养基培养纤维素分解菌,一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面

便于稀释涂布平板。纤维素分解菌也可以在固体培养基上生长。鉴别纤维素分解菌使用

的是固体培养基。

19.下图是某同学为了研究酵母菌的无氧呼吸所制作的一个实验装置。开始时锥形瓶中装

有质量分数为2%的葡萄糖溶液，并在其中加入适量的酵母菌。实验过程中,刻度玻璃管中

的有色液滴会向右移动。表中是该同学在不同的温度条件下进行实验时所记录的液滴右

移的距离（单位:cm）。请判断下列有关叙述正确的是（）

有.液滴

醉母菌、葡萄糖溶液

时间/min

温度/℃

12345

4000.10.20.3

100.21.01.93.14.0

200.41.32.23.34.5

350.71.42.84.45.0

5500.10.20.30.4

A.实验开始前应对葡萄糖溶液做煮沸处理，以除去葡萄糖溶液中的02和杂菌

B.表中数据可以表示酵母菌无氧呼吸所产生的C02的相对量

C.在一定温度范围内，随着温度升高，酵母菌的无氧呼吸强度越来越大

D.35°C比较有利于酵母菌的无氧呼吸，随着实验的进行，液滴右移的速率越来越大

答案:ABC

解析:要研究酵母菌无氧呼吸的过程就要尽可能排除其他微生物和O2对实验结果的影响，所

以要像A项那样处理。有色液滴右移距离可表示无氧呼吸产生C02的相对量。由表可知，

同一时间观察，在4~35℃范围内，温度越高，液滴右移越多,说明无氧呼吸产生的C02量越

多。而55°C时，液滴几乎不右移，说明此时温度过高，大部分酶已经失活。瓶中葡萄糖量一

定，因此当葡萄糖完全反应后，液滴不再右移。

20.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高

温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。下列说法错误的是（）

RQ3挑出菌腺Q

母甘①耳②滑常I测定

嗜热菌样品培养基培养基

A.①过程称为稀释，②过程是为了单个菌落的筛选

B.I号培养基称为选择培养基,该培养基中除了加入淀粉外，还需加入氮源等营养物质

C.该嗜热菌细胞壁的合成易受到青霉素的抑制

D.高温淀粉酶比较耐高温，在酶的分离提纯过程中,不需要考虑温度问题

答案:CD

解析:由题意不能判断出该嗜热菌细胞壁的合成是否受青霉素的抑制。高温淀粉酶能在一

定范围内耐高温，故在酶的分离提纯过程中，需栗控制温度，保持酶的活性O

三'非选择题（本题包括5小题，共54分）

21.（9分）天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。

酒精醋酸

（1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶

（2）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高.

的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。

（3）在乙酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30do工艺如下。

发尸二51每天只翻u_、A、B层__每天只翻_

酵•国动A层丽颠倒，研动B层，画

缸｛BJ^J发醉15d[B层]第15天\Ajzp发南5d口层1

成熟酒酷醋酷醋酷成热酷酷

①发酵过程中，定期取样测定醋酸菌密度变化,趋势如下图。据图分析，与颠倒前相比,B层醋

酸菌在颠倒后密度变化的特点是，由此推测,影响醋酸菌密

度变化的主要环境因素是。

051015202530时间/d

②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中

层的醋醋有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。

③成熟醋醋中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的改

变，加剧了不同种类乳酸菌的，淘汰了部分乳酸菌种类。

答案：（1）在最适温度条件下催化能力最强

（2）酵母菌

（3）①先快速增长后趋于稳定氧气、营养物质、pH②颠倒前的B层和颠倒后的A（或不

翻动,或下）③种间竞争（或竞争）

解析：（1）酶的催化需要适宜的温度，在最适温度条件下酶的催化能力最强，所以在糖化阶段添

加酶制剂需要控制反应温度。（2）酵母菌是兼性厌氧型微生物，发酵初期发酵罐先通气是为

了让酵母菌大量繁殖,增加酵母菌的数量。（3）①从图中可以看出与颠倒前相比,B层醋酸菌

密度变化是先快速增长后趋于稳定。醋酸菌是好氧菌,颠倒后B层醋酸菌有充足的氧气、

养料（发酵产生的乳酸）及合适的pH,所以其密度迅速增大。②乳酸菌是厌氧菌，所以发酵过

程中，发酵缸中颠倒前的B层和颠倒后的A层醋酷有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。③不同的

乳酸菌之间竞争养料和空间,所以它们之间是竞争关系。

22.（11分）富集培养是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，人为地提供一些特定的环

境条件，使特定种的微生物旺盛生长，使其在数量上占优势,更利于分离出该特定微生物，并

引向纯培养。从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤:采集菌样一富集培养一纯种

分离一性能测定。联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯（环境污染物）降解的关键

酶。下图表示用富集方法从土壤中分离联苯降解菌的过程。请据图回答下列问题。

将土壤样品接种涂布到含有多将单菌落接种

到含有多聚联苯聚联苯的培养到液体培养基

的富集培养基上平板表面并进行培养

培养金

肃落在平

板上生长

⑤.在不含有在含有多

多聚联苯聚联苯的

的培养基培养基中

中不生长能生长

⑥⑦

(1)①②③过程的目的是

(2)进行⑤过程的目的是，可采用法将初

筛菌液接种在固体培养基上。在⑤过程中，首先要对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，目

的是o

(3)在⑥和⑦的实验检测过程中，作为对照组的是组,设置实验组的目的

是O

(4)若用此方法从土壤中分离自生固氮菌，菌落在平板上培养时间不宜过长的原因

是。配制的培养基中所需的营养物质有(不定项选择

题)。

A.碳源B.氮源

C.水分D.无机盐

(5)某同学在做微生物实验时，不小心把自生固氮菌和酵母菌混在一起，请你写出分离得到纯

度较高的自生固氮菌的实验原理:。

答案：(1)通过富集培养，增大联苯降解菌(目的菌)的浓度(比例)

(2)获得联苯降解菌的单个菌落(进一步分离纯化目的菌)稀释涂布防止杂菌干扰实验结

果

(3)⑦说明获得的单菌落中没有其他杂菌

(4)自生固氮菌会分泌含氮化合物,引起杂菌生长ACD

(5)自生固氮菌能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能;青霉素不影响酵母菌等真菌的

生长繁殖，而会抑制自生固氮菌的生长繁殖

解析：(1)①②③过程的目的是通过富集培养，增大联苯降解菌(目的菌)的浓度(比例)。

(2)进行⑤过程的目的是获得联苯降解菌的单个菌落(进一步分离纯化目的菌)，可采用稀释

涂布法法将初筛菌液接种在固体培养基上。在⑤过程中，首先要对培养基和培养皿进行高

压蒸汽灭菌，目的是防止杂菌干扰实验结果。

(3)在⑥和⑦的实验检测过程中，⑦作为对照组，实验组(⑥)能够说明获得的单菌落中没有其

他杂菌。

(4)自生固氮菌会分泌含氮化合物,引起杂菌生长，因此用此方法从土壤中分离自生固氮菌，菌

落在平板上培养的时间不宜过长。自生固氟菌能够固定空气的氮元素，因此在培养基中不

加氮源可以起到选择作用，但是碳源、水和无机盐等仍然是必需的成分。

(5)自生固氟菌能在无氮培养基上生长、繁殖，而酵母菌则不能,因此可以用无氟培养基筛选

出自生固氟菌;而青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，会抑制自生固鼠菌的生长繁殖，因

此在含有青霉素的培养基中可以筛选出酵母菌。

23.(8分)对硝基苯酚(PNP)颜色为黄色,若被分解则颜色消失，属于硝基苯酚类有机化合物的

一种，主要来源于农药、医药、染料、塑料等生产企业排放，并广泛分布于环境中，对植物、

微生物和动物均有毒性。某生物兴趣小组提出从污水厂曝气池长期驯化的污泥中分离出

对硝基苯酚降解菌并研究其降解特性。请回答下列问题。

⑴分离对硝基苯酚降解菌的选择培养基成分有NH4NO3、KH2Po4、K2HPO4、NaCk

FeSCU、MgSO4-7H2O.PNP和琼脂。试从成分的角度分析该选择培养基能起到筛选作用

的原因。。

(2)利用(方法)分离纯化得到单一的对硝基苯酚降解菌菌落，可以将在菌

落周围是否产生作为筛选指标。

(3)若分离纯化后得到了两个菌落,这两个菌落的形态、大小、光泽度、颜色等(填

“一定”或“不一定”湘同。

(4)研究不同的糖类对对硝基苯酚降解菌降解PNP的影响，得到的结果如下表所示。

加入糖类葡萄糖蔗糖淀粉麦芽糖空白对照

降解率/%9998709590

从表中可得出的结论是。

答案：(1)PNP作为培养基中唯一的碳源可以将能降解PNP的细菌分离出来

(2)稀释涂布平板法或平板划线法透明圈

(3)不一定

(4)淀粉抑制PNP的降解，葡萄糖、蔗糖和麦芽糖均可促进PNP的降解

解析：(1)该选择培养基能起到筛选作用的原因是PNP作为培养基中唯一的碳源可以将能降

解PNP的细菌分离出来。

(2)常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法,故利用稀释涂布平板法或平

板划线法分离纯化得到单一的对硝基苯酚降解菌菌落。对硝基苯酚(PNP)的颜色为黄色，若

PNP被分解，则黄色消失，故可以将在菌落周围产生透明圈作为筛选指标。

(3)若分离纯化后得到了两个菌落,这两个菌落的形态、大小、光泽度、颜色等不一定相

同。

(4)从表中可看出，加入淀粉的降解率低于空白对照，加入葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的降解率均

高于空