检验科血清钙测定标准操作规程

XX县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-004版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20XX0701第4页共4页PAGE编写制定日期审核审核日期：核准执行日期2010-09-1520XX-07-0120XX-07-01XX县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-004版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20XX0701第1页共4页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣20XX-07-01章林华20XX-07-01总钙测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清总钙测定(缩写CA)；组合项目申请：血电解质全套测定组合。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本应记录采集时间、送检时间、接收时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下至少稳定24h，普通冰箱中（2～8℃）稳定一周，-20℃冰冻条件下可稳定一年。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.2不建议采集抗凝血标本，尤其不能使用EDTA，柠檬酸钠，氟化钠或草酸盐抗凝剂。3方法原理本法基于金属色原偶氮胂Ⅲ的比色测定，在碱性条件下，游离的偶氮胂Ⅲ在溶液中呈玫瑰红色，与钙络合后形成紫蓝色偶氮胂Ⅲ-Ca2+复合物，在650nm波长比色测定。复合物显色强弱与标本中钙浓度成正比。4试剂及其他用品4.1试剂：偶氮胂Ⅲ法测定钙试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。4.2试剂盒保存：保存于2～25℃，不开盖情况下至标签的失效期。开盖后放于仪器的试剂仓冰箱中稳定30天。任何颜色变化或浑浊度增加表明试剂已变质，不能继续使用。4.3试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：液体单一试剂，各组分如下：组成浓度砷酸盐200mmol/LMES缓冲液PH=6.5100mmol/L稳定剂5校准品与校准模式5.1校准品：Beckman-CoulterSYNCHRONMULTI校准液，其浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间不限，试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要定标。5.4校准液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONMULTI校准液即开即用，无需特殊准备。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。主要分析参数参见说明书。10结果计算计算公式： 钙浓度（mmol/L）＝校准液钙浓度(mmol/L)仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0.50～3.75mmol/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV<2.0%，总CV<3.0%左右。12.2线性范围：0.50～3.75mmol/L。12.3方法的有限性及干扰因素：甘油三酯达11.3mmol/L时影响小于3%，血红蛋白达5g/L时影响小于3%，胆红素达821μmol/L时影响小于2%。13参考范围及医学决定水平血清钙：成人：2.08~2.60mmol/L儿童：2.23~2.80mmol/L尿钙1～7.5mmol/24h。14临床意义14.1血清钙增高常见于甲状旁腺机能亢进症、维生素D过多症、多发性骨髓瘤，肿瘤的骨转移、代谢性骨病、阿狄森病和结节病。结节病引起肠道过量吸收钙，亦可使血钙增高。14.2血清钙减低可引起神经肌肉应激性增强而使手足抽搦，可见于下列疾患：原发性甲状旁腺机能减低、甲状旁腺功能亢进、甲状腺次全切除术后，甲状旁腺血供受损；佝偻病与软骨病；慢性肾炎、尿毒症；急性坏死性胰腺炎，脂肪坏死后钙沉积；低蛋白血症、高降钙素血症、新生儿低血钙、脂肪痢、钙吸收不良等。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与血清磷等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16威胁生命的“紧急值”及报告规定：按危急值报告制度执行，总钙＜＝1.5mmol/L或＞＝3.4mmol/L定为危急值。17有关引用程序与文件17.1Abbott自动生化分析