检验科糖化血清白蛋白测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-043版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第5页共5页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01血清糖化白蛋白测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清糖化白蛋白(缩写GALB)测定。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定24h。-20℃保存稳定30天。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。2.3.3可以使用肝素抗凝的血液标本。3方法原理1.糖化白蛋白的测定：反应生成的染料的颜色在550nm波长有最大吸收，测定糖化血清蛋白所用的酶反应如下:蛋白酶KAO糖化蛋白糖化的蛋白片断氨基酸＋H2O2过氧化物酶H2O2＋染料染料复合物＋H2O所产生的颜色强度与血清中糖化血清蛋白的含量成正比，2.白蛋白的测定：在样品中，注入前处理液发生作用处理SH基，将还原型白蛋白变成氧化型白蛋白。其次，注入溴甲酚紫发生作用生成白蛋白和BCP的蓝色结合体，测定此蓝色结合体的吸光度而定量白蛋白浓度。3.糖化白蛋白的计算：得出的.糖化白蛋白浓度除以白蛋白浓度，得出.糖化白蛋白浓度值。为使本法测出的值与露喜佳法或专用液体色谱的值一致，需要用转换公式计算：专用液体色谱值＝（本法的值/1.14）+2.94试剂及其他用品4.1试剂：血清糖化白蛋白试剂盒，由旭化成制药株式会社出品。4.2试剂盒保存：未开瓶的试剂储存在2～8℃可稳定至有效期。试剂开瓶后，在仪器冰箱试剂仓中可保存28天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，或起始吸光率>0.8时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3试剂盒准备：液态四试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：糖化白蛋白试剂GAR1KAOD30U/LR1前处理液TODB2.0mmol/LGAR2（酶液）蛋白酶40KU/ml4-AA5.0mmol/L白蛋白试剂ALBR1（处理液）琥珀酸120mmol/LALBR2（发色液）BCP0.13g/l5校准品与校准模式校准品：试剂配套校准品。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由旭化成制药株式会社公司提供的未定值质控血清。6.2质控液重建方法：粉剂复溶后分装冰冻保存。6.3质控品测定：在每星期一或换试剂时加做质控一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。主要分析参数参见说明书。10结果计算得出的.糖化白蛋白浓度除以白蛋白浓度，得出.糖化白蛋白浓度值。为使本法测出的值与露喜佳法或专用液体色谱的值一致，需要用转换公式计算：专用液体色谱值＝（本法的值/1.14）+2.911检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：3.2-68.2%。12操作性能12.1精密度：批间CV<3%。12.2线性范围：3.2-68.2%。13参考范围11-16%14临床意义酶法测定糖化血清蛋白测定试剂盒，用于定量检测血清中的糖化血清蛋白。糖尿病人的血糖和糖化血清蛋白的浓度升高。糖化血清蛋白对于在糖尿病初期2-3周内，检测血糖浓度变化的一个非常有用的指标。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与其他项目如GLU，HBA1C的关系，。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16无威胁生命的“紧急值”及报告规定17有关引用程序与文件17.1Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2生化检验室内质控标准操作程序。17.3检验结果审核程序。17.4标本送检和接收程序。18参考文献18.1陆永绥，张伟民主编.临床检验管理与技术规程.杭州:浙江大学出版社,2004.