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文档简介
交叉配血交叉配血试验
交叉配血(crossmatching)试验是输血前必须做的红细胞系统的配合性试验,以确保受者或供者血液没有可测的不相配合的抗原和抗体成分。可分为主侧配血和次侧配血。主侧:
受血者血浆
供血者血血浆次侧:
供血者RBC受血者RBC
交叉配血试验
一、交叉配血试验的方法二、交叉配血试验方法评价与临床意义三、血型鉴定与交叉配血的异常及其克服办法交叉配血试验盐水配血法凝聚胺技术抗人球蛋白配血法酶介质配血法交叉配血试验盐水配血法天然抗体IgM因其分子链较长,分子量大,在盐水介质中,可以克服红细胞表面电荷的排斥力,与含有相应抗原的红细胞结合并出现肉眼可见的凝集。盐水配血法原理交叉配血试验
盐水法是目前最常用的配血方法,可以发现临床最重要的ABO血型不配合性。当受血者和供血者的细胞和血清经混合并离心后,如果有ABO血型不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为“立即离心”(immediatespin)配血试验。报告方式格式Ⅰ:受血者×××(血型)供血者×××(血型)。血清+供血者红细胞:有/无凝集有/无溶血。血清+受血者红细胞:有/无凝集有/无溶血。
交叉配血试验
试验反应情况结果
PS+DCPC+DSPS+PC
阳性对照阴性对照盐水介质酶介质抗球蛋白介质签名:年月日
格式Ⅱ:
受血者血型
供血者血型
报告方式交叉配血试验聚凝胺配血法原理与Rh血型鉴定聚凝胺法原理相同。
聚凝胺配血法的结果如果加入解聚液后观察到凝集散开,则为聚凝胺引起的非特异性凝集,为配血相容。如果加入解聚液后观察到凝集不散开,则为抗原抗体的特异性凝集,为配血不相容。交叉配血试验交叉配血试验
微柱凝胶法凝胶具有分子筛效应和亲和效应,在微柱凝胶介质中红细胞抗原与相应的抗体结合,利用凝胶的空间位阻经低速离心,凝集的红细胞悬浮在凝胶的上层,而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶的底部(管底尖部)。微柱凝胶试验原理凝胶微柱:试管上端、柱体过滤介质:颗粒直径26~103nm的葡聚糖100凝胶,凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过缓冲液:LISS(加或不加抗血清)微柱凝胶试验原理
将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应,离心后观察凝集的红细胞,被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央,证明发生凝集反应,判断凝集反应阳性游离的红细胞,被挤过装有过滤介质的小柱,而到达小柱的底部,证明未发生凝集判断凝集反应阴性
凝胶卡式检测法
是微柱凝胶技术与上述所有技术相结合的产物1986年由法国人Dr.YvesLappierre发明。1994年获得美国FDA认证,目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床微柱凝胶试验结果判读模式交叉配血试验方法评价盐水配血法优点:反应迅速,如有不配合问题,立即显示出来,使用方便。缺点:只能检出完全抗体若要检测不完全抗体需采用其他配血法。酶介质配血法优点:易检出Rh血型抗体,操作简便,试剂易购得,敏感性尚高。缺点:操作较盐水配血法繁杂。交叉配血试验方法评价聚凝胺配血法优点:除了Kell系统部分抗体如抗K、抗Kpa、抗Kpb需用抗人球蛋白法才能检出外,其他IgM、IgG两种性质的抗体均可以检出,且无非特异性反应。微柱凝胶配血法优点:微柱凝胶卡式法操作简便,结果判定准确,易于掌握,具有很大的临床应用价值。微柱凝胶卡可做血型鉴定、交叉配血及特殊介质配血试验。缺点:其试剂价格昂贵交叉配血试验的临床意义1.进一步验证受血者和供血者血型鉴定是否正确,发现ABO系统的不规则抗体,以避免血型鉴定错误而导致的输血后的严重溶血反应。2.发现其他的血型抗体受、供血者如果ABO血型相同,但其他血型不同时,在交叉配血时也可出现凝集,为避免异型血输入后的溶血反应,在目前许多实验室都不能进行稀有血型鉴定的情况下,全靠交叉配血发现这些血型的不同及免疫抗体的存在。
交叉配血试验的临床意义3.当受血者一次输血超过1600~2000m1,或在48小时内输入5L或更多血时,称为大量输血,这时就需要多个供血者的血液,在配血时不但受血者和供血者之间要交叉配血,多个供血者之间也应互相交叉配血,为保证受血者的安全,要求主侧、次侧及献血员之间交叉配血均不凝集时,方可输血。4.在急诊配血时,对急需情况可采用试管法配血,在15min内发血。对特急情况应立即发给O型浓缩红细胞或低凝集价的O型全血。然后尽快复查血型和配血,如表现有配血禁忌,应立即通知负责医师及时处理。
血型鉴定与交叉配血的异常假阴性1.标准血清不符合要求2.被检红细胞抗原性减弱3.红细胞悬液浓度配置不当4.将溶血反应误认为不凝集5.血型物质的中和作用
假阳性
1.红细胞呈缗钱状排列
2.冷凝集
3.全凝集与多凝集
4.类B抗原
5.自身免疫性温性抗体责任性错误
交叉配血盐水介质法实验原理目的实验试剂操作步骤目
录CONTENTS实验原理目的交叉配血试验是指受血者血清加供血者红细胞悬液;供血者血清加受血者红细胞悬液,同时进行凝集试验。前者称主试验,后者称副试验。目的验证供者与受者ABO血型鉴定是否正确,防范引起溶血性输血反应。此外,也可检出ABO血型系统的不规则凝集素以及发现ABO系统以外的其他血型抗体。
试验器材、试剂小试管、尖嘴滴管、离心机、试管架、显微镜等试验器材试剂生理盐水操作步骤(一)01取受血者和供血者血液各2ml,注入一清洁干燥试管内,按常规方法分离血清。同时留数滴滴加于含少量生理盐水的小试管内,制成5%的红细胞生理盐水悬液。02另取清洁试管2支,标明主测和次测。主测:受血者血清1滴加供血者红细胞悬液1滴。次测:供血者血清1滴加受血者红细胞悬液1滴。操作步骤(二)03分别混匀,低速离心约2分钟,轻轻摇匀,观察结果。04结果判定:同型配血,主测、次测均不凝集,表示无配血禁忌,可以输血;异型配血时,主测无凝集,次测凝集,无溶血,可以输给少量。输异型血时,如次测不凝集,不可以输血,应重新复查血型或追查其原因交叉配血试验主侧配血用患者血清与供者红细胞
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