第九章 传染与免疫课件

第九章传染与免疫第九章传染与免疫第九章传染与免疫内容第一节传染

一、传染于传染病二、传染结局及其影响因素第二节宿主的免疫力

一、非特异性免疫二、特异性免疫第三节免疫学方法及其应用

一、抗原抗体反应的一般规律二、主要的抗原抗体反应三、现代免疫标记技术第九章传染与免疫免疫学（Immunology）即是研究免疫系统的结构与功能，探索其对机体有益的防卫功能和有害的病理作用及其机制的科学。可用以发展有效的免疫学措施，实现动物和人类的防病、治病。实际上免疫学理论和方法已经扩展到化学分析、分子生物学、生物传感器等诸多学科和领域。

第九章传染与免疫第一节传染一、传染与传染病

疾病病原菌传染近年来传染病的发展二、传染结局及其影响

影响因素传染结局第九章传染与免疫疾病Def

生物体在一定条件下，由体内或体外致病因素引起的一系列复杂而且具有特征性的病理状态。疾病根据病因分类

非传染性疾病传染性疾病第九章传染与免疫病原菌（Pathogen）凡是能够引起传染病的各种微生物或其他微生物你能列举出哪几种病原菌？第九章传染与免疫传染与传染病传染

外源或内源的少量寄生物突破宿主的三道防线（机械防御、非特异性免疫和特异性免疫系统）后，在宿主的一定部位生长繁殖或（和）产生酶或毒素，从而引起一系列病理生理的过程。传染病（InfectiousDisease）

一类由活病原体的大量繁殖所引起的，可以从某一宿主个体直接或间接传播到同种或异种宿主另外一些个体的疾病。第九章传染与免疫近年来传染病的发展艾滋病疯牛病大肠杆菌O157:H7Ebola幽门螺杆菌LymeSARS:SevereAcuteRespiratorySyndrome第九章传染与免疫传染结局的影响因素病原体最主要的因素：数量、致病特性和侵入方式

细菌：侵袭性酶类、外毒素、内毒素病毒：杀细胞传染、稳定传染、整合传染真菌：致病性、条件致病性、变态反应和真菌毒素宿主环境第九章传染与免疫一、病原体

影响细菌病原菌能否引起宿主患病的因素第九章传染与免疫1、毒力（Virulence）致病力（Pathogenicity）

病原体致病能力的强弱细菌性病原体的毒力

菌体对宿主体表的吸附、向体内定居、生长和繁殖，向周围扩散蔓延，对宿主防御功能的抵抗，以及产生损害宿主的毒素等一系列能力的总和。

侵袭力毒素第九章传染与免疫侵袭力（Invasiveness）

病原体所具有的突破宿主防御功能，并在其中进行生长繁殖和实现蔓延扩散的能力。

吸附和侵入能力繁殖和扩散能力抵抗宿主防御功能的能力第九章传染与免疫吸附和侵入能力菌毛吸附于肠道上皮

Salmonella、Vibrio、Neisseria、gonorrhoeae尿道；侵入原位生长繁殖：Vibriocholerae侵入细胞内生长、产毒，杀死细胞，产生溃疡:Shigelladysenteriae通过粘膜上皮细胞或细胞间质侵入表层皮下组织或血液中进一步扩散：Streptococcushaemolyticus化脓性感染菌毛：菌毛蛋白

大肠杆菌O157细胞表面的菌毛蛋白：定居因子抗原ColonizationFactorAntigen

第九章传染与免疫宿主与微生物的关系第九章传染与免疫繁殖和扩散能力一些特殊的酶，毒性酶能攻击损害机体组织透明质酸酶胶原酶血浆凝固酶链激酶卵磷脂酶第九章传染与免疫透明质酸酶（Hyaluronidase）SpreadingFactor

水解机体结缔组织中的透明质酸Hyaluronicacid具有透明质酸酶的微生物

StreptococcusStaphylococcusClostridium第九章传染与免疫胶原蛋白酶（Collagenase）水解胶原蛋白CollagenClostridiumperfringens第九章传染与免疫

血浆凝固酶（Coagulase）血浆凝固成纤维蛋白屏障，保护病原体免受宿主吞噬细胞和抗体的作用Staphylococcusaureus第九章传染与免疫链激酶（Streptokinase）血纤维蛋白溶酶（Fibrinolysin）

激活血纤维蛋白溶酶原（胞浆素原），使之变成血纤维蛋白溶酶（胞浆素），再由后者把血浆中的纤维蛋白凝块水解，从而有利于病原体在组织中扩散产链激酶的微生物

Streptococcushaemolyticus链激酶的应用急性血栓栓赛性疾病：心肌梗塞、非栓赛、深部静脉血栓疾病第九章传染与免疫卵磷脂酶（Lecithinase）α-毒素

水解各种组织的细胞，特别是红细胞产卵磷脂酶的微生物

C.perfrigens、蛇毒第九章传染与免疫抵抗宿主防御功能能力溶血素（Haemolysin）:Streptococcus

抑制白细胞的趋化性A蛋白：Staphylococcus

与调理素（抗体IgG）相结合，抑制白细胞对已调理细菌的吞噬荚膜：能阻止吞噬细胞的吞噬第九章传染与免疫毒素微生物在新陈代谢的过程中产生的、对人或动物有毒害的物质，主要由细菌、霉菌产生。

外毒素（Exotoxin）

在病原菌（G+）生长过程中不断向外界环境中分泌的一类毒性蛋白质，属于酶、酶原或毒蛋白。

内毒素（Endotoxin）

G-细菌细胞壁外层的组分之一，化学成分为脂多糖（LPS）,在活细胞上而不分泌到体外，在细胞死亡自溶后或人工裂解时才释放

真菌毒素第九章传染与免疫几种主要外毒素及其作用第九章传染与免疫类毒素（Toxoid）将细菌的外毒素用0.3~0.4%甲醛溶液进行脱毒处理后，仍保留原有免疫原性（抗原性）的生物制品。将其注射机体后，可以使机体产生对相应外毒素具有免疫原性的抗体（抗毒素）常见的类毒素

白喉类毒素破伤风类毒素肉毒素毒素第九章传染与免疫外毒素与内毒素的比较第九章传染与免疫内毒素的生物学效应热源质（Pyrogen）

将内毒素注射到温血动物或人体内后，刺激宿主细胞释放的内源性的Progen内毒素的性质

生物毒性化学稳定性：250度干热灭菌2小时一些注射类药如生物制品、抗生素、葡萄糖液和无菌水第九章传染与免疫内毒素的检测家兔发热试验法

费时、费工、费用大、灵敏度低鲎试剂法（Limulusassay）

鲎变形细胞溶解物试验法（LimulusamoebocyLysatetest，LALtest）

鲎、马蹄蟹

开放性血管系统、每只采血100－300ml，血清呈现蓝色，含有血蓝蛋白和外源凝集素Lectin

鲎血变形细胞裂解物可与细菌内毒素LPS和磷壁酸发生特异性和高灵敏度的凝胶化反应第九章传染与免疫鲎试剂法第九章传染与免疫鲎第九章传染与免疫2、入侵病原体的数量最小感染剂量引起宿主致病所需要的最少个体数量Salmonellatyphi

：108-109CFU/宿主Vibriocholerae：106CFU/宿主Shigelladysenteriae：7个/宿主Yersiniapestis

：几个细胞第九章传染与免疫3、侵入途径（EntryPoint）消化道呼吸道皮肤创口泌尿生殖道其他途径第九章传染与免疫消化道-病从口入SalmonellatyphiSh.dysenteriaeV.choleraeV.parahemolyticusE.coliO157:H7ListeriamonocytogenesHelicobacterpylori:中国Hp高传染国家感染率：无症状婴幼儿：50%；成人：70%HP的检测原理：13C呼气试验法第九章传染与免疫呼吸道MycobacteriumtuberculosisLegionellapneumoniae嗜肺军团菌Pneumococcuspneumoniae肺炎肺炎球菌Corynebacteriumdiphtheriae白喉棒杆菌Bordetellapertusis百日咳博德特氏菌Neisseriameningitidis脑膜炎奈瑟氏菌Haemophilusinfluenzae流感嗜血菌Mycoplasmapneumoniae肺炎支原体InfluenzaeVirus

流行性感冒病毒SARS第九章传染与免疫皮肤创口浅部皮肤创伤（烫伤和不洁手术）

StaphylococcusaureusStreptococcuspyogenesPseudomonasaeruginosa深部创口感染

ClostridiumtetaniClostridiumperfringens其他

Bacillusanthracis:皮肤

Rickettsiarickettsli:蜱类叮咬狂犬病毒：疯狗咬伤进入体内乙型肝炎病毒：

通过食物、餐具、玩具、创伤、注射、手术、针刺、剃刀中国是乙肝大国第九章传染与免疫泌尿生殖道淋病奈瑟氏菌NeisseriagonorrhoeaTreponemapallidum梅毒螺旋体

SexDisease:Sex-transmittedDisease(STD)

HIVVirusAcquiredimmunodeficiencySyndrome,AIDS

衣原体性病生殖器念珠菌病阴道棒杆菌病嗜血杆菌性阴道炎第九章传染与免疫其他途径垂直传染途径

通过胎盘、产道等途径由母亲传给婴儿实例

Mycobacteriumtuberculosis

Bacillusanthracis:皮肤、呼吸道和消化道：炭X病

Bio-weapon:911事件

Bio-terrorism第九章传染与免疫宿主的免疫力免疫、免疫性、免疫力

经典概念：机体免除传染性疾病的能力现代概念：机体识别和排除抗原性异物的一种保护性功能，在正常条件下对机体有利，在异常条件下也可损害机体免疫功能：三个方面

免疫防御ImmunologicDefense

免疫稳定ImmunologicHomeostasis

免疫监视ImmunologicSurveillance第九章传染与免疫宿主免疫力的各个方面第九章传染与免疫环境因素影响病原体的毒力、数量、侵入门径和宿主的免疫力的环境因素

良好的环境因素有助于提高机体的免疫力，也有助于限制、消灭自然疫源和控制病原体的传播，从而防止传染病的发生或流行医院内受感染的比例：条件致病菌住院病人在医院内受感染的比率高达9.7%

下呼吸道感染、泌尿道感染、手术后创口感染、胃肠道感染第九章传染与免疫传染结局隐性传染Inapparentinfection

宿主的免疫力很强，病原菌的毒力相对较弱，数量又较少，传染后只引起宿主的轻微损害，且很快就将病原体彻底消灭，因而基本不出现临床症状者带菌状态CarrierState

病原菌与宿主双方都有一定的优势，但病原体仅被限制与某一局部且无法大量繁殖，两者长期处于相持的状态。伤寒玛丽TyphoidMary:MaryMallon第九章传染与免疫传染结局显性传染ApparentInfection、传染病

宿主的免疫力较低，后侵入的病原菌的毒力较强、数量较多，病原菌在宿主体内很快繁殖并产生大量有毒产物，是宿主的细胞核主旨蒙受严重损害，生理功能异样，出现一系列临床症状

按照发病时间长短

急性传染：数日到数周慢性传染：数月、数年甚至数十年按照发病部位

局部感染、全身感染第九章传染与免疫传染的三种结局隐性传染：免疫力>病原菌的毒力带菌状态：免疫力=病原菌的毒力显性传染：免疫力<病原菌的毒力第九章传染与免疫按照性质和严重程度毒血症（Toxemia）

病原体被限制在局部病灶，所产毒素进入血流而引起全身症状

菌血症（Bacteremia）

病原体由局部的原发病灶侵入血流后传染至远处组织，但未在血流中大量繁殖的传染病败血症（Septicemia）

病原体侵入血流并在其中大量繁殖，造成宿主严重损伤和全身性中毒症状者，绿脓杆菌脓毒血症（Pyemia）

化脓性细菌引起宿主的败血症的同时，在许多脏器中引起化脓性病灶者，金黄色葡萄球菌第九章传染与免疫第二节非特异性免疫第九章传染与免疫非特异性免疫NonspecificImmunity

InnateImmunity先天免疫

NaturalImmunity天然免疫

在生物长期进化过程中形成，属于先天既有、相对稳定、无特殊针对性地对付病原体的天然抵抗能力，对多种病原微生物都有一定的预防，有种的差异，在种内个体之间差别较小.第九章传染与免疫人与动物的非特异性免疫宿主的屏障结构

皮肤、粘膜的机械阻挡正常菌群的拮抗血脑屏障血胎屏障吞噬细胞的吞噬功能

吞噬细胞：巨噬细胞和单核细胞，嗜中性、嗜酸性和嗜碱性粒细胞正常组织和体液中的抗菌物质

补体、溶酶菌、干扰素有保护性的炎症反应第九章传染与免疫表皮和屏障结构皮肤与粘膜作用

机械性阻挡和排除作用化学物质的抗菌作用正常菌群的拮抗作用屏障结构（BarrierSstucture）

血脑屏障（Blood-brainBarrier）血胎屏障（Blood-embryoBarrier）：由母体子宫内膜底蜕膜和胎儿的绒毛膜共同组成，防止母体内病原菌进入主要由软脑膜、脉络丛、脑毛细血管壁及其外的脑星形细胞组成，具有细胞间连接紧密、胞饮作用弱的特点，可阻挡病原体及其有毒产物从血液透入脑组织或脑脊液，保护中枢神经系统的稳定。第九章传染与免疫人体屏障第九章传染与免疫吞噬细胞及吞噬作用什么是吞噬细胞？

一类存在于血液、体液或组织中，能进行变形虫运动，并能吞噬、杀死和消化病原微生物等异常抗原的白细胞。两类吞噬细胞

多形核白细胞：嗜中性粒细胞单核吞噬细胞：巨噬细胞第九章传染与免疫这张电镜照片显示了一个人体白细胞（蓝色）、其细胞核（橙色）以及受到进攻和包围的细菌（红色）。第九章传染与免疫

吞噬性：白细胞非吞噬性嗜中性粒细胞（90%）嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞单核细胞血液中：单核细胞组织中：巨噬细胞淋巴细胞T、B含多种消化酶，可以穿越血管壁，发挥吞噬功能变形虫运动，吞噬和胞饮功能白细胞的种类及功能图解第九章传染与免疫白细胞的种类及功能图解第九章传染与免疫白细胞种类及其特点第九章传染与免疫多形核白细胞（PMN）Polymorphonuclearleukocyte,Granulocyte

一类由分节状细胞核、细胞质内含大量溶酶体（Lysosome）颗粒的白细胞PMN的功能PMN的种类

嗜中性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜酸性粒细胞第九章传染与免疫多形核粒细胞的吞噬作用第九章传染与免疫巨噬细胞（Macrophage,Mφ）Def一类存在于血液、淋巴和多种组织中的大型单核细胞（直径10-20um）,寿命长，可作变形虫运动，有吞噬和胞饮功能，体外培养时能够粘附于玻璃、塑料表面和吸收锥虫蓝（Trypanblue）巨噬细胞起源于骨髓干细胞

骨髓干细胞-单核母细胞-原单核细胞-单核细胞-巨噬细胞巨噬细胞的功能

吞噬和杀菌作用抗原递呈作用免疫调节作用抗癌作用第九章传染与免疫巨噬细胞：存在于血液、淋巴核多种组织中的大型单核细胞具有吞噬作用、杀菌作用、抗原递呈作用、免疫调节作用、抗癌作用第九章传染与免疫炎症反应（Inflammation）def机体对病原体的侵入或其他损伤的一种保护性的反应，在相应部位出现红、肿、热、痛和功能障碍。炎症的作用一种病理过程，又是一种防御病原体的积极方式

动员大量吞噬细胞聚集在炎症部位血流加速使血液中抗菌因子和抗体发生局部浓缩死亡宿主细胞堆积释放抗微生物物质炎症中心氧浓度下降和乳酸积累，有利于抑制多种病原菌的生长炎症部位的高温还可降低某些病原体的繁殖速度

第九章传染与免疫正常体液或组织中的抗菌物质一般不直接杀死病原体，而是配合免疫细胞、抗体或其他防御因子，增强其免疫功能

溶菌酶、乳铁蛋白、乙型溶素、补体（Complement）、α、β干扰素（Interferon）、吞噬细胞杀菌素、组蛋白、白细胞素、血小板素、正铁血红素、精素、精胺碱、乳铁蛋白第九章传染与免疫正常体液和组织中的抗菌物质第九章传染与免疫补体（Complement）存在于正常人体或高等动物血清中的一组非特异性血清蛋白（Beta-球蛋白），扩大和增强抗体，补体的化学本质是一类酶原。补体能被任何的抗原-抗体复合物激活，由无活性形式转变为对病原体具有杀灭作用的活性形式，称为补体激活。补体的生物学功能：溶解和杀伤细胞；趋化作用；免疫粘附作用；中和病毒；过敏毒素（促进炎症）作用。第九章传染与免疫

溶解和杀伤细胞第九章传染与免疫第九章传染与免疫干扰素（Interferon）病毒干扰（VirusInterference）现象什么是干扰素？

高等动物细胞在病毒或dsRNA等诱生剂的刺激下，所产生的一种具有高活性、广谱抗病毒等功能的特异性糖蛋白。干扰素诱生剂（InterferonInducer）

病毒、灭活病毒和病毒RNA、人工合成dsRNA、立克次氏体、衣原体、支原体、细菌、微生物产物（LPS、真菌多糖）、多聚化合物、植物凝集素、伴刀豆球蛋白、葡萄球菌肠毒素、卡那霉素第九章传染与免疫干扰素的诱生和作用机制

第九章传染与免疫第九章传染与免疫第三节特异性免疫第九章传染与免疫特异性免疫（SpecificImmunity）AcquiredSpecificImmunity

指机体在生活过程中，由侵入机体的抗原刺激形成的一种对该抗原具有特异性的免疫力。主要功能是识别非自身和自身的抗原物质，并对它产生免疫应答，从而保持集体内环境的稳定状态。特异性免疫的特点

后天接触抗原而获得不能遗传个体差别和条件差别产物和相应的抗原之间的特异性显著体液免疫与细胞免疫第九章传染与免疫特异性免疫的获得方式自然被动免疫自然自动免疫人工被动免疫人工自动免疫第九章传染与免疫特异性免疫第九章传染与免疫人工自动免疫和人工被动免疫第九章传染与免疫免疫应答细胞免疫体液免疫第九章传染与免疫免疫应答（Immuneresponse）一般仅指特异性免疫的进行过程。抗原的刺激开始，机体内的抗原特异性淋巴细胞识别抗原（感应）后，发生了活化、增殖、分化等一系列变化，并表现出一定的体液免疫或（和）细胞免疫效应的过程。

实质上可理解为抗原有选择性地刺激能识别它的特异性淋巴细胞，继而触发一系列变化和产生免疫效应的一种生理过程。突出特征是识别异己且具有特异性和记忆性。免疫应答只指发生在机体内的一类免疫反应。第九章传染与免疫免疫应答的类型第九章传染与免疫免疫应答的过程第九章传染与免疫细胞免疫Def

当机体受到抗原刺激后，一类小淋巴细胞-依赖胸腺的T细胞发生增生、分化，直接攻击靶细胞或间接的释放一些淋巴因子的免疫作用体液免疫

当机体受到抗原刺激后，来源于骨髓的小淋巴细胞—B细胞进行增生和分化为浆细胞，它可合成称作抗体的各类免疫球蛋白，例如IgG、IgA、IgM、IgD和IgE，并把它们释放到体液中发挥免疫作用第九章传染与免疫免疫系统：三个层次免疫器官

中枢免疫器官

骨髓、胸腺、法氏囊、脾脏、淋巴结外周免疫器官

脾脏和淋巴结免疫细胞一切具有免疫功能的细胞

淋巴细胞（T细胞、B细胞、第三、第四淋巴细胞）、粒细胞、单核细胞核巨噬细胞免疫分子：抗原与抗体第九章传染与免疫T细胞和B淋巴细胞的来源和功能第九章传染与免疫第九章传染与免疫免疫分子的种类及其作用膜表面免疫分子

膜表面抗原受体主要组织相容性复合物抗原（MHCAntigen）白细胞分化抗原粘附分子体液免疫分子

抗体细胞因子补体抗原第九章传染与免疫（一）抗原（Antigen）免疫原，Immunogen

一类能诱导机体发生免疫应答并能与相应抗体或T淋巴细胞发生特异性免疫反应的大分子物质。抗原的两重性

免疫原性（Immunogenicity）

抗原性，能刺激机体产生免疫应答能力的特性反应原性（Immunoreactivity）

免疫反应性，能与免疫应答的产物发生特异性反应的特性完全抗原、半抗原/不完全抗原第九章传染与免疫完全抗原、半抗原/不完全抗原完全抗原

既有抗原性，又有反应原性。如大多数蛋白质、细菌细胞、细菌外毒素、病毒、动物血清等半抗原（不完全抗原）：抗原决定簇

只具有反应原性而无抗原性的物质。如小分子量的简单有机分子、大多数多糖、核酸、类脂及其降解物、部分药物

当半抗原与适宜载体蛋白如甲基化牛血清白蛋白结构，具备了免疫原性，可刺激机体产生抗体第九章传染与免疫半抗原免疫原性的获得及免疫反应性第九章传染与免疫免疫原性的物质基础相对分子分子质量大：首要条件

1.0x104，一般免疫原性与分子量成正比简单的明胶分子1.0x105

胰岛素5734

含三个酪氨酸和1个p-偶氮苯砷盐：400结构复杂

蛋白质免疫原性最强：芳香族氨基酸特别是酪酸，胶原蛋白与酪氨酸结合可增强免疫原性其次是若干复杂多糖：肺炎球菌荚膜多糖再次是核酸（半抗原）类脂类物质最差第九章传染与免疫免疫原性的物质基础异物性

指某抗原的理化性质与所刺激的机体的自身物质理化性之间的差异程度机体的自身物质或细胞是不具有免疫原性一般抗原必须是异种或异体的物质种属关系越远，免疫原性越强自身抗原Autoantigen与自身免疫病第九章传染与免疫抗原决定簇AntigenicDeterminant抗原表位（Epitope）

位于抗原表面决定抗原特异性的特定化学基团，使抗原能够与相应淋巴细胞上的抗原受体发生特异性结合，从而激活免疫细胞并引起免疫应答。一个抗原表面可存在一至多种不同的抗原决定簇，由此产生一至多种的特异性抗原决定簇分子相当于抗体的结合部位，一般由5~7个氨基酸、单糖或核苷酸残基组成抗原结合价：凡能与抗原结合的抗原决定簇总数大多数抗原结合价的多价的第九章传染与免疫两类半抗原复合半抗原

无免疫原性但具有免疫反应性，能在试管中与相应抗体发生特异性结合并产生可见反应。如细菌的荚膜多糖简单半抗原

阻抑半抗原，既无免疫原性又没有免疫反应性，但能与抗体发生不可见的结合，可组织抗原在于相应的完全抗原或复合半抗原向结合的可见反应。如肺炎链球菌荚膜多糖水解产物第九章传染与免疫细菌的抗原表面抗原（荚膜抗原或微荚膜抗原）

包围在细菌细胞壁外层的抗原，主要是（微）荚膜抗原：K抗原、Vi抗原鞭毛抗原

位于鞭毛上的抗原，鞭毛蛋白抗原，H抗原菌毛抗原

细菌细胞表面的菌毛蛋白所形成的抗原菌体抗原

只存在于细胞壁、细胞膜、细胞之上的抗原旧称o抗原

o抗原：专指G-细菌特别是一些肠道G-细菌表面耐热、抗乙醇的脂多糖-蛋白抗原，150多种E.coli

血清型外毒素、类毒素：抗原性很强的蛋白质第九章传染与免疫细菌的各种抗原示意图第九章传染与免疫共同抗原与交叉反应特异性抗原

某复杂抗原系统所特有的抗原共同抗原、类属抗原

多种复杂抗原系统所共有的抗原说明

一种菌常常具有多种（上述两类）抗原，不同菌往往会有相同抗原，因而会有交叉反应交叉反应(Crossreaction)：由于不同细菌存在共同抗原而引起不同细菌的抗原（或抗体）与另外细菌的抗体（或抗原）发生较弱的免疫反应的现象。吸收反应与凝集吸收反应第九章传染与免疫交叉反应、凝集吸收反应和单价特异抗血清的诊断试验第九章传染与免疫（二）抗体（antibody,Ab）定义

高等动物体受抗原刺激后，由浆细胞在血液或其他体液中产生的可以与抗原在体内外发生特异性反应的免疫球蛋白（immunoglobulin）Ig主要存在于血液的血清部分，含有抗体的血清叫抗血清或免疫血清。抗体的种类：凡具有抗体活性以及与抗体有关的各种球蛋白人的免疫球蛋白一共有5种类型：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。有单体、双体和五体等第九章传染与免疫抗体的特点仅由鱼类以上脊椎动物的浆细胞所产生必须有相应的抗原物质刺激免疫细胞后才能产生与相应的抗原发生特异性、非共价和可逆的结合化学本质：具有体液免疫功能的球蛋白具有免疫原性：抗抗体Antiantibody.刺激异种生物产生相应的抗体。第九章传染与免疫抗体的性质所有Ig都是糖蛋白。大部分是球蛋白，少数是碳水化合物。Ig的分子量在15万至100万之间，最大的是IgM，分子量为90万每一个Y型的抗体分子具有两个抗原的结合位点，能与两个抗原决定簇相结合。如果某种抗原能刺激机体产生几类免疫球蛋白，其在血清中出现的先后次序的规律为：IgM、IgD、IgA、IgD、IgE第九章传染与免疫免疫球蛋白抗体的化学结构5种免疫球蛋白的分子结构基本相同

多克隆抗体Y形四链结构模型

由一长一短两对多肽链对称排列而成一个Y形分子

重链H链（Heavychain）轻链L链（Lightchain）可变区V区重链1/4、轻链1/2

恒定区C区重链3/4、轻链1/2

铰链区：HingeregionN端、C端糖结合部位二硫键连接轻链与重链第九章传染与免疫第九章传染与免疫免疫球蛋白第九章传染与免疫免疫球蛋白第九章传染与免疫抗体的其他特征抗体的类别与亚类抗体的型别与亚型Ig肽链的氨基酸数IgG的酶解和化学分解片段Ig的二硫键数Ig的体：单体，双体，五体Ig的抗原结合价Ig的功能区Ig的构象第九章传染与免疫免疫球蛋白的结构与功能第九章传染与免疫产抗体细胞的激活和抗体的形成抗原递呈T细胞激活B细胞浆细胞产生抗体第九章传染与免疫机体产抗体的两次应答规律初次免疫应答再次免疫应答第九章传染与免疫抗体的产生第九章传染与免疫抗体的形成机制抗体形成的克隆选择学说抗体多样性的分子生物学机制

利川根进的体细胞突变学说：编码恒定区和可变区的基因呈现分离状态，并在B细胞成熟和分化过程中不断进行重排第九章传染与免疫单克隆抗体与淋巴细胞杂交瘤技术单克隆抗体

在体液免疫中，由单一抗原刺激机体，只激活一个B细胞克隆（无性繁殖细胞系）而在机体内产生的一种抗体

由一纯系B淋巴细胞克隆经分化、增殖后的浆细胞所产生的单一成分、单一特异性的免疫球蛋白分子第九章传染与免疫多克隆抗体多克隆抗体

在正常机体内所存在的、由于多种B细胞克隆分别接触相应抗原而产生的多种抗体的总和特点：特异性抗血清

B细胞遗传型多样性接触环境中多种抗原的可能性特异性差滴度效价较低产量有限不能精确重复和进行严格质量控制第九章传染与免疫淋巴细胞杂交瘤技术淋巴细胞杂交瘤、杂交瘤

由淋巴细胞和骨髓瘤细胞两者融合而成的既能在体外大量增殖、又能产生大量McAb的杂种细胞淋巴杂交瘤的制备方法

选择亲本细胞株混合双亲细胞促进细胞融合淘汰未融合的亲本杂交瘤扩大培养单克隆抗体的改造第九章传染与免疫单克隆抗体的制备第九章传染与免疫单克隆抗体的应用基础研究：免疫学研究

免疫球蛋白的一级结构和高级结构的实验材料研究免疫球蛋白的合成遗传机制和代谢调控抗原抗体结合机制研究的可靠模型利用特异性分离纯化生物大分子：免疫磁珠技术实践应用

诊断与治疗疾病：病毒病肿瘤的靶向药物：药物导弹、免疫毒素第九章传染与免疫第四节免疫学方法及其应用传统免疫学方法现代免疫学方法第九章传染与免疫免疫学方法概述传统的免疫方法

体液免疫产生的抗体与各种抗原的体外反应现代免疫学方法

体液免疫、细胞免疫、免疫诊断学、免疫学检测第九章传染与免疫一、抗原抗体反应的一般规律血清学反应（SerologicalReaction）

抗原与带有特异性抗体的免疫血清的反应。当微生物及其它抗原进入机体后，能刺激机体在血清中产生特异性抗体，在体外可以与抗原相遇发生凝集、溶解等多种反应，这些反应都是用免疫血清进行的第九章传染与免疫血清学反应的规律特异性物质基础：抗原决定簇和抗体分子V区间的各种分子引力可逆性：可逆性的物理结合定比性：抗原物质表面的抗原决定簇数目一般较多，故为多价；抗体为双价条件依赖性

pH6－8、温度37－45℃，适当振荡、生理盐水作电解质阶段性：两个阶段可见阶段；不可见阶段第九章传染与免疫定比性第九章传染与免疫免疫学方法依据血清学反应的原理，用已知菌种、菌株或菌型制成抗血清，根据它是否与待鉴定的对象发生特异性的血清学反应来鉴定未知菌种、菌株或菌型第九章传染与免疫三、主要的抗原抗体反应凝集反应沉淀反应补体结合试验中和试验固定溶菌杀菌吞噬溶血钝化第九章传染与免疫

抗原与抗体的各种反应抗原种类所需辅助因子发生反应可溶性抗原无沉淀细胞或颗粒抗原无凝集鞭毛无固定或凝集细菌细胞补体溶菌或杀菌细菌细胞吞噬细胞+补体吞噬（调理）红细胞补体溶血细菌外毒素无毒素被中和病毒体无病毒被钝化第九章传染与免疫（一）凝集反应直接凝集反应

颗粒性抗原（完整的细菌、红细胞）（凝集原）与相应抗体（凝集素）在合适条件下反应出现肉眼可见的凝集团的现象直接法：玻片凝集法、试管法肥达氏试验Widal’stest：诊断伤寒或副伤寒玻片凝集试验：菌种鉴定与定型间接法：间接凝集试验（被动凝集试验）将可溶性抗原吸附到适当载体上，成为人工颗粒抗原，检测相应抗体从而产生肉眼可见的凝集反应反相间接凝集试验：检测HBsAG、甲胎蛋白、钩端螺旋体第九章传染与免疫间接凝集试验载体材料

人和动物的红细胞、活性碳、白陶土颗粒、聚苯乙烯乳胶微球测定对象

抗细菌抗体、病毒抗体、钩端螺旋体抗体、梅毒螺旋体抗体第九章传染与免疫（二）沉淀反应可溶性抗原（蛋白质、多糖或类脂溶液，血清，细菌抽提液等）与其相应的抗体在合适条件下反应并出现沉淀物现象注意：抗原与抗体之间的合适比例，一般要稀释抗原几个概念沉淀原：抗原，可溶性抗原：蛋白质、多糖或类脂溶液、血清、细菌抽提液、组织浸出液沉淀素：抗体经典沉淀反应与现代沉淀反应第九章传染与免疫经典方法现代方法环状沉淀反应絮状沉淀反应单向琼脂扩散法双向琼脂扩散法对流免疫电泳法火箭电泳法双向免疫电泳法沉淀反应第九章传染与免疫环状沉淀反应（Ringtest）环状试验：试管法

先在小口径的试管内加入已知抗血清（抗体），然后仔细将待检抗原加在血清层之上，使两层界限分明，数分钟后在界面上出现白色沉淀环者，为阳性应用：抗原的定性

法医学上鉴定血迹、食品卫生上鉴定肉的种类、病畜炭疽检验的Ascoli氏试验、媒介昆虫的嗜血种类的检验第九章传染与免疫絮状沉淀反应絮状反应、Flocculationprecipitation

将抗原与相应抗体在试管内或凹玻片上混匀，经一段时间即可出现肉眼可见的絮状沉淀颗粒，即阳性反应应用

诊断梅毒的康氏试验（Kahntest）测定抗毒素的絮状沉淀单位Flocculationunit第九章传染与免疫现代方法共同原理

让抗原与抗体在半固体凝胶介质中作相对方向的自由扩散或在电场中进行电泳，由于反应物的分子大小、形状和电荷强度等的不同，其扩散或泳动速度均不同，因此会在合适比例处发生特异的沉淀带特点：很高的灵敏度和分辨能力。第九章传染与免疫单向琼脂扩散试验单向免疫扩散法

将抗原溶液滴加在混有抗体的琼脂介质小孔中，抗原经过扩散后，可在小孔周围适当位置形成一沉淀环，环的面积可以进行抗原的定量测定第九章传染与免疫单向免疫扩散测定乳铁蛋白第九章传染与免疫双向琼脂扩散Ouchterlony法、双向免疫扩散法

将抗原抗体分别滴加在琼脂介质的不同小孔中，作相对方向的扩散，在两孔之间合适的部位形成沉淀线特点

灵敏度差、工作时间长18－24小时、有益于分析抗原第九章传染与免疫双向琼脂扩散的试验结果与分析根据沉淀线的性状判断是否存在着共同抗原决定簇

两条沉淀线完全融合两条互不干扰呈交叉状的沉淀线形成突出的小刺状第九章传染与免疫免疫扩散法检测Salmonella第九章传染与免疫对流免疫电泳法将双向琼脂扩散法与电泳技术相接合的方法抗原和抗体分别置于凝胶板电场负、正极附近的小孔中，通电后，抗原向正极移动，而抗体向负极移动，在两孔间合适的抗原、抗体浓度处会形成一条沉淀线特点

速度快、灵敏度高应用

乙型肝炎表面抗原、甲种胎儿蛋白（AFP,α－foetoprotein，检测原发性肝癌）检测第九章传染与免疫

第九章传染与免疫火箭电泳法RocketElectrophoresis

一种单向琼脂扩散法与电泳技术相结合的方法在已混有抗体的凝胶板上挖一个小孔，向孔内滴加抗原并进行电泳，在沿着电泳方向形成火箭形沉淀线，沉淀线的高度与抗原量成正比，可用于AFP定量测定第九章传染与免疫火箭电泳第九章传染与免疫双向免疫电泳法火箭电泳与血清免疫电泳相结合的方法先将血清用电泳分离出各种成分，然后切下凝胶板转移至另一加有抗血清的凝胶上，进入垂直方向的第二次电泳，形成火箭样的沉淀线第九章传染与免疫（三）补体结合试验什么是补体结合试验？

一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素（红细胞的特异抗体）是否发生溶血反应作指示的一种高灵敏度的抗原与抗体结合反应。参与补体结合试验的系统与成分待检系统：已知或待测的抗原或抗体指示系统绵羊红细胞溶血素补体：豚鼠血清第九章传染与免疫补体结合试验反应的基本原理

补体可以与任何抗原和抗体的复合物相结合指示系统如遇到还未被抗原和抗体复合物所接合的游离补体，会出现肉眼易见的溶血反应特点

测未知抗体和未知抗原；同时适合沉淀反应和凝集反应；提高血清学反应的灵敏度操作复杂、影响因素多应用

检测梅毒的华氏试验WassermanTest、Ig及其L链、抗DNA抗体、抗血小板抗体、HBsAg、病毒分型、病毒病和钩端螺旋体的诊断第九章传染与免疫补体结合试验示意图第九章传染与免疫（四）中和试验由特异性抗体抑制相应抗原的生物学活性的反应抗原的生物学活性

外毒素的毒性酶的催化活性病毒的感染性实例抗链球菌O抗体：风湿病患者的临床诊断第九章传染与免疫中和试验可以在敏感动物体内(包括鸡胚)，体外组织(细胞)培养或试管内进行。观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡，能否抑制病毒的细胞病变效应或中和毒素对细胞的毒作用；以及测定抗体的其他生物学效应。第九章传染与免疫四、现代免疫标记技术现代免疫学技术

免疫标记技术免疫定位分析免疫亲和层析免疫生物传感器技术免疫标记技术第九章传染与免疫免疫标记技术及其特点免疫标记技术（immunolabellingtechnique）

将抗原或抗体用荧光素、酶、放射性同位素或电子致密物质等加入标记，借以提高其灵敏度的一类新技术现代免疫标记技术的优点

特异性强灵敏度高应用范围广反应速度快易观察，能定性、定量、定位第九章传染与免疫常用的现代免疫标记技术免疫荧光技术免疫酶技术放射免疫测定免疫电镜技术发光免疫测定法第九章传染与免疫（一）免疫荧光技术荧光抗体法：将结合有荧光素的荧光抗体进行抗原

抗体反应的技术：荧光素+抗体→荧光抗体+抗原→有荧光抗原抗体复合物（可在荧光显微镜下观察）以提高免疫反应的灵敏度和适合显微镜观察常用的荧光素

异硫氰酸荧光素罗丹明二氯三嗪基氨基荧光素DTAF

镧系稀土元素应用：疾病快速诊断、生物学研究第九章传染与免疫罗丹明

可与抗体球蛋白中赖氨酸的氨基结合，在蓝紫光激发下，可分别出现鲜明的黄绿色及玫瑰红色第九章传染与免疫（二）免疫酶技术Enzymeimmunoassay,酶免疫测定

免疫酶联法，用酶作标记的抗体或抗抗体来进行抗原抗体反应的高灵敏度的免疫标记技术工作原理

酶标抗体或抗抗体进行抗原抗体反应后，用酶的特殊底物处理标本，由于酶的催化作用，可使原来无色的底物通过水解、氧化或还原反应而显示颜色酶的作用类似于荧光素第九章传染与免疫酶免疫测定第九章传染与免疫酶免疫测定的优点反应产生的颜色，可用肉眼或普通光镜观察标本经酶标抗体染色后，还可用其它染料复染特异性强灵敏度高可长期保存第九章传染与免疫2、标记酶的条件和常用的标记酶作为标记酶的条件

纯度高、高溶性、特异性强、稳定性高测定方法简单、灵敏、快速与底物作用后有呈色反应与抗体交联后仍有酶活第九章传染与免疫标记酶常用的标记酶

辣根过氧化物酶HRP：糖蛋白（由酶蛋白和铁卟啉），Mw4.0×104，底物为二苯基联苯胺，水解后产生棕褐色沉淀物碱性磷酸酶：脲酶

β－半乳糖苷酶酶免疫测定的应用组织切片、细胞培养标本等组织或细胞抗原定位可溶性抗原或抗体的测定第九章传染与免疫常见的免疫酶技术酶联免疫吸附法

双抗体夹心法间接免疫吸附测定法斑点酶免疫吸附法酶标记免疫定位

免疫组织化学免疫印迹第九章传染与免疫3、酶联免疫吸附试验法Enzymelinkedimmunosorbentassay,

双抗体法（夹心法，三明治法）

检测标本中是否含特定抗原间接法

检测血清中是否含特