实验动物生物样本处理规范征求意见稿

1实验动物生物样本处理规范GB/T41908-2022《人类粪便样本采集与处理》GB/T42060-2022《医学实验室样品采集、GB/T40352.1-2021《人类组织样本GB/T38735-2020《人类尿液样本采集与处理第1部分：手术切除组织》GB/T38576-2020《人类血液样本采集与处理》GB/T37864-2019《生物样本库质量和能GB/Z44314-2024《生物技术生物样本保藏动物生物样本保藏要求》T/CNSS017-2022《研究用人乳样本4样本处理前准备4.1样本处理方案的制定路线等；处理样本类型（全血、血清、血浆或细胞）；4.2设备和耗材确认24.3样本储存条件确认4.4个人防护准备必须按处理场地要求戴上手套、口罩、安全眼镜或护目镜，穿好实验服，注意自我4.5场地、人员确认场地应是专属场地，禁止办公使用；场地有紫外和其他消毒设施，组织样本处理实验室应符合GB14189-2008实验室生物安全5.1组织样本处理将新鲜组织样本切割为厚度控制在0.5cm以内的组织块，在离体后30min内，装入置有RNAlater保在OTC包埋模具中放入OTC包埋剂，将提前分割至约为0.5cm×0.5cm×0.5cm的新鲜组织块（离体过程应避免在OTC包埋剂中产生气泡，去除任何产生在组织样本周围的气泡。将包埋好的组织放在液氮5.1.4.1固定将新鲜取材的组织样本分割至大小约1.5c用合适的透明剂，将组织中的有机溶剂充分置换。用融化的石蜡将组织中的透明剂充分5.2血液样本处理35.2.1.1将抗凝采血管放置于离心机中,离心力调至1500g~2000g5.2.1.2离心机停止后,取出采血管(不可颠倒),血样分为三层:上层为浅黄色澄清的血浆层,中层为灰5.2.3.1将普通血清管(无添加剂采血管)室温静置1h或快速血清管(含促凝剂采血管)室温静置5min或惰性分离胶促凝管(含惰性分离胶和促凝剂采血管)室5.2.3.2然后将采血管放置于离心机中,离心力调至1500g~2000g层为暗红色的血凝块层,或三层(惰性分离胶促凝管),上层为浅黄色澄清血清层,中层为透明的分离胶5.2.3.4使用合适的移液枪或一次性巴氏吸管小心吸取血清层,避免吸取血凝块层或分离胶层,将血清5.2.5.1取新鲜抗凝血(一般为EDTA抗凝血),进5.2.5.3根据血量准备合适体积的离心管,将适量体积的细胞分离液(具体参考试剂说明)注入离心管5.2.5.5离心后,离心管中由上至下细胞分为四层:第一层为血浆层,第二层为环状乳白色单个核细胞层,5.2.5.6收集第二层单个核细胞至另一干净离心管中,加入适量细胞洗涤液,离心,弃去上清,将沉淀细5.2.5.7收集所得血液中的单个核细胞按预期要求进5.3唾液样本的处理5.3.1根据预期研究目的，可选择添加合适的唾液保存液(如脱氧核糖核酸酶(DNase)抑制剂、核糖核酸酶(RNase)抑制剂、蛋白酶抑制剂、5.3.2根据预期研究目的，可选择对唾液进行离心处理:5.4精液样本的处理5.4.1精液样本在处理前宜首先检查其活率和密度,然后确定稀释倍数。5.4.2将精液与稀释液同时置30℃左右的恒温箱或水5.4.3将稀释液沿缓慢加入盛放精液样本的容器,并轻轻摇动,使之混合均匀。如做高倍稀45.4.4稀释完毕后,再进行活率密度检查,如活率与稀释前一样,则可进行分装、保5.5阴道内液样本的处理5.5.1根据后续实验用途（细菌培养、核酸提取、代谢组、宏基5.5.2阴道内液样本采集完后，将拭子头放入盛有保存液的保存管中，折断拭子，保留拭子头在保存5.5.3如采用冲洗法进行采集，则将阴道冲洗液直接加入盛有保存液的保存管中，盖上管盖，振荡混5.5.4应用于检查雌性动物的生理周期等特征时，直接进行涂片染色。5.6乳汁样本的处理5.6.1为维持样本的完整性，宜在采集后4小时内，在2℃~8℃条件下对乳样进行保存或处理。5.6.2乳样可能含细胞和其他成分，宜在等分分样5.7尿液样本处理5.7.1预处理5.7.1.1防腐处理应根据研究方案或样本检测目的,添加合适的防腐剂(如甲醛、甲苯、硼酸、叠氮钠5.7.1.2蛋白酶抑制处理应根据研究方案或样本检测目的,确定是否加入蛋白酶抑制剂以防止样本中5.7.1.3核酸保护处理应根据研究方案或样本检测目的,确定是否加入核酸保护液以防止样本中核酸完成预处理的样本在储存前应根据研究方案或样本检测目的选择适宜的分装量进行分装,确保满足使用要求的同时避免了对样本的反复冻融。分装应符合但不限于以下要求:5.7.2.1未经离心处理的尿液样本可直接分装成全尿样本进行储存或后5.7.2.2需离心处理的样本应根据研究方案或样本检测目的选择适宜离心条件,获得尿液上清和尿沉渣样本,其分装要求如下:5.7.2.3特殊处理的尿液样本(如膜干燥真空保存部分尿液成分5.8粪便样本处理5.8.1采用称重法将1g-2g粪便55.8.2原始粪便样本可进一步处理以获得相关