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PAGEPAGE7专题综合评估(五)eq\o(\s\up7(作业时限:60分钟作业满分:100分),\s\do5())第Ⅰ卷(选择题,共60分)一、选择题(每小题4分,共60分)1.DNA的粗提取中,加入与滤液体积相等的、冷却的A溶液,静置2~3min,溶液中会出现白色丝状物。上面的A溶液是指(D)A.0.9%的NaCl溶液B.0.14mol/L的NaCl溶液C.质量分数为15%的盐酸D.体积分数为95%的酒精溶液解析:DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液,故滤液与体积分数为95%的冷却的酒精溶液混合后,就会得到白色的丝状物。2.与析出DNA黏稠物有关的叙述,不正确的是(C)A.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度B.在操作时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出D.当丝状黏稠物不再增加时,此时NaCl溶液的浓度相当于0.14mol/L解析:向含有DNA的溶液中加入蒸馏水后,NaCl溶液的浓度会变小,当NaCl溶液的浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最小析出,而蛋白质的溶解度是增大的,不会析出。3.下列关于DNA和血红蛋白的提取与分别试验的叙述中,错误的是(D)A.提取哺乳动物红细胞中的DNA和蛋白质可以采纳蒸馏水涨破细胞的方法B.采纳不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质C.蛋白质纯化过程中采纳透析法可去除溶液中的小分子杂质D.血红蛋白只能采纳凝胶色谱法纯化,DNA则可采纳电泳、盐析等方法纯化解析:DNA和蛋白质存在于细胞内,用动物作材料提取DNA和蛋白质,都要用蒸馏水处理,使细胞吸水涨破,释放出其中的蛋白质或DNA,A正确;DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,因此可以采纳不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法去除蛋白质等杂质,B正确;蛋白质纯化过程中,由于小分子杂质可以通过透析袋,大分子蛋白质不能通过透析袋而留在袋内,因此可以采纳透析法去除溶液中的小分子杂质,C正确;凝胶色谱法纯化血红蛋白只是很多纯化方法中的一种,蛋白质的纯化也可以采纳电泳、盐析等方法纯化,D错误。4.下列几种试验装置所示信息,有错误的是(D)解析:凝胶色谱法分别血红蛋白的原理是大分子物质由于直径较大,不易进入凝胶颗粒的微孔,而只能分布在颗粒之间,所以在洗脱时向下移动的速度较快。小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外,还可以进入凝胶颗粒的微孔中,即进入凝胶相内,在向下移动的过程中,从一个凝胶内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入和扩散,小分子物质的下移速度落后于大分子物质,从而使样品中分子大的先流精彩谱柱,中等分子的后流出,分子最小的最终流出,所以D错误。5.下列关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法中,正确的是(A)A.以DNA为模板,使DNA子链从5′端延长到3′端的一种酶B.TaqDNA聚合酶必需在每次高温变性处理后再添加C.DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列D.TaqDNA聚合酶是从深海生态系统中发觉的解析:DNA聚合酶不能从头起先催化合成DNA,而只能从DNA单链的3′端延长子链;TaqDNA聚合酶能耐高温,所以在反应体系中可反复利用,无需另外再添加;PCR扩增的是引物之间的固定长度的DNA序列;TaqDNA聚合酶是1966年从美国黄石公园的一个热泉内的某种菌体内发觉的。6.PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程。下列说法错误的是(B)A.甲过程高温使DNA变性解旋,该过程不须要解旋酶的作用B.丙过程用到的酶在高温下失活,因此在PCR扩增时须要再添加C.假如把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,循环3次后,在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%D.PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变解析:PCR中解旋是通过高温进行的,故甲过程高温使DNA变性解旋,该过程不须要解旋酶的作用,A正确;丙过程用到的酶为耐高温的DNA聚合酶,在高温下不会失活,因此在PCR扩增时不须要再添加,B错误;假如把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,循环3次后,形成的DNA分子为8个,而含有15N标记的DNA分子为2个,故在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%,C正确;PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变,D正确。7.PCR反应的最大特点是具有较大扩增实力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。下列防止污染的方法中不包括的是(C)A.将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头小套、小离心管应一次性运用,以免交叉污染C.全部PCR试剂都应放置于大瓶分装,以削减重复加样次数,避开污染机会D.PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱解析:全部的PCR试剂都应放置于小瓶分装,一次性用完,避开因多次运用造成污染。8.下列关于PCR引物的说法,不正确的是(C)A.引物是PCR过程中与模板DNA部分序列互补,并能引导模板DNA的互补链合成的核苷酸序列B.引物常依据须要扩增的目标DNA的碱基序列用化学合成的方法获得C.DNA聚合酶只能使DNA链从引物的3′端起先向引物的5′端延长D.引物的3′端必需具有游离的—OH解析:引物是RNA或单链DNA片段,它能与母链的一段碱基互补配对,因此可依据扩增目标DNA的碱基序列用化学方法合成。DNA聚合酶使DNA链从引物的5′端向引物的3′端延长。9.在DNA粗提取与鉴定试验中,将其次次过滤获得的纱布上含有的DNA的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下:序号操作过程①放入2mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤②再加0.14mol/L的NaCl溶液,搅拌后过滤③再加入冷却的、同体积的95%酒精溶液,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物上述操作过程正确的是(C)A.①②B.①②③C.①③D.②③解析:其次次过滤后纱布上的是粗提取的DNA,此DNA还含有杂质,因此将其溶于2mol/L的NaCl溶液中,再进行过滤,以除去不溶于2mol/L的NaCl溶液的杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却的95%酒精即可析出DNA。然后挑出DNA进行鉴定。答案为C。10.下图为凝胶色谱法分别蛋白质示意图和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图。据图分析不正确的是(B)A.在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发觉柱内有气泡存在,就须要重装B.图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢,所以最终从层析柱中流出来C.图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小D.已知凝胶中的SDS带负电,则应在电泳槽的①处接电源负极,②处接电源正极解析:在装填凝胶色谱柱时,凝胶装填在色谱柱内要匀称,不能有气泡存在,因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序,A正确;图甲中大分子蛋白质因不简单进入凝胶内部的通道,路程短,移动速度快,所以最先从层析柱中流出来,B错误;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小,因此图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小,C正确;凝胶中的SDS带负电,所以电泳槽的①处接电源负极,②处接电源正极,D正确。11.细胞破裂后,各种蛋白质就会被释放出来,再依据蛋白质的不同特性进行提取。下列关于蛋白质提取的措施中,不正确的是(D)A.酸性蛋白质可用稀碱性溶液提取B.水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)提取C.脂溶性蛋白质可用有机溶剂提取D.碱性蛋白质可用强酸性溶液提取解析:提取蛋白质的基本原理是依据蛋白质的物理性质,加入不同的试剂,使蛋白质溶于试剂中而提取蛋白质。强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。12.下列有关酶的制备和应用的叙述,正确的是(A)A.酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶B.透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分别与纯化C.棉织物不能运用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤D.多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层解析:酸解法不能用于酶的分别与纯化,棉织物可以运用添加纤维素酶的洗衣粉洗涤,纤维素酶虽不能干脆去除衣物上的污垢,但能使纤维的结构变得蓬松,从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗涤剂充分接触,使洗涤剂的去污效果更好。多酶片中的胃蛋白酶应位于片剂的最表层。13.凝胶色谱分别法分别蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是(A)A.变更蛋白质分子通过凝胶的路径B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度C.将酶或细胞固定在凝胶中D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度解析:凝胶的种类很多,但每一种凝胶内部都有通道,相对分子质量小的蛋白质分子简单进入通道,移动距离变长,移动速度减慢,而相对分子质量大的分子不能进入通道,其移动距离短,移动速度快,因此可把相对分子质量不同的蛋白质分开。14.有关缓冲溶液的说法不正确的是(A)A.缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变B.缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成C.调整缓冲剂的运用比例就可以制得在不同pH范围内运用的缓冲液D.生物体内的各种生物化学反应都是在肯定的pH下进行的解析:在肯定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响,维持pH基本不变,超过肯定范围,缓冲溶液就起不到这样的作用了。15.下列对在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是(C)A.加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B.让吸管管口沿管壁环绕移动,贴壁加样至色谱柱顶端,不要破坏凝胶面C.打开下端出口,待样品完全进入凝胶层后干脆连接缓冲液洗脱瓶起先洗脱D.待红色的蛋白质接近色谱柱底端时,每5mL收集一管,连续收集流出液解析:待样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口,当心加入缓冲液到适当高度,连接缓冲液洗脱瓶,打开下端出口,进行洗脱。第Ⅱ卷(非选择题,共40分)二、非选择题(共40分)16.(20分)下图为“DNA的粗提取与鉴定”试验的相关操作。(1)图中试验材料A可以是洋葱(菜花等)等,研磨前加入的B应当是洗涤剂和食盐。(2)通过上述所示步骤得到滤液C后,再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是使DNA溶解,再过滤得到滤液D,向滤液D中加入蒸馏水的目的是使DNA(溶解度下降而沉淀)析出。(3)在“DNA的粗提取与鉴定”试验中,将含有肯定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的4种溶液中,经搅拌后过滤,获得如表所示的4种滤液,含DNA最少的是滤液H。1B液中研磨搅拌后过滤滤液E22mol/LNaCl溶液搅拌后过滤滤液F30.14mol/LNaCl溶液搅拌后过滤滤液G4冷却的95%的酒精溶液搅拌后过滤滤液H(4)DNA鉴定的原理是在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成蓝色。解析:(1)用洋葱、菜花等破裂细胞时,加入肯定量的洗涤剂和食盐,洗涤剂可以溶解细胞膜,有利于DNA的释放,食盐主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。(2)在含有DNA的滤液中,加入2mol/L的NaCl溶液,可以使DNA溶解而杂质析出;在滤液D中加入蒸馏水,当NaCl浓度为0.14mol/L时,DNA溶解度最小而析出。(3)在滤液E中,只是除去了部分杂质,则含DNA较多;在滤液F中,除去了较多的蛋白质等,则含DNA最多;在滤液G中,因DNA析出,则含DNA较少;在滤液H中,因DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精,则含DNA最少。(4)DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。17.(20分)PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,复制出许很多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本过程如下:注:图中“▄”表示每次扩增过程中须要的引物(用P代表)。每个引物含20个脱氧核苷酸,并分别与DNA片段两端碱基互补,其作用是引导合成DNA子链。请据图分析回答:(1)PCR技术的原理是模拟生物体内DNA复制的过程。(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是使DNA双链解开成为单链,其作用相当于细胞内解旋酶的作用。(3)在③适温延长过程中,必需加一特定的DNA聚合酶,从图示中可推断,该酶与一般人体细胞中的DNA聚合酶相比,最主要的特点是耐高温。(4)假如引物都用3H标记,从理论上计算,DNA片段经3次扩增所得的8个DNA分子中,含有3H标记的DNA

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