2025年人教B版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教B版选择性必修3生物下册阶段测试试卷254考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、下图是利用甲；乙两种植物的各自优势；通过植物细胞工程技术培育高产、耐盐的杂种植物的实验流程图。下列相关叙述错误的是（）

A.c是经培养后得到的具有耐盐性状的丛芽或胚状体B.进行d选择时，要将植株种在一定浓度的高盐环境中C.目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异，且不可育D.得到杂种细胞b的主要依据是细胞膜具有流动性原理2、某中学生物兴趣小组采用不同方法进行DNA粗提取实验；具体流程如下图所示。查阅资料得知，SDS（一种表面活性剂）除了能瓦解细胞膜和核膜外，还能与脂质和蛋白质结合。当SDS遇到钾离子时，钾离子可以置换SDS中的钠离子，产生不溶于水的PDS沉淀。下列分析正确的是（）

。3g新鲜猪肝。

尽量剪碎；加2g食盐、快速研磨后；加20mL蒸馏水，搅排，获得勺浆。

方法一。

①向匀浆中加入2mL的洗涤剂；放入65℃水浴锅中水浴10min，期间搅拌3次；

②用2层纱布过滤匀浆取滤液。

向相关液体中加入2倍体积的95%的冷酒精；静置3min，可见絮状物生成。

絮状物呈浅黄色。

方法二。

①向匀浆中加入2mL10%的SDS；放入65℃水浴锅中水浴10min，期间搅拌3次；

②用2层纱布过滤匀浆取滤液。

絮状物略呈黄色。

①向匀浆中加入2mL10%的SDS；放入65℃水浴锅中水浴10min，期间搅拌3次；

②用2层纱布过滤匀浆取滤液。

絮状物略呈黄色。

方法三。

①②步骤同方法二；

③向匀浆中加入2mL10%氯化钾溶液，搅拌均匀后，离心3min，取_____________________。

絮状物呈白色。

①②步骤同方法二；

③向匀浆中加入2mL10%氯化钾溶液，搅拌均匀后，离心3min，取_____________________。

絮状物呈白色。

A.向剪碎的猪肝中加入食盐的目的是使细胞过度失水破裂B.洗涤剂与SDS的使用都有利于去除脂质和蛋白质等杂质C.65℃处理可去除部分蛋白质是因为DNA与蛋白质对高温的耐受性不同D.方法三的“？”处为“上清液”，该方法所得DNA纯度最低3、我国科学家早于1974年就培育出了世界上第一个单倍体作物新品种——单育1号烟草，下列相关叙述不正确的是（）A.植物组织培养需要经过脱分化和再分化过程B.不同植物激素的比例会影响植物细胞的发育方向C.单倍体育种过程利用了植物组织培养技术D.以一株开花烟草的不同部位为外植体培育的植株基因型相同4、从目前来看，下列哪一生物科技成果没有运用基因工程技术（）A.试管动物技术，克隆羊多莉B.抗虫棉、转基因玉米C.利用大肠杆菌生产胰岛素D.利用酵母菌细胞生产乙肝病毒疫苗5、下列有关基因工程操作工具的叙述正确的是（）A.限制性核酸内切酶将DNA双链切割成两条单链B.限制性核酸内切酶的基因只存在于微生物中C.质粒通常具有多个限制性核酸内切酶切点，以便与外源基因连接D.将动物基因转人大肠杆菌等宿主细胞内只能以病毒为载体评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)6、下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径；下列有关叙述正确的是（）

A.获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因B.奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同C.成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养7、化工厂污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A；研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）实验的主要步骤如图所示。下列叙述错误的是（）

A.培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌B.实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落D.将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种8、下列有关动物细胞培养的叙述正确的是（）A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胃蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞全部衰老死亡9、我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是瓮中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列叙述正确的是（）A.用酒曲酿酒过程中，为加快微生物代谢需不断通入O2B.酒液温度的变化与酒曲中微生物呼吸作用释放热量有关C.起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放形成的D.“曲势尽”可能是瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致10、以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾细胞及骨髓瘤细胞（2n=62-68），筛选杂交瘤细胞，制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体（mAb），相关检测结果如图A、B所示。有关说法正确的是（）

图A杂交瘤细胞染色体数目图B不同浓度mAb对RecQ蛋白结合DNA活性的影响A.重组大肠杆菌RecQ解旋酶可刺激相应B淋巴细胞增殖分化B.单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和2次抗原检测C.杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失D.该mAb能特异性与RecQ解旋酶结合，在稀释度为1/800时可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合11、高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌；其筛选过程如下图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图2所示情况。下列选项正确的是（）

A.过程①②合称为稀释涂布平板法B.甲乙试管中的液体均为选择培养基C.Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法D.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种12、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源13、某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊；为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场通过以下流程进行了相关操作。下列有关叙述错误的是（）

A.在体外受精前对采集到的精子要进行获能处理B.用孕激素对供体母羊进行处理，可获得更多的卵母细胞C.为避免受体母羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂D.为了提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术14、2019年12月以来，新型冠状病毒导致的肺炎在世界范围爆发，造成多人死亡。科学工作者经研究，发现了数种快速检验新冠肺炎病原体的方法，以正确诊断。下列与新型冠状病毒研究、诊断有关的说法中正确的是（）A.镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体B.PCR技术：体外基因复制技术，可把病原体的基因逆转录后在几十分钟内扩增到数百万倍C.抗原—抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，发现病原体D.DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理来检测病原体评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)15、第三步：将目的基因导入______16、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。17、动物基因工程：______。18、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。19、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。20、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。21、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________22、生物武器的致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，但对植物无害。（选择性必修3P111）()23、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、判断题(共4题，共8分)24、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。()A.正确B.错误25、基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面。（选择性必修3P87）()A.正确B.错误26、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。()A.正确B.错误27、中国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共4分)28、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物；该菌具耐高盐的特性。哥伦比亚血平板含无菌脱纤维羊血，金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。如图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答：

（1）从功能上看7．5％NaCl（高盐）肉汤培养基属于________培养基，用该培养基对金黄色葡萄球菌进行培养的主要目的是提高___________。

（2）从培养过程分析，振荡培养可以____________________________；更有利于微生物的生长。

（3）在配制哥伦比亚血平板时，添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）图中血平板上的接种方法是________________。经规范操作并多次重复，血平板上均出现__________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。但牛奶供应商仍认为此菌并非牛奶所携带，因此需要对本次操作进行完善，具体方案是________________。评卷人得分六、综合题(共3题，共30分)29、角蛋白酶（KerA）能降解角蛋白，在饲料工业中具有广阔的应用前景。实验小组将KerA基因导入大肠杆菌中，获得了能高效表达KerA的工程菌，如图表示KerA基因重组质粒的构建和筛选过程，（注：TikⅢ、BamHI、EcoRI和PstI表示限制酶，APr表示氨苄青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因；大肠杆菌不含氨苄青霉素抗性基因和新霉素抗性基因）。请回答下列问题：

（1）构建重组质粒时宜选用_____两种限制酶切割目的基因和质粒，而不选用另外两种限制酶的原因是_____。

（2）将重组质粒导入大肠杆菌时要用_____处理大肠杆菌，目的是_____。大肠杆菌细胞作为原核细胞，常作为基因工程的受体细胞，其优点是_____（答出两点）。

（3）影印接种就是用丝绒做成与平板大小相近的印章，然后把长有菌落的母平板倒置在丝绒印章上，轻轻印一下，再把此印章在新的培养基平板上轻轻印一下。经培养后，比较平板上长出的菌落与母平板上的菌落位置，推测可能导入了重组质粒的菌落。筛选重组质粒时，培养基甲应添加的抗生素是_____，培养基乙添加的抗生素是_____，根据图示结果，从培养基甲中应选择编号为_____的菌落进行选择培养，其他菌落导入的是_____。30、青蒿素是最有效的抗疟疾药物，但野生黄花蒿青蒿素产量低，为缓解青蒿素供应不足的状况，科学家将tms基因和tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织；改造过程用到的部分结构如图。

（1）科学家将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞的常用方法是_____________________。

（2）图中结构P、T是基因成功转录的保证，其中结构P的作用是____________________。为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来，图中还缺少的结构是___________。

（3）在获得转基因的冠瘿组织过程中，__________________________是核心步骤，在具体操作中常常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因和运载体的两端分别进行切割，这样做的好处是______________________________________________。

（4）T-DNA的作用是可以使目的基因进入植物细胞，并插入到植物细胞中染色体的DNA上，要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上，可采用________技术。

（5）与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快，原因可能是________________________________。31、特异性重组的Cre/loxP敲除系统是首先利用同源重组将基因组上的靶基因替换为两端带有重组位点loxP的karR基因，然后由重组酶Cre识别loxP位点并发生重组反应，去除基因组上的karR基因，进一步利用质粒的温敏特性将其消除，从而实现靶基因的敲除。下图是研究人员利用Cre/loxP敲除系统敲除谷氨酸棒状杆菌argR基因（精氨酸代谢的调控因子），获得高产精氨酸菌株的过程，其中kanR是卡那霉素抗性基因；cat是氯霉素抗性基因，HindⅢ；BanHⅠ是限制酶。请据图回答下列问题：

(1)①过程的原料是_____，所需的酶是_____。

(2)下列引物1、引物2用于扩增argR基因上游序列，引物3、引物4用于扩增argR基因下游序列，下划线序列是相关限制酶识别序列，则HindⅢ、BamHⅠ的识别序列分别是_____、_____。

引物1：5'-GTCGACGGTATCGAT____AGGACTCAAACTTATGACTTCACAACCA-3'

引物2：5-CGCCCTATAGTGAGTCGTATTGGGATTTAAGTTTTCCGGTGTTGACG-3'

引物3：5'-CTTTAGTGAGGGTTAATTGCGCGTTAATCGCTTGTTAATGCAGGCA-3'

引物4：5'-CGCTCTAGAACTAGT____CAAAGCCTCGTGAGCCTTAATC-3'

(3)②过程（融合PCR）是采用具有互补末端引物，形成具有重叠链的PCR引物，通过PCR引物重叠链的延伸，从而将不同来源的DNA片段连接起来。下列引物5、引物6用于扩增两端含loxP的karR片段，引物5、引物6可分别与_____、_____（引物1；引物2、引物3、引物4）重叠从而实现不同DNA片段的连接。

引物5：5'-CGTCAACACCGGAAAACTTAAATCCCAATACGACTCACTATAGGGCG-3'

引物6：5-TGCCTGCATTAACAAGCGATTAACGCGCAATTAACCCTCACTAAAG-3'

(4)④过程将质粒3导入_____态谷氨酸棒状杆菌，⑤过程在同源重组的作用下谷氨酸棒状杆菌株的argR基因被替换为_____片段。

(5)⑥过程导入质粒4的目的是_____。

(6)由于质粒4的温敏特性，⑦过程先在37℃条件下培养消除质粒4，然后用影印接种（A、B、C三个培养基中接种菌种的位置相同）培养验证其抗性，其结果如下图，则_____是目的基因被敲除的目的菌株。

参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、C【分析】【分析】

分析题图：图示为培育高产耐盐的杂种植株的培育过程，其中a表示酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，b表示诱导原生质体融合；c为丛芽或胚状体，d为筛选耐盐植株。

【详解】

A；c是经愈伤组织再分化后得到的具有耐盐性状的丛芽或胚状体；A正确；

B；进行d选择时；要将植株种在一定浓度的高盐环境中，以获得耐盐的植物，B正确；

C；目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异；含有同源染色体，理论上是可育的，C错误；

D、得到杂种细胞b是通过诱导原生质体融合实现的；原理是细胞膜具有流动性，D正确。

故选C。2、C【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

1；DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性。

2；DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；实验中；向剪碎的猪肝中加入食盐，食盐能溶解DNA，A错误；

B；根据题干信息；洗涤剂可破坏细胞的脂质细胞膜及核膜，而SDS除了能瓦解细胞膜和核膜外，还能与脂质和蛋白质结合，所以洗涤剂不利于出去蛋白质，SDS有利于除去蛋白质，B错误；

C；将猪肝匀浆放入65℃水浴锅中水浴10min以除去部分杂质的主要实验原理是蛋白质在65℃高温下会变性而DNA能耐受这一温度；C正确；

D；方法三的步骤③中；由于钾离子可以置换SDS中的钠离子，产生不溶于水的PDS沉淀，因此离心3min，可以除去不溶于水的PDS沉淀，上清液中含有DNA，故离心后应取上清液，但此时纯度不高，还需要加入2倍体积的95%的冷酒精进行提纯，此时纯度更高，D错误。

故选C。

【点睛】3、D【分析】【分析】

植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性；其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松；无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。

【详解】

A；植物组织培养需要经过脱分化形成愈伤组织；而后经过再分化形成幼苗两个过程，A正确；

B；植物组织培养过程中；生长素和细胞分裂素的比例的不同，会影响植物细胞的发育方向，B正确；

C；单倍体育种过程包括花药离体培养和秋水仙素处理两个过程；其中花药离体培养利用了植物组织培养技术，C正确；

D；以一株植物的叶片或花药为外植体培育的植株基因型不同；以花药为外植体培育的植株的遗传物质是以叶片为外植体培育的植株的一半，D错误。

故选D。

【点睛】

4、A【分析】【分析】

基因工程又称为DNA拼接技术；其原理是基因重组，最终的目的是将目的基因导入受体细胞中，使其在受体细胞中稳定存在并表达，最终定向改造生物的遗传性状。

【详解】

A；试管动物技术又称体外受精一胚胎移植；其原理是有性生殖，克隆羊“多莉”利用了核移植技术，两者没有运用基因工程技术，A正确；

BCD；抗虫棉、转基因玉米；利用大肠杆菌生产胰岛素以及利用酵母菌细胞生产乙肝病毒疫苗，均是将一种生物的基因导入另一种生物体内，从而使该基因在受体细胞中稳定存在并表达，采用的是基因工程技术，B、C、D错误。

故选A。5、C【分析】【分析】

1；基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因）③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的；对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。

【详解】

A；限制性核酸内切酶将一个DNA双链片段切割成两个DNA分子片段；而不是切割成两条单链，A错误；

B；限制性核酸内切酶主要来源于微生物；故限制性核酸内切酶的基因主要存在于微生物体内，B错误；

C；质粒是一种常用的运载体；必须具备的条件之一是：具有一个或多个限制性核酸内切酶切点，以便与外源基因连接，C正确；

D；常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒；可用质粒和噬菌体的衍生物作为载体，将动物基因转人大肠杆菌等宿主细胞内，D错误。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)6、A:D【分析】【分析】

分析题图：奶牛1的培育采用了基因工程技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛2的培育采用可基因工程技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；A正确；

B；奶牛2的培育过程中；在囊胚阶段注入了含有外源基因的受体细胞，因此其体内不同组织细胞的基因型可能不同，B错误；

C；奶牛3表明受体细胞的细胞核具有全能性；C错误；

D；结合分析可知；奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养，D正确。

故选AD。7、C:D【分析】【分析】

分析题干信息：该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌；在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

A；本实验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌”；因此培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌，A正确；

B；实验培养过程中进行振荡培养；可使目的菌和培养液充分接触，B正确；

C；为了防止污染；接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落，否则会导致高温使菌种死亡，C错误；

D；在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能生长繁殖；不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖，将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是对菌种“纯化”，D错误。

故选CD。

【点睛】8、A:C【分析】【分析】

动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A；用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织；因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；

B；动物细胞培养中需先用胰蛋白酶使所取的组织分散成单个细胞；胃蛋白酶的最适pH值呈酸性，而细胞培养液的pH大多数是7.2-7.4，B错误；

C；细胞存在接触抑制；因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；

D；动物细胞培养传到50左右不能再继续传代；部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，D错误。

故选AC。

【点睛】9、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲酿酒菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【详解】

A、用酒曲酿酒是利用了微生物细胞呼吸的原理，进行的是酵母菌的无氧发酵，不能一直通入O2；A错误；

B；由于呼吸作用会产热；故会导致酒液温度产生变化，B正确；

C、起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放到发酵液中形成的；C正确；

D；“曲势尽”可能是随着发酵的进行瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致酵母菌大量死亡；D正确。

故选BCD。10、A:C:D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原；从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养)，最后获取单克隆抗体。

【详解】

A；重组大肠杆菌RecQ解旋酶相当于抗原；能刺激机体产生相应的体液免疫应答，则在人体内可刺激B细胞增殖分化为浆细胞和记忆B细胞，A正确；

B；单克隆抗体的制备过程中需要进行2次筛选和1次抗原检测；第一次是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞；第二次是通过克隆化培养和抗体检测，进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞，B错误；

C；据图1分析；染色体数目有为80-93的细胞，免疫小鼠中B淋巴细胞染色体数目为40，骨髓瘤细胞染色体数目为62-68，两者之和大于80-93，故杂交瘤细胞在融合的过程中可能会发生染色体数目的丢失，C正确；

D、据图2分析，单抗稀释度为1/800时RecQ解旋酶结合DNA活性最低，可知mAb能特异性与RecQ解旋酶结合可显著抑制RecQ解旋酶与DNA的结合；D正确。

故选ACD。11、A:C:D【分析】【分析】

接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法；

稀释涂布线法：逐步稀释菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养；

平板划线法由接种环沾取少许待分离的材料；在无菌平板表面进行平行划线；扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。

【详解】

A；根据I号培养基上菌落分布均匀；可知①②过程为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲乙试管中的液体是用于样品稀释；应为无菌水，B错误；

C；由Ⅱ号培养基上上的划线区域可知从I号培养基上挑选的菌落进行接种的方法是平板划线法；C正确；

D；淀粉与碘液反应呈蓝色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。

故选ACD。12、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。13、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括:

①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体）。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。

②配种或人工授精。

③对胚胎的收集；检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查；此时的胚胎应发育到桑甚胚或胚囊胚阶段。④对胚胎进行移植。

⑤移植后的检查。

【详解】

A；采集到的良种公羊的精子；在体外受精前要进行获能处理，A正确；

B；对本地母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵；进而获得更多卵母细胞，B错误；

C；受体母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；不需要注射免疫抑制剂，C错误；

D；采用胚胎分割技术可提高已有胚胎的利用率；D正确。

故选BC。14、B:C:D【分析】【分析】

1；PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；原理：DNA复制。前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链；

2；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；镜检法：在电子显微镜下直接观察病人的痰液或血液；以发现病原体，但光学显微镜不能观察到新冠病毒，A错误；

B；PCR技术：体外基因复制技术；可在几十分钟内把病原体的基因扩增到数百万倍，再经过电泳与病毒样本进行对比，便能知道是否感染病毒，B正确；

C；病毒进入人体后会刺激机体产生特异性免疫反应；产生相应抗体，由于抗体与抗原结合具有特异性，因此抗原通过用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合以发现病原体，C正确；

D；DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA分子做探针；利用核酸分子杂交原理来检测病原体，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测是否感染病毒的目的，D正确。

故选BCD。三、填空题(共9题，共18分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】受体细胞16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代20、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆21、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。22、略

【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。致病能力强、攻击范围广。它可以直接或通过食物、生活必需品和带菌昆虫等散布，经由呼吸道、消化道和皮肤等侵入人、畜体内，造成大规模伤亡，同时可毁坏植物，该说法错误。【解析】错误23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、判断题(共4题，共8分)24、A【分析】【分析】

早期胚胎发育从受精卵开始；当卵裂分裂到16-32个细胞时，卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚，这一阶段及之前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。胚胎进一步发育，细胞开始出现分化，形成内细胞团；滋养层；随着胚胎进一步发育，胚胎内部出现了含有液体的囊腔—囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。

【详解】

囊胚时期聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故“胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化表述”正确。25、A【分析】【详解】

目前，基因工程技术已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品的产量等方面，例如转基因抗虫植物；将植物花青素代谢相关的基因导入牵牛花中，使其呈现自然界没有的颜色，提高了观赏价值；将外源生长素基因导入鲤鱼体内，转基因鲤鱼生长速率加快等，所以正确。26、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等，故正确。27、A【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。中国政府：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人。

【详解】

据分析可知；中国政府禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。

故正确。五、实验题(共1题，共4分)28、略

【分析】【分析】

1；选择培养基：人为提供有利于目的菌株生长的条件；同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。

2；根据题意分析；金黄色葡萄球菌可破坏哥伦比亚血平板上菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。

【详解】

（1）金黄色葡萄球菌具耐高盐的特性；可用7.5％NaCl（高盐）肉汤培养基进行选择培养，可进一步提高金黄色葡萄球菌的浓度。

（2）振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触，增加O2浓度；更有利于微生物生长。

（3）因为无菌脱纤维羊血上有红细胞；而高温会破坏红细胞。故添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌之后。

（4）根据图中最右边的图示可知；接种方法是平板划线法。已知金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。故若要初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，则血平板上要均出现周围出现透明溶血圈的菌落。本实验缺乏对照组，实验不完善，还需要设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组。

【点睛】

本题旨在考查学生理解选择培养基的原理和应用、平板划线法的使用要点，把握知识的内在联系并应用相关知识综合解决问题的能力。【解析】选择金黄色葡萄球菌的浓度使微生物与营养物质充分接触/增加O2之后防止高温破坏红细胞平板划线法周围出现透明溶血圈设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组六、综合题(共3题，共30分)29、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。从分子水平上检测目的基因的方法：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

【详解】

（1）构建重组质粒时需要切割含目的基因的DNA片段和质粒；分析图示可知，应该用EcoRI和PstI两种限制酶同时进行切割，不使用其他两种酶切制的原因是TihⅢ会破坏质粒的复制原点，而BamHI会破坏目的基因。

（2）将外源DNA分子导人大肠杆菌前要用钙离子处理大肠杆菌；目的是增大大肠杆菌细胞膜的通透性，使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态。原核细胞作为基因工程的受体细胞的优点在于细胞结构简单；繁殖速度快。遗传物质相对较少。

（3）PstI进行切割时破坏质粒上的氨苄青得素抗性基因，根据图示可知，b和c菌落能在培养基甲中增殖，但不能在培养基乙中增殖。因此培养甲添加的是新霉素，培养基乙添加的是氨苄青霉素。b；c菌落不能在培养基乙中生长；说明其插人了目的基因，质粒上的氨苄青霉素抗性基因被破坏；质粒上含有新霉素抗性基因的菌落仅仅能在新霉素培养基上增殖，因此其他菌落插入的是不含目的基因的普通质粒。

【点睛】

本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，能结合题干中信息答题，题目难度适中。【解析】EcoRI和PstITikⅢ会破坏质粒的复制原点，而BamHI会破坏目的基因Ca2+使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态细胞结构简单、繁殖速度快、遗传物质相对较少新霉素氨苄青霉素b、c不含目的基因的普通质粒30、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子