2025年陕教新版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年陕教新版选择性必修3生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（）A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.微生物的培养都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可C.牛肉蛋白胨培养基属于合成培养基，营养全面D.液体培养基有利于营养物质的吸收，可用于微生物的扩增培养2、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述正确的是（）

A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养3、“格瓦斯”是由酵母菌和乳酸菌双菌发酵的传统谷物发酵饮料。传统做法是采用俄式大面包为基质，加入菌种发酵生成微量乙醇、一定量的CO2以及丰富的有机酸物质。下列相关叙述中，正确的是（）A.两种菌的代谢类型相同B.CO2由两种菌共同产生C.发酵过程需要密闭条件D.两种菌间为互利共生关系4、据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是（）

A.限制性内切酶可以切断a处B.DNA聚合酶可以连接a处C.解旋酶可以使b处解开D.DNA连接酶可以连接c处5、下列哪项不是蛋白质工程的基本思路（）A.通过改造或合成基因获得所需要的蛋白质B.从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构C.根据所预期的蛋白质结构，推测相应的氨基酸序列D.根据推测的氨基酸序列，便能确定唯一对应的脱氧核苷酸序列6、如表所示为某微生物培养基的配方，下列有关说法错误的是（）。成分含量成分含量NaNO33gFeSO40.01gK2HPO41g葡萄糖30g琼脂15g定容至1000mLMgSO4·7H2O0.5g抗生素0.1万单位

A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基B.由培养基的原料可知，所培养的微生物是异养型，培养的微生物可以是酵母菌C.本培养基中抗生素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求D.若该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去抗生素和NaNO3，并加入尿素评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)7、科学家运用基因工程技术，将人凝血因子基因导入山羊的受精卵中，培育出山羊乳腺生物反应器，使山羊乳汁中含有人凝血因子。以下有关叙述错误的是（）A.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入山羊的受精卵B.在该转基因羊中，人凝血因子存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞C.人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNAD.科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因重组在一起，从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达8、下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中不正确的是（）A.果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用70％的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件9、营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量的原料产物。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。下列说法不合理的是（）

A.过程①的接种方法为稀释涂布平板法，过程②两种培养基的成分相同B.进行过程②培养时必须先将丝绒布转印至基本培养基上顺序不能颠倒C.统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致菌落数目偏大D.营养缺陷型菌株细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，可能与核孔复合体的蛋白质空间结构发生改变有关10、利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程，下列叙述不正确的是（）

A.对1号猪使用促性腺激素处理，可使其超数排卵B.采集到的卵母细胞需在体外培养到MⅡ期才能用于核移植C.产出的基因编辑猪的性染色体来自2号与3号猪D.为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用DNA测序的方法11、体外受精和胚胎移植都是在医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。判断下列相关表述错误的是（）A.精子需要获能才能与卵子结合，而卵子一经排出就具备受精能力B.精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子入卵C.经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致D.进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应12、下列关于现代生物技术的叙述正确的是（）A.从酵母菌细胞中提取到人干扰素说明相应的目的基因完成了在受体细胞中的表达B.在植物细胞与组织培养中，花药不能作为组织培养的材料C.在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞D.多种显微操作和处理技术使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)13、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。14、植物基因工程：______。15、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以将_____________水解成_________________和________________。16、胚胎工程。

胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由______、______、______、胚胎冷冻保存技术和______技术等组成的现代生物技术。17、我国政府同样禁止进行治疗性克隆实验。（选择性必修3P108）()18、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。19、第四步：_____评卷人得分四、实验题(共3题，共30分)20、I：“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破坏膜结构，使蛋白质变性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破坏膜结构，使蛋白质变性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性。某科研小组为了寻找提取腊梅DNA的优良方法，比较了两种提取DNA的方法，主要操作如下：

实验测定结果如下（表中OD260反映溶液中核酸的浓度；OD280反映溶液中蛋白质的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8，纯RNA溶液的OD260/OD280为2.0）。

。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200请回答下列问题。

（1）与常温下研磨相比，液氮中研磨的优点是_______；CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_______。

（2）氯仿一异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一异戊醇，蛋白质等杂质可溶于氯仿一异戊醇，实验过程中加入氯仿一异戊醇离心后，应取①______加异丙醇（异丙醇与水互溶）并离心进行纯化，利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是________。

（3）两种方法中，________法提取的DNA较多，其可能原因是_______。

II：某研究组对玉米开展了组织培养及相关研究；A；B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，请据图回答下列问题：

（1）植物组织培养过程中，外植体需要进行消毒处理。利用图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用________消毒30s后；用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。

（2）2，4-D常用于玉米愈伤组织的诱导，对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化，在配制分化培养基时需____（填“升高”“保持”或“降低）2，4-D的浓度。当玉米愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加____________；以促进苗形成。

（3）研究中用显微镜可以观察到的现象是_______（填下列序号）。

①绿色芽点细胞排列松散②刚融合的杂交细胞发生质壁分离。

③胚状体细胞中有叶绿体④分化的愈伤组织的各细胞的形态大小一致21、氨基丁酸（GABA）是具有降血压；抗焦虑等功能的水溶性氨基酸。科研人员通过实验研究了白方腐乳在前发酵盐腌和后发酵过程中GABA的含量变化；为寻找生产富含GABA腐乳的工艺奠定基础。实验步骤如下：

①豆腐白坯表面接种毛霉孢子后；在适宜的温度和湿度下培养48h，获得毛坯。

②将毛坯分层整齐地摆放在瓶中；盐腌5天。

③腌制后加入卤汤；置于28℃恒温箱中后发酵90天。

④分别采集各时段的腐乳坯样品；测定GABA含量，结果如图。

请分析并回答问题：

（1）前发酵过程中，毛坯的GABA含量发生明显变化的原因是毛霉产生的_______促进蛋白质水解产生GABA。

（2）步骤②中，加盐腌制的正确操作是______________。此过程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面与食盐抑制毛霉生长，酶活性降低有关；另一方面，豆腐中的水分渗出，部分GABA会____________而导致测定值减小。

（3）后发酵所加的卤汤中，具有抑菌防腐和调味的成分主要有_______。此过程中，发酵_______天后的白方腐乳出厂销售比较适宜。22、研究者改造与肠道共生的大肠杆菌；口服该工程菌后激活机体特异性免疫，实现肿瘤的预防和治疗。

(1)部分肠道细菌能够分泌外膜囊泡（OMV）；如图1．OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白。

研究者利用含图2所示元件的表达载体转化大肠杆菌制备工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，提高树突状细胞_____OMV的能力。

(2)为研究上述工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应的效果，研究者用健康小鼠进行如下实验：。组别第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小时后，饮用含阿拉伯糖的水结果检测第1组空载体+第12天，每组随机取5只小鼠等量的脾脏细胞与黑色素瘤细胞共培养，检测杀伤率，结果如图3．第2组ClyA-Fc+第3组ClyA-OVA+第4组第5组

注：“+”；“-”代表是否饮用；

口服工程菌12小时后其在肠道内存在数量较多。

①第4、5组的操作是_____。图3结果说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，理由是_____。

②为进一步验证上述结论，研究者进行如下实验：先加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，再加入_____（填选项前字母）保温后漂洗，检测荧光细胞的数目，若第5组_____为最大值；则上述结论成立。

A．带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物。

B．带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体。

C．第1-5组小鼠脾脏细胞。

③肿瘤患者术后极易复发，研究者重复上表实验，并在第3次口服工程菌后第50天给小鼠注射黑色素瘤细胞。目的是_____。

(3)该工程菌的研发为不同肿瘤的精准治疗和预防提供了可能。依据本研究，设计针对肺癌治疗的工程菌表达载体元件：_____。评卷人得分五、综合题(共4题，共28分)23、质粒通常用来构建基因表达载体；基因表达载体的构建是实施基因工程的核心。构建基因表达载体前首先要获取目的基因，PCR是获取大量目的基因的一种方法，如一个DNA片段上有10种基因，现只需要其中的某个基因，PCR技术就可以实现在生物体外复制特定DNA片段（目的基因）的目的。

（1）PCR反应体系的成分中有两种引物；在复性时引物会结合到互补DNA链，对两种引物的设计要求之一是：两种引物之间不能碱基互补配对，试分析原因_______________；PCR反应体系的成分中能够决定复制特定DNA片段的是_____________（填“模板”；“引物”或“taq酶”）；从引物设计的角度考虑，如果目的基因两侧没有酶切位点，用PCR技术_____________（“可以”或“不可以”）为目的基因设置酶切位点。

（2）构建基因表达载体的目的是___________（答出两点即可）。一个基因表达载体的组成；除了目的基因外，还必需有启动子和终止子，启动子的本质是_____________，其为_____________识别和结合的位点。

（3）图1表示质粒载体，图2表示插入了目的基因的重组质粒，被转化的大肠杆菌有两种，分别是含有质粒载体和含有插入目的基因的重组质粒，结合图示，这两种大肠杆菌可以用图中___________抗性基因进行筛选。24、长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈；近年来发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下面是科学家快速繁殖良种奶牛的两种方法，请据图回答：

(1)在试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到的两项技术是动物细胞培养和___________________，把早期胚胎送入受体母牛的最佳时期是__________________期。

(2)克隆牛G形成重构胚的过程采用的是细胞工程中的__________________技术。去核时常采用__________________的方法。

(3)若获得的克隆牛G与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是_________________。

(4)培育试管牛E时需对母牛B和母牛D进行_________________处理，其目的是_________________，以便将胚胎移至母牛D的子宫内。受体母牛必须和供体牛属于_________________。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_________________。25、为提高棉花的耐盐能力，研究者将径柳匙叶草液泡膜Na＋/K＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内；获得耐盐棉花。下图为TaNHX2基因以及可与其连接的四种引物。回答下列问题：

(1)在目的基因的获取以及连接中都会用到限制酶，该酶主要来源于原核细胞，而原核细胞中DNA是裸露的，推断限制酶不切割自身DNA的原因是__________；可以看做是原核生物的“免疫系统”。

(2)通过反转录的方法获得的TaNHX2基因若要正常表达，需要在基因上连接调控序列__________，采用PCR技术对目的基因进行扩增时，需选用的引物为__________（填图中字母），该过程必须有引物的原因是__________。引物不能循环利用的原因是__________；因此在具体操作中应在PCR反应体系中源源不断地加入两种引物。

(3)我国在转基因棉花的培育上独创的方法是__________，为检测棉花转基因是否成功，可采用个体水平的检测方法，即__________，完成转基因的棉花表现出耐盐特性的机理是__________，使棉花耐盐性增强。26、干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病；其血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体异性最强，影响最显著。科研人员为建立抗SSB抗体全自动定量检测的磁微粒化学发光试剂，利用基因工程技术获得重组SSB蛋白，流程如下，请分析回答：

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要____________酶。通过PCR技术扩增SSB基因的前提是要测定该基因两端部分核苷酸序列，目的是____________。

(2)为确保与PET41a质粒定向连接，获得的SSB基因两端要含有____________酶切位点。在PCR过程中，第____________轮循环产物中出现含所需限制酶的片段A。

(3)获得含SSB基因的重组质粒后，进行如下实验切割原质粒和重组质粒，获得片段大小如右表（1kb=1000碱基对）（注意：DNA片段大小与图中所画比例一致）。SSB基因的长度为____________。限制酶EcoRIBamHI和XhoI原质粒8.1kb2.7kb、5.4kb重组质粒3.4kb、5.0kb未做该处理

(4)③过程目的是将重组质粒转染到大肠杆菌内，并接种于添加____________的培养基上；收集菌落进行鉴定，将阳性菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，筛选得到重组SSB蛋白。

(5)为检测重组质粒表达情况及重组蛋白与抗体结合能力，科研人员通过注射含纯化的重组SSB蛋白的弗氏佐剂进行如下实验，请完成下表：。实验步骤实验操作分组取健康、生理状态相同的小鼠随机均分成两组。实验处理实验组注射含纯化的重组SSB蛋白的弗氏佐剂，对照组①____________，连续三次。饲养在相同且适宜环境中饲养。②___第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗体进行检测。结果分析与对照组相比，若抗体检测呈③____________，则表明重组SSB蛋白具有与相应抗体高度结合的能力。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

本题主要考查微生物的营养需求及培养基的组成及功能；培养基的组成成分包括碳源；氮源、水和无机盐，此外还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质及氧气的要求。

【详解】

A；是碳源的物质同时也可以是氮源；如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源，同时还提供维生素，A错误；

B；并非所有微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源：自养的微生物不需要碳源、固氮微生物不需要氮源；B错误；

C；牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的培养基；属于天然培养基，C错误；

D；液体培养基中不加任何凝固剂；这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，利于微生物扩增培养，D正确。

故选D。

【点睛】

不同的微生物，所需营养物质由较大差别，要针对微生物具体情况进行分析，本题需要考生比较分析，是对考生综合能力的考查。2、D【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A；为了获得更多的囊胚；可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；

B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的；故核基因相同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确；

故选D。3、C【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：

（2）在无氧条件下，反应式如下：

2.乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型；能发酵产生乳酸。

【详解】

A；酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型；乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型，A错误；

B、乳酸菌呼吸不能产生二氧化碳，因此CO2由酵母菌产生；B错误；

C；酵母菌在无氧条件下能发酵产生酒精；乳酸菌是厌氧菌，因此两种发酵过程都需要密闭条件，C正确；

D；两种菌间为竞争关系；D错误。

故选C。

【点睛】4、D【分析】【分析】

分析题图：图示为某DNA分子一个片段，其中a为磷酸二酯键，b为氢键；c为脱氧核苷酸内部的磷酸键。

【详解】

A；限制酶可以切断脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键；即a处，A正确；

B；DNA聚合酶可以连接脱氧核苷酸形成磷酸二酯键；即a处，B正确；

C、解旋酶可以使氢键断裂，即b处；C正确；

D；DNA连接酶可以连接DNA片段形成磷酸二酯键；即a处，D错误。

故选D。5、D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

【详解】

A；蛋白质工程通过基因修饰或基因合成；对现有蛋白质进行改造，A不符合题意；

BC；蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）；BC不符合题意；

D；由于有的氨基酸可能由多个密码子编码；因此根据氨基酸序列推测的脱氧核苷酸序列可能不唯一，D符合题意。

故选D。6、C【分析】【分析】

各种培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基等。培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基。液体培养基中加入琼脂可以制作固体培养基。

【详解】

A；从培养基成分看；配方中含有凝固剂琼脂，故依物理性质划分，应属于固体培养基，A正确；

B；由培养基的原料可知；葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，加入的青霉素能抑制细菌的生长，酵母菌是异氧型微生物，都可利用葡萄糖作为碳源，都属于真核生物，因此该培养基培养的微生物可以是酵母菌，B正确；

C；本培养基中抗生素的添加是为了筛选能够抗该抗生素的微生物；C错误；

D、若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一氮源，因抗生素有杀菌作用，故应除去抗生素和NaNO3；并应加入尿素，D正确。

故选C。二、多选题(共6题，共12分)7、B:C:D【分析】【分析】

转基因动物生产药物：

(1)基因来源：药用蛋白基因+乳腺组织特异性表达的启动子(原理：基因的选择性表达)。

(2)成果：乳腺生物反应器。

(3)过程：将药物蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；导入哺乳动物的受精卵中，最终培育的转基因动物进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁生产所需要的药物。(只有在产下雌性动物个体中，转入的基因才能表达)。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因此可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵，A正确；

B；在该转基因羊中；人凝血因子存在于所有细胞中，但只在乳腺细胞中表达，B错误；

C；人凝血因子基因开始转录后；RNA聚合酶以DNA分子一条链为模板合成mRNA，C错误；

D；科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；从而使人凝血因子基因只在乳腺细胞中特异表达，D错误。

故选BCD。8、A:C【分析】【分析】

果酒；果醋制作的注意事项。

(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄；榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的，且不要太干净，以防洗去野生型酵母菌。

(2)防止发酵液被污染的方法①榨汁机要清洗干净并晾干。②发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒；或用洗洁精洗涤。③装入葡萄汁后要封闭充气口。

【详解】

A；果酒发酵的菌种是酵母菌；其代谢类型为异养兼性厌氧型，而果醋发酵的菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，A符合题意；

B；制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒；均可用体积分数为70%的酒精进行消毒，B不符合题意；

C；在变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的；液体表面不能形成菌落，C符合题意；

D；果酒和果醋的制作可用同一装置；但需控制不同发酵条件，果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18～25℃，而果醋制作需要有氧环境，适宜温度为30～35℃，D不符合题意。

故选AC。9、A:C:D【分析】【分析】

完全培养基中含有微生物生长所需要的各种营养成分；基本培养基缺少某种营养成分，通过影印培养法，二者接种的菌种相同，基本培养基上不能生长的菌株即为营养缺陷型菌株。

【详解】

A；过程①得到的菌落均匀分布；接种方法为稀释涂布平板法，过程②两种培养基的成分不同，基本培养基中缺乏某种氨基酸，A错误；

B；进行过程②培养时先将丝绒布转印至完全培养基上；可能会携带某种氨基酸进入基本培养基，因此顺序不能颠倒，B正确；

C；统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次；直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致菌落数目偏小，C错误；

D；若该菌株为原核细胞；则不存在核孔复合体，营养缺陷型菌株细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，应是控制该酶合成的基因发生突变，D错误。

故选ACD。

【点睛】10、C:D【分析】【分析】

据图分析；图示基因编辑猪培育过程涉及的技术手段有转基因技术；核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等，利用转基因技术将病毒外壳蛋白基因（目的基因）导入2号猪的体细胞核中，然后将2号猪的体细胞核移植到1号猪的去核卵母细胞中，再将重组细胞培养到囊胚并移植到3号猪的子宫中去，最后分娩产生了4号转基因克隆猪。

【详解】

A；对供体母猪使用促性腺激素处理；使其超数排卵，A正确；

B；获得的卵母细胞去核后；需要培养到减数第二次分裂中期才能进行核移植，B正确；

C；染色体位于细胞核；则产出的基因编辑猪的性染色体来自于2号猪，C错误；

D；为检测病毒外壳蛋白基因是否正常表达；可采用的方法是抗原-抗体杂交，D错误。

故选CD。11、A:C:D【分析】【分析】

试管动物是通过体外受精；早期胚胎培养和胚胎移植等技术；最终在受体的子宫中发育而来的动物，属于有性生殖过程。

【详解】

A；采集来的精子必须获能之后才具备与卵子完成受精的能力；卵子只有发育到MⅡ中期才具备与精子受精的能力，A错误；

B；精子入卵后；卵细胞膜会发生卵细胞膜反应，阻止其它精子的进入，这是防止多精入卵受精的其中一个重要屏障，B正确；

C；供体胚胎与受体子宫建立的仅是生理和组织上的联系；其遗传物质在孕育过程中不会发生任何变化，因此胚胎移植产生的后代，其遗传特性不受到受体的影响，后代的遗传特性与供体保持一致，C错误；

D；受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应；所以不必进行免疫检查，D错误。

故选ACD。12、A:C:D【分析】【分析】

1；动物细胞培养过程：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养。

2；胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干细胞培养等技术。

【详解】

A；干扰素是人体的蛋白质；故从酵母菌细胞中提取到人的干扰素，说明目的基因已经完成了在受体细胞中的表达，A正确；

B；在植物细胞和组织培养中；花药可以进行离体培养成单倍体植株，B错误；

C；使用酶解法可以获得单个细胞；故在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞，C正确；

D；对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能，D正确。

故选ACD。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)13、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30014、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术性别控制17、略

【分析】【详解】

中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，该表述错误。【解析】错误18、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的检测和鉴定四、实验题(共3题，共30分)20、略

【分析】【分析】

I：核酸是生物有机体中的重要成分；在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起，以核蛋白的形式存在。核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类，在真核细胞中，前者主要存在于细胞核中，后者主要存在于细胞质及核仁里。在制备核酸时，通过研磨破坏细胞壁和细胞膜，使核蛋白被释放出来。提取DNA有有多种方法，“CTAB法”和“SDS法”是提取DNA的常用方法，二者既有区别又有联系。

II：题图分析：A表示利用生殖细胞得到单倍体植株；B表示通过胚状体进行无性繁殖；其中①为脱分化；再分化；C为植物组织培养；D表示植物体细胞杂交，其中②是诱导原生质体融合。

【详解】

I：（1）液氮温度低，液氮中研磨会研磨得更充分，在液氮中研磨DNA酶活性低，降低DNA的分解；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+；抑制DNA酶的活性，减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量。

（2）氯仿-异戊醇密度均大于水且不溶于水；DNA不溶于氯仿-异戊醇，离心后，氯仿-异戊醇位于试管的底部，DNA溶于上清液中，所以离心后应该取上清液；含DNA的上清液中加异丙醇离心后取的是沉淀物，说明DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇。

（3）从表中数据可知；CTAB法提取的DNA的OD260是0.033，而SDS法提取的DNA的OD260是0.006，0.033＞0.006，所以CTAB法提取的DNA较多，根据CTAB和SDS两种试剂作用的区别，可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，从而可提取出更多的DNA。

II：（1）植物组织培养过程中；整个过程应严格无菌无毒，利用图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。

（2）为促进愈伤组织再分化；在配制分化培养基时需降低2，4-D的浓度。当玉米愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加适量的生长素，以促进苗形成。

（3）①芽是植物体中具有分生能力的组织；细胞排列紧密，①错误；

②刚融合的植物体细胞没有成熟的大液泡；无法构成渗透系统，不能发生质壁分离现象，②错误；

③胚状体细胞出现具有分生能力的绿色芽；因此其细胞内有叶绿体，③正确；

④分化的愈伤组织的结果形成了具有根和芽的胚状体；细胞的形态发生了变化，④错误。

故选③。

【点睛】

本题主要考查DNA提取原理、操作过程及实验结果的分析以及植物组织培养技术，意在考查学生读图能力和分析应用能力。【解析】研磨充分，低温抑制酶活性抑制DNA酶的活性，减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量上清液DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，从而能提取出更多的DNA（体积分数为70-75%）酒精降低（适量的）生长素③21、略

【分析】【分析】

腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。

1；让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内；将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度。约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。

2；加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中；同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐研制的时间约为8d左右．加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

3；加卤汤装瓶：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等；含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。可据个人口味配置卤汤。

4；密封腌制。

【详解】

（1）前发酵过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶促进豆腐中的蛋白质水解产生GABA，使得毛坯的GABA含量明显升高。

（2）步骤②中；加盐腌制的正确操作是将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。此过程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是：①食盐会抑制毛霉生长，酶的活性降低；②豆腐中的水分渗出，部分GABA会溶解于水而导致测定值减小。

（3）卤汤是由料酒及各种香辛料配制而成的；可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。后发酵过程中GABA的含量变化曲线图显示，在60天以后，GABA的含量达到最大值且保持相对稳定，所以此时出厂销售白方腐乳比较适宜。

【点睛】

解答本题的关键是掌握腐乳的制作的相关流程和知识要点，主要依靠学生对课本知识的理解和掌握，并结合题目中所给的GABA为水溶性氨基酸这一关键信息回答问题，同时需要学生在做题时思考符合经济效益的选择。【解析】蛋白酶逐层加盐随着层数的加高增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些随水流失（溶解于水中）香辛料和料酒6022、略

【分析】【分析】

树突状细胞为抗原呈递细胞；可识别；摄取和传递抗原信息。

【详解】

（1）细菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量较高的特异蛋白；而OMV能穿越肠道上皮屏障活化肠黏膜内丰富的免疫细胞。所以，ClyA基因的作用为表达出细菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，进而融合基因可以被免疫细胞识别。Fc表达产物能够与树突状细胞表面的特异性受体结合，进而提高树突状细胞识别；摄取和传递抗原信息的能力。

（2）①根据表格和柱状图可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐渐增加部件，且第4组和第5组工程菌都是完整的，即第4组:ClyA-OVA-Fc第5组:ClyA-OVA-Fc，但是第4组饮用含阿拉伯糖的水，进而激活融合基因的表达；第5组不饮用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表达。所以，第3；5组含有OVA，在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高；1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低。

②小鼠脾脏细胞具有免疫细胞；可在抗原刺激下引起特异性免疫。带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物可引起小鼠脾脏细胞发生特异性免疫，故先加入第1-5组小鼠脾脏细胞和带有红色荧光标记的OVA抗原肽复合物进行保温，判断特异性免疫的强度；

故选AC。

再加入带有绿色荧光标记的细胞毒性T细胞特异性抗体；目的是检测OVA抗原肽复合物是否能够产生特异性细胞毒性T细胞。

故选B。

若第5组同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比越多；说明工程菌在人为可控条件下引发特异性免疫反应，结论成立。

③肿瘤患者术后极易复发；说明特异性免疫功能减弱。所以，可多次注射黑色素瘤细胞，进而研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

（3）本实验中融合基因里面有OVA（黑色素瘤细胞特异性抗原），所以只需将OVA替换为肺癌细胞特异性抗原即可。即将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因。【解析】(1)表达ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面识别；摄取。

(2)第4组:ClyA-OVA-Fc和-第5组:ClyA-OVA-Fc和+第3；5组含有OVA；在人为控制口服阿拉伯糖后产生OMV，激活特异性免疫，对肿瘤细胞的杀伤率较高;1、2组缺乏OVA，第4组无阿拉伯糖诱导，杀伤率均低ACB同时被红色和绿色荧光标记的细胞数目占比研究该口服工程菌是否能够诱发长期免疫记忆，从而抑制肿瘤复发。

(3)将元件中的OVA替换为肺癌细胞特异性表达的抗原基因五、综合题(共4题，共28分)23、略

【分析】【分析】

PCR技术：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。（2）原理：DNA复制。

（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

（4）条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）

（5）过程：高温变性：DNA解旋过程；低温复性：引物结合到互补链DNA上；中温延伸：合成子链。

【详解】

（1）设计的与目的基因两端序列互补配对的两种引物；它们之间不能存在互补配对序列，其原因是：两种引物之间需要满足不能碱基互补配对是防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率。PCR反应体系的成分中能够决定复制特定DNA片段的是引物。从引物设计的角度考虑，如果目的基因两侧没有酶切位点，用PCR技术可以为目的基因设置酶切位点。

（2）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在；可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。启动子的本质是DNA片段，其为RNA聚合酶识别和结合的位点。

（3）从图中看；目的基因的插入破坏了四环素抗性基因，因此可以用四环素抗性基因筛选这两种大肠杆菌，不能在含四环素培养基上存活的即是重组质粒。

【点睛】

熟记并理解基因工程的基本操作程序等相关的基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上，从题意中提取有效信息并围绕获取目的基因的方法，特别是利用PCR技术扩增目的基因的过程等知识，进行相关问题的解答。【解析】两种引物之间需要满足不能碱基互补配对是防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率引物可以使目的基因在受体细胞中稳定存在，可以遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用DNA片段RNA聚合酶四环素24、略

【分析】【分析】

分析题图：图示为快速繁殖良种奶牛的两种方法；其中试管牛E的培育采用了体外受体；早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于有性生殖；克隆牛G的培育采用了核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，属于无性生殖。

【详解】

（1）图示为快速繁殖良种奶牛的两种方法；试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到动物细胞培养和胚胎移植技术。早期胚胎一般发育到桑葚胚或囊胚时期时进行胚胎移植，故把早期胚胎送入受体母牛的最佳时期是桑葚胚或囊胚期。

（2）克隆牛G形成重构胚是将良种母牛C的细胞核转移至良种母牛B的细胞质中；采用的是动物体细胞核移植，目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。

（3）通过核移植技术得到的克隆牛G；其卵母细胞细胞质中的遗传物质(线粒体DNA)会对克隆动物的性状产生影响，因此获得的克隆牛G与供体动物性状不完全相同。

（4）培育试管牛E时需对母牛B和母牛D注射激素，目的是使母牛B和母牛D同期发情，以便二者的生殖器官的生理变化同步，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境，以便将胚胎移至母牛D的子宫内。受体母牛必须和供体牛属于同一物种，受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。【解析】(1)胚胎移植桑葚胚或囊胚。

(2)动物体细胞核移植显微操作。

(3)卵母细胞细胞质中的遗传物质(线粒体DNA)会对克隆动物的性状产生影响或克隆动物的细胞质中的遗传物质(线粒体DNA)同时来自供体细胞和受体卵母细胞。

(4)同期发情使母牛B和母牛D生殖器官的生理变化同步，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境同一物种受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应25、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术常用到的工具有限制酶（剪刀）；DNA连接酶（针线），运载体（常用质粒）；

2；PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；PCR的原理是DNA复制，需要的条件包括：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；PCR扩增DNA的过程包括：高温变性、低温复性、中温延伸3个过程。

【详解】

（1）在目的基因的获取以及连接中都会用到限制酶；限制酶能识别特定的核苷酸序列并在特定位点将其切割开来。该酶主要来源于原核细胞，而原核细胞中DNA是裸露的，但限制酶并不切割自身的DNA，可能是由于原核细胞DNA上没有限制酶识别的序列，或者存在序列但是发生了分子修饰，导致限制酶不能识别该序列。

（2）以TaNHX2基因转录形成的mRNA为模板；在反转录酶的作用下获得的TaNHX2基因没有启动子和终止子，故要想使该基因正常表达，需要在基因上连接调控序列启动子（RNA聚合酶识别并结合的位点）和终止子（转录终止的位点）；DNA聚合酶只能从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，由图示可知，采用PCR技术对目的基因进行扩增时，需选用引物A和D；每完成一次扩增后，合