T-GZAS 026-2024 猕猴桃花粉质量要求

ICS67.080CCSB31GZASQualityrequirementsofkiwipollenIT/GZAS026—2024 II 32规范性引用文件 33术语和定义 34花粉制备 34.1雄树选择 34.2采集方法 34.3花药脱离 34.4花药除杂 34.5花药干燥 44.6花粉提取 44.7花粉灭菌 45质量要求 46质量检测 46.1净度测定 46.2萌发率测定 46.3花粉含水量测定 56.4花粉溃疡病检测 57包装、标签、贮存及运输 7.1包装 57.2标签 57.3贮存 57.4运输 58花粉抽样及检验规则 8.1样品抽取 58.2抽样数量 68.3检验规则 6T/GZAS026—2024本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由修文县猕猴桃协会提出。本文件由贵州省标准化协会归口。本文件起草单位：贵州省标准化协会、修文县农业农村局、修文县猕猴桃协会、修文县市场监督管理局、修文县国投集团、贵州圣地有机农业有限公司。本文件主要起草人：吴素芳、李鹏、黄亚欣、李秋萍、王国立、黎晓茜、路阳春、谭永元、邹晓娅、陈良豪、汪雪俊、陈莹、邓勇、黄林、董启斌。3T/GZASX026-2024猕猴桃花粉质量要求本文件规定了猕猴桃花粉的术语和定义、花粉制备、质量要求、质量检测、包装、标签、贮存及运输及花粉抽样及检验规则。本文件适用于修文县区域内生产或销售的猕猴桃花粉。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T0800.1进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法DB6111/T149猕猴桃花粉溃疡病菌活菌检测技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1猕猴桃花粉kiwifruitpollen猕猴桃雄株花朵的花药经过加工工艺生产的单倍体雄性细胞粉状物质。3.2花粉净度pollenpurity净花粉含量占被检测花粉的百分数。3.3花粉萌发率pollengerminationrate花粉具有存活、萌发和受精的能力，通常用萌发率评价花粉生活力。4花粉制备4.1雄株选择宜优先选择无溃疡病和花腐病以及其他重大病虫害发生、长势健壮的猕猴桃雄株。4.2采集方法采花宜在晴天6:00-8:00和17:00-19:00进行。单朵猕猴桃雄花露白60%～80%时，手工采摘整朵大蕾期雄花（铃铛花）。花蕾采集时选用无异味干净透气的非金属容器装载。4.3花药脱离采摘的花蕾应放置在阴凉处，脱药时间宜≤3.0h。脱药可采用以下方法：a）人工脱药：在室内将花蕾倒入细筛中，用手轻轻揉搓，取出花药或用手剥开花苞，利用镊子或剪刀将花丝与花药分离，可将取出的花药置于干燥的双层报纸上；b）机械脱药：采用花药分离机，筛孔0.3cm～0.5cm、转速180转/s～200转/s，将花蕾倒入花药分离机进行脱药。4.4花药除杂4T/GZASX026-2024脱药后应去除花丝、花瓣等杂质。4.5花药干燥花药应及时进行干燥处理，以下三种方法，均应将花粉摊铺厚度保持在0.5cm以下。a）室内阴干干燥法：花药平铺在光洁的纸盒内，室内温度20℃~25℃,相对湿度60%～80%，自然晾干60h～72h；b）电热毯干燥法：花药平铺在光洁的纸盒内，放于电热毯上保温干燥，温度25℃~28℃干燥15h~24h；c）恒温箱干燥法：花药平铺在烘干托盘中，温度25℃~28℃烘干10h～12h。4.6花粉提取花药干燥后，用100目～120目筛子筛出花粉或通过花粉提取机收集花粉。花粉不宜与铁器等金属器皿接触。4.7花粉灭菌提取花粉后，将花粉置于流通臭氧的透明塑料盒中，设定臭氧浓度为642.85mg.m-3，灭菌时间1.0h。5质量要求花粉产品粉末状，外观呈淡黄色，色泽均匀一致，无可见杂质，花粉含水量8.0%～10%，贮藏后花粉净度≥85%，花粉萌发率≥50%。按花粉净度、萌发率进行花粉等级划分如下表1所示：表1花粉等级指标等级净度（%）萌发率溃疡病菌一级≥95%≥70%无溃疡病菌或经灭菌处理后基本无溃疡病活菌二级≥85%95%≥50%70%6质量检测6.1净度测定用接种针取少量花粉于载玻片上，盖上盖玻片。在10×10显微镜下观察花粉样品，至少观察9个视野，分别记录每个视野的花粉和非花粉物质比例。按公式（2）计算花粉净度。式中：C——花粉净度，单位为百分数（%Ai——视野中的花粉数量，单位为个；Bi——视野中非花粉总数，单位为个；n——视野数量，≥9。6.2萌发率测定6.2.1培养基制备培养基按琼脂0.4g、蔗糖10g、硼酸0.01g，100ml蒸馏水配置，先将称好的蔗糖、琼脂和少量蒸馏水倒入烧杯中，加热搅拌完全溶解，然后加入硼酸溶解，加水至100ml，备用。6.2.2制片将已加热溶解培养基，滴管吸取2.0ml～3.0ml均匀涂于载玻片，制作至少3个载玻片。6.2.3花粉培养5T/GZASX026-2024用小刷子或毛笔刷取花粉，轻弹刷头，使花粉均匀落在载玻片上，放在垫有润湿滤纸或纸巾的培养皿中，置于恒温培养箱内，温度25℃~28℃,培养时间4.0h～6.0h。6.2.4测定步骤用10×20显微镜观察计数，至少6个以上视野计数，每个视野中花粉总量≥80粒，记录花粉萌发数量和花粉总数，取平均值代表花粉萌发率。以花粉管长度达到花粉粒径的1倍以上视为萌发。按公式（1）计算花粉萌发率。式中：E——花粉萌发率，单位为百分数（%）；Ni——单个视野内萌发花粉数量，单位为个；si——单个视野花粉总数，单位为个；n——视野数量，≥6。6.3花粉含水量测定取≥5.0g花粉，放入90℃~105℃烘箱中烘至恒重后称重，按公式（3）计算花粉含水量。式中：R——花粉含水量，单位为百分数（%G1——烘前花粉重量，单位为克（g）；G2——烘至恒重时花粉重量，单位为克（g）。6.4花粉溃疡病检测按照DB6111/T149的检测方法执行。7包装、标签、贮存及运输7.1包装花粉质量检测完成后应在4h内进行包装，包装材料使用牛皮纸袋或塑料瓶，产品包装规格为大包装100g～1000g为一瓶/一袋，小包装5.0g～50g为一瓶/一袋。7.2标签标签内容应包括生产厂名称、厂址、产地、名称、执行标准编号、净度、商标、生产日期、批号、净重、贮存期限、贮存条件等。7.3贮存花粉包装后，立即进行贮藏。贮藏花粉环境应清洁、避光，不得与有腐蚀性和有污染性的物品混贮，贮藏温度不得高于-18℃,贮藏不超过2年。7.4运输运输过程要保持低温干燥，以泡沫箱或其他绝热材料作为外包装，外包装内用冰块或干冰袋降温，包装袋外界温度应＜5.0℃,运输工具应清洁干燥，运输过程中无雨淋、受潮、暴晒，不与有腐蚀性和有污染性的物品混运，运输时间≤5.0d。8花粉抽样及检验规则8.1样品抽取6T/GZASX026-2024按照SN/T0800.1的方法执行。8.2抽样数量10瓶（件）以下，逐瓶抽取，10瓶（件）～100瓶（件），随机选10瓶抽取样品；100瓶以上，按照一批花粉总瓶（件）数的平方根数抽取，见公式（4）。每瓶（件）抽取2g花粉。式中：N——一批花粉总瓶（件）数。n——应抽取瓶（件）数（取整数，小数部分向上约）。8.3检验规则8.3.1检验人员应了解花粉的基本知识，包括花粉的形态、结构、发育规律和萌发状态等生物学特征，熟悉理化基础实验操作，能够熟练操作PCR仪、凝胶成像仪等仪器，并能对结果数据进行合理性分析。8.3.2检验记录与资料保存检验记录应包括样品来源、种类（品种）、抽样时间、检测时间、地点和结果等，并要有检测人员、审核人员签字。检验记录和质量检测的萌发率观察照片等材料应归档并妥善保存2年以上。T/GZASX026-2024参考文献[1]SN/T0800.1-2016进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法[2]DB61/T888-2014猕猴桃花粉[