BJS201916食品中大黄酚和橙黄决明素的测定

1和橙黄决明素的测定BJS61范围本方法规定了食品(含保健食品)中大黄酚和橙黄决明素的高效液相色谱测定方法。2原理3试剂和材料试剂3.1.1甲醇(CH3OH)：色谱纯。3.1.2乙腈(C2H3N)：色谱纯。3.1.3磷酸(H3PO4)。3.1.4二氯甲烷(CH2CL2)。3.1.5盐酸(HCL)。3.1.6无水乙醇(CH3CH2OH)。23.1.7乙酸乙酯(C4H8O2)。3.1.8甲酸(CH2O2)。剂配制3.2.1磷酸水溶液(0.1%)：取磷酸(3.1.3)1.0mL，加水定容至1000mL。3.2.2稀盐酸：取盐酸(3.1.5)234mL，用水溶解并定容至1000mL。mL乙酯250mL，混匀。3.2.4甲酸水溶液(0.1%)：取甲酸(3.1.8)1.0mL，加水稀释并定容至1000mL。品纯度≥98%，大黄酚的纯度≥99%。配制3.4.1标准储备液(100μg/mL)：分别称取大黄酚、橙黄决明素(3.3)各0.0100g(精确至mLL3.4.2混合标准中间液(20μg/mL)：分别准确吸取大黄酚、橙黄决明素标准储备液(100μg/mL)(3.4.1)各5mL，置同一25mL棕色量瓶中，用无水乙醇-乙酸乙酯(2+1)混合溶液(3.2.3)稀释至刻度，摇匀。0~4℃冷藏保存，有效期1个月。分别准确吸取不同体积的混合标准中间液，用无水乙醇-乙酸乙酯 (2+1)混合溶液(3.2.3)稀释成一系列标准工作液，该标准系列中大黄酚和橙黄决明素浓L4仪器和设备35分析步骤制备或半固态试样适量半固态试样(软胶囊内容物)混匀，称取0.5g~1g(精确至0.001g)，置平底烧瓶中，量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25mL于平底烧瓶中，蒸干(或氮吹至干)，加入稀盐酸 水乙醇-乙酸乙酯(2:1)混合溶液(3.2.3)溶解，转移至25mL容量瓶中，定容至刻度，溶样L4残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2:1)混合溶液(3.2.3)溶解，转移至25mL容量瓶中，定容至件5.2.1色谱柱：BDSHYPERSILC18(4.6mm×250mm,5μm)或性能相当者。：10μL。梯度时间(min)0制作将标准系列工作液(3.4.3)按液相色谱参考条件(5.2)进行测定，测定相应的色谱峰测定5将试样溶液(5.1)按液相色谱参考条件(5.2)进行测定，得到相应样品溶液的色谱峰6结果计算固态或半固态试样中大黄酚和橙黄决明素含量按式(1)计算：X=XVV0m1000X—试样中大黄酚或橙黄决明素的含量，单位为毫克每千克(mg/kg)；C—试样中所测的大黄酚或橙黄决明素的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；V—试样最终定容体积，单位为毫升(mL)；V1—最初加入甲醇的体积，单位为毫升(mL)；V0—试样加酸水解前取滤液体积，单位为毫升(mL)；m—试样称取的质量，单位为克(g)；液态试样中大黄酚和橙黄决明素含量按式(2)计算：X=CV1000……………………(2)0V10000X—试样中大黄酚或橙黄决明素的含量，单位为毫克每升(mg/L)；C—试样中所测的大黄酚或橙黄决明素的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)；V—试样最终定容体积，单位为毫升(mL)；V0—试样吸取体积，单位为毫升(mL)；6精密度7息SCAShanol-74-33urantioobtusin-3811决明素标准溶液色谱图mAU252050-50.05.010.015.020.025.030.035.0min酚9验b)流动相：A相为0.1%甲酸水溶液(3.2.4)；B相为乙腈(3.1.2)；A+B=40+60。C条件f)离子源：电喷雾离子源(ESI)。序号化合物名称(min) 0.5012.9297.8*.877C定