甘肃省武威第八中学2025年高三第一次调研测试生物试卷含解析

甘肃省武威第八中学2025年高三第一次调研测试生物试卷注意事项：1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信息条形码粘贴区。2．选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0．5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。3．请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。4．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．如图表示基因型为AaBb的某雌性高等动物的细胞分裂模式图。下列关于该细胞的叙述，正确的是（）A．名称为次级卵母细胞B．含有两对同源染色体|C．一定发生过基因突变D．染色体数和体细胞相同2．脱落酸（ABA）与赤霉素（GA）对种子的休眠、萌发具有重要调控作用。环境因素会使种子内脱落酸和赤霉素的含量发生改变，当种子内赤霉素与脱落酸含量的比率增大到一定数值时，种子会由休眠状态进入到萌发状态，反之，种子则处于休眠状态。下列叙述错误的是（）A．脱落酸和赤霉素对种子休眠的调控具有拮抗作用B．种子内脱落酸的合成和降解过程受环境因素的诱导C．赤霉素通过调控种子细胞内基因的表达而促进种子的萌发D．萌发的种子对脱落酸的敏感性增强，对赤霉素的敏感性降低3．南瓜果实形状有扁盘形、长圆形和长形三种类型，由位于非同源染色体上的两对等位基因（分别用A、a和B、b表示）控制，将两种不同基因型的长圆形亲本杂交，F1全为扁盘形，F1自交后代为扁盘形：长圆形：长形=7：4：1的表现型比例。下列相关叙述正确的是（）A．每对基因的传递都不符合基因的分离定律B．雌配子或雄配子中的aB和Ab类型均不能参与受精C．如长圆形亲本进行反交，F1仍均为扁盘形D．F2中A和b的基因频率相等，a和B的基因频率相等4．正常情况下，健康人体受到寒冷刺激时，血液内（）A．促甲状腺激素含量增多，甲状腺激素含量增多B．促甲状腺激素含量增多，甲状腺激素含量减少C．促甲状腺激素含量减少，甲状腺激素含量增多D．促甲状腺激素含量减少，甲状腺激素含量减少5．某动物种群中，AA、Aa和aa基因型的个体依次占25%、50%和25%。若该种群中的aa个体没有繁殖能力，其他个体间可以随机交配，理论上，下一代中AA∶Aa∶aa基因型个体的数量比为()A．3∶3∶1 B．1∶2∶1 C．1∶2∶0 D．4∶4∶16．我国科学家合成了4条酿酒酵母染色体，合成的染色体删除了研究者认为无用的DNA，加入了人工接头，总体长度比天然染色体缩减8％，为染色体疾病、癌症和衰老等提供研究与治疗模型，下列说法错误的是（）A．合成人工染色体需要氨基酸和脱氧核苷酸作为原料B．染色体上的DNA某处发生了个别碱基对增添属于基因突变C．若某基因缺失了单个碱基对，则该基因编码的肽链长度不一定会变短D．酿酒酵母可发生基因突变、基因重组和染色体畸变二、综合题：本大题共4小题7．（9分）“中国柑橘之乡”常德石门县由于独特的土壤气候环境，具有得天独厚的优质果品生产的资源优势，被国际果业界认定为“蜜橘绝佳产地”。但由于缺乏农产品的深加工企业，近几年柑橘滞销现象严重。（1）当地政府想引入一个大型的果酒加工厂。分离纯化上述菌种所用的培养基属于_________（填液体或固体）培养基。对于频繁使用的菌种，可以将菌种接种到试管的____________培养基上临时保藏。（2）橘皮可用作提取胡萝卜素和橘皮精油的原料。提取胡萝卜素常采用________法，需安装冷凝回流装置，其目的是______________________；提取橘皮精油时，为避免___________时有效成分水解和使用_________（填水中蒸馏或水上蒸馏或水气蒸馏）法产生原料焦糊的问题，常采用___________法。（3）为了保持某橘子品种的品质，可用组织培养技术繁殖试管苗。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_________（填高或低）时，有利于芽的分化。8．（10分）新型冠状病毒引起肺炎疫情以来，我国政府与世卫组织通力合作，全力防控，疫情目前已得到初步遏制。请回答下列问题：（1）新冠病毒必须在______内增殖，当侵染人呼吸道上皮细胞时，会经过_____、穿入、脱壳、生物合成和成熟释放等几个阶段。新型冠状病毒囊膜上有3种蛋白质“M”、“E”和“S”，通过膜融合进入细胞，体现的原理是______。其单链基因组RNA可直接作为模板，利用宿主细胞的______（细胞器）合成病毒的_____酶，再利用该酶完成病毒遗传物质的复制。（2）新冠病毒的抗原刺激人体免疫系统，使B细胞增殖分化为______细胞，后者能产生特异性抗体，对抗肺部细胞。（3）若疫苗是根据病毒表面的M、E和S等糖蛋白研制，预计一段时间后还要继续接种新疫苗。这种进行多次预防接种的免疫学原理是______。9．（10分）番茄红素具有一定的药用价值，但普通番茄合成的番茄红素易发生转化（如图甲），科学家设计了一种重组DNA（质粒三），该DNA能表达出双链RNA（发卡），番茄细胞能识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及具有相同序列的单链RNA一起降解，从而提高果实中番茄红素的含量（如图乙）。请分析回答下列问题：（1）在体外快速大量获得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用___________技术，该技术的原理是________________________。

（2）根据图甲推知，转录出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的________________基因，上述过程通过阻止该基因在细胞内的_______________（填“转录”或“翻译”），提高了果实中番茄红素的含量。（3）为保证图中的片段A反向连接，处理已开环质粒所用的两种限制酶是______________________。（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团。对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其_____________，该DNA分子仍可以和目的基因连接，形成缺少___________个磷酸二酯键的重组质粒，随后在细胞中被修复。（5）可利用___________________法将质粒三导入植物细胞。10．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。11．（15分）下图为菠菜叶肉细胞进行光合作用的示意图，A、B、C代表反应的场所，①~⑤表示相关物质。据图回答：（1）B和C表示________；图中的②接受水光解产生的________还原剂NADPH；C过程要形成1分子葡萄糖至少需要________分子的④参与卡尔文循环。（2）为了研究光强度对菠菜光合速率的影响，制备了多份等量的菠菜叶图片，叶图片经抽气后分别置于适宜浓度的NaHCO3溶液中，改变光强度，通过观察________即可比较叶片光合速率的大小。（3）为了进行光合色素的提取和分离，可取适量烘干的菠菜叶片，剪碎后放到研体中，并加入适量的药剂进行充分研磨，其中的________可防止叶绿素被破坏，研磨后的液体经过滤得到色素提取液。在纸层析时，滤液细线要高于________，分离后，从下往上第二条色素带的颜色为________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【解析】

由题意可知，该细胞为动物细胞，细胞内无同源染色体，着丝粒分裂，染色体在纺锤丝的牵引下移向细胞两级，说明该细胞处于减数第二次分裂后期，由细胞质均分，可推知该细胞为极体。【详解】A、由分析可知，该细胞为（第一）极体，A、错误；B、该细胞内无同源染色体，B错误；C、该细胞中染色体①和②为姐妹染色单体分离后形成的，A与a不同的原因是基因突变或四分体时期同源染色体的非姐妹染色单体之间发生交叉互换，C错误；D、该细胞中染色体数目与体细胞中的染色体数目相同，D正确。故选D。2、D【解析】

分析题干可知，脱落酸（ABA）与赤霉素（GA）对种子的休眠、萌发具有重要调控作用，当种子内赤霉素与脱落酸含量的比率增大到一定数值时，种子会由休眠状态进入到萌发状态，反之，种子则处于休眠状态。【详解】A、脱落酸促进种子休眠，赤霉素抑制种子休眠，二者在对种子休眠的调控过程中具有拮抗作用，A正确；B、根据题干信息可知，种子内脱落酸的合成和降解过程受环境因素的诱导，B正确；C、环境因素如光照、温度等会引起植物激素合成和降解的变化，进而对基因组的表达进行调节。赤霉素正是通过调控种子细胞内基因的表达而促进种子的萌发，C正确；D、“当种子内赤霉素与脱落酸含量的比率增大到一定数值时，种子会由休眠状态转变为萌发状态，反之，种子则处于休眠状态”，这说明萌发的种子对赤霉素的敏感性增强，对脱落酸的敏感性降低，D错误。故选D。【点睛】本题考查脱落酸和赤霉素对种子萌发和体眠的调控作用，解题关键是提取题干信息，结合赤霉素和脱落酸的作用，分析赤霉素与脱落酸含量的比率对种子萌发的影响。3、D【解析】

题干中描述果实形状这一性状是由“位于非同源染色体上的两对等位基因来控制的”，因此可以确定控制该性状的两对基因遵循自由组合定律。两个长圆形的亲本杂交，后代全部为扁盘形，因此可以确定双显性为扁盘形，且F1为双杂合子，能由自由组合定律的相关知识分析显隐性是本题的突破点。【详解】A、控制每对性状的基因在传递时是符合基因分离定律的，A错误；B、长圆形的个体杂交，F1均为扁盘形，可判断出F1扁盘形南瓜的基因型为AaBb。F1自交，扁盘形：长圆形：长形=7：4：1，与正常的9：6：1的比例相比，扁盘形、长圆形中均缺少2/16的个体，出现这种结果的原因最可能是雄性或雌性一方产生的aB或Ab配子不可育，B错误；C、假设题干所述长圆形亲本杂交时AAbb为父本，aaBB为母本，此杂交下，F1为扁盘形，亲本产生的Ab雄配子和aB雌配子是可育的，而B项已判断出雄性或雌性一方产生的aB或Ab基因型的配子不育，所以，如进行反交，则或父方或母方产生的配子是不育的，因此不产生子代，C错误；D、假设aB的雄配子不育，F1产生的可育雄配子有3种，即AB、Ab和ab，雌配子有4种，即AB、Ab、aB和ab，受精后产生的子代中AA：Aa：aa=2：3：1，BB：Bb：bb=1：3：2，可求得其A和b的基因频率均为7/1，同理，假设Ab雄配子不育，则A和b的基因频率均为5/1．假设其中一种雌配子不育时效果相同，D正确；故选D。4、A【解析】

甲状腺激素调节过程：下丘脑分泌促甲状腺激素释放激素，促使垂体分泌促甲状腺激素。促甲状腺激素随血液运输到甲状腺，促使甲状腺增加甲状腺激素的合成和分泌。血液中甲状腺激素含量增加到一定程度时，又反过来抑制下丘脑和垂体分泌相关激素，进而使甲状腺激素分泌减少。【详解】正常情况下，健康人体受到寒冷刺激时，下丘脑分泌TRH促进垂体分泌促甲状腺激素（TSH），TSH促进甲状腺分泌甲状腺激素，甲状腺激素含量增多，综上可知，促甲状腺激素和甲状腺激素含量都增多，A正确。故选A。5、D【解析】

AA、Aa和aa基因型的个体依次占25%、50%、25%，若该种群中的aa个体没有繁殖能力，则具有繁殖能力的个体中，AA占25%÷(25%＋50%)＝1/3，Aa占2/3，因此A的基因频率为1/3＋2/3×1/2＝2/3，a的基因频率为1/3。根据遗传平衡定律，其他个体间可以随机交配，后代中AA的频率＝2/3×2/3＝4/9，Aa的频率＝2×1/3×2/3＝4/9，aa的频率＝1/3×1/3＝1/9，因此下一代中AA∶Aa∶aa基因型个体的数量比为4∶4∶1，D项正确，A、B、C项错误。故选D。【点睛】本题考查基因分离定律的实质及应用、基因频率的计算，要求考生基因频率的相关计算，能根据基因频率计算基因型频率，注意”基因型aa的个体失去繁殖后代的能力“这一条件的应用。6、B【解析】

基因突变是指DNA分子中碱基对的增添、缺失和替换，导致基因结构的改变。而DNA上的片段不都是基因，基因只是DNA上有遗传效应的片段。所以染色体上的DNA某处发生了个别碱基对增添不一定改变了基因结构，故不一定属于基因突变。真核生物的可遗传变异类型有基因突变、基因重组和染色体变异。【详解】A、染色体的主要成分是DNA和蛋白质，而合成DNA和蛋白质的原料分别是氨基酸和脱氧核糖核苷酸，因此合成人工染色体需要氨基酸和脱氧核糖核苷酸作为原料，A正确；B、染色体上的DNA某处发生了个别碱基对增添，如果发生的位置在基因与基因之间的区域，即非基因片段区域，则不会引起基因结构的改变，则不属于基因突变，B错误；C、由于真核生物的基因结构中存在非编码序列以及内含子，若基因缺失的单个碱基对是在内含子或非编码区位置，则该基因编码的肽链长度不一定会变短，C正确；D、酿酒酵母为真核生物，可能会发生基因突变、基因重组和染色体变异，D正确。故选B。【点睛】本题以我国科学家人工合成真核生物染色体这一生物科学热点为背景，考查DNA的复制、转录和翻译等知识，旨在考查考生获取信息的能力。二、综合题：本大题共4小题7、固体固体斜面萃取防止加热时有机溶剂挥发水蒸气蒸馏水中蒸馏压榨低【解析】

果酒的制作利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理。筛选分离目的微生物常用的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法。菌种的保藏方法有试管临时保藏法和甘油管藏法。植物有效成分的提取常用的方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法。植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素是启动脱分化和再分化的关键性植物激素。【详解】（1）果酒发酵常用的菌种是酵母菌。筛选、分离和纯化酵母菌常用固体培养基进行接种培养，菌种可以接种到固体斜面培养基中进行临时保藏。（2）胡萝卜素的提取方法常用萃取法，为防止加热时有机溶剂挥发萃取时需安装冷凝回流装置。提取橘皮精油时，橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题，所以一般采用压榨法。（3）在组织培养过程中，生长素和细胞分裂素是启动脱分化和再分化的关键性植物激素，培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化。【点睛】本题主要考查有关植物有效成分提取相关知识，要求考生识记相关实验的原理及操作步骤即可正确答题。8、活细胞吸附细胞膜流动性核糖体RNA聚合记忆细胞和浆单链RNA病毒容易变异，当变异的流感病毒入侵机体时，已有的特异性免疫功能难以发挥有效的保护作用，故需接种新疫苗【解析】

（1）病毒是一类没有细胞结构的特殊生物，只有蛋白质外壳和内部的遗传物质构成，不能独立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活细胞内才能生活和繁殖。（2）特异性免疫包括体液免疫和细胞免疫，其具体过程如下：

【详解】（1）病毒必须在活细胞（宿主细胞）内增殖；当病毒侵染人呼吸道上皮细胞时，会经过吸附、穿入、脱壳、生物合成和成熟释放等几个阶段；病毒通过膜融合进入细胞，体现了细胞膜的流动性；由题干信息可知，新冠病毒为RNA病毒，该病毒复制前需要先利用宿主的核糖体合成其RNA聚合酶；（2）能产生特异性抗体的是浆细胞，该细胞由B细胞分化而来，B细胞增殖分化的同时还可产生记忆细胞；（3）因新冠病毒为RNA病毒，RNA为单链结构，容易变异，当变异的流感病毒入侵机体时，已有的特异性免疫功能难以发挥有效的保护作用，故需接种新疫苗。【点睛】本题以新冠病毒为背景，综合考查病毒的特点、免疫调节的过程等知识，需要考生有较为扎实的基础，并能结合题干信息分析作答。9、PCRDNA双链复制番茄红素环化酶翻译Ecl和BamH1自身成环2农杆菌转化（或基因枪、花粉管通道）【解析】

分析图一：番茄红素可以转化为胡萝卜素。分析图二：图二位重组DNA（质粒三）的构建过程，该质粒能表达出双链RNA（发卡），番茄细胞可以识别侵入的双链RNA并将该双链RNA及具有相同序列的单链RNA一起降解，提高了果实中番茄红素的含量。【详解】（1）在体外快速大量获得目的基因或含有目的基因的“片段A”可以采用PCR技术，该技术的原理是DNA双链复制。（2）根据图二可知，目的基因是番茄红素环化酶基因，因此表达出“发卡”的DNA片段实际上是两个反向连接的番茄红素环化酶基因；“发卡”能导致双链RNA、mRNA被降解，而mRNA为翻译的模板，因此“发卡”阻止了其在细胞内的翻译过程，所以提高了果实中番茄红素的含量。（3）为保证第二个目的基因片段反向连接，应该用两种限制酶切割。由图可知，第二个目的基因片段两侧的限制酶识别序列为Ecl和BamHⅠ，因此处理已开环质粒所用的两种限制酶是Ecl和BamHⅠ。（4）去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团。对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要作用是阻止其自身成环（自身环化）；构建重组质粒三时，要用限制酶Ecl和BamHⅠ切割，这样会去除黏性末端最外侧缺少磷酸基团的脱氧核苷酸，因此形成的重组质粒缺少2个磷酸二酯键。（5）将目的基因导入植物细胞，采用最多的方法是农杆菌转化法，因此可利用农杆菌转化法将质粒三导入植物细胞。【点睛】解答第（5）题，关键能理清将目的基因导入受体细胞的方法，总结如下：1、将目的基因导入植物细胞，采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。2、将目的基因导入动物细胞，最常用的方法是显微注射技术。3、将目的基因导入微生物细胞，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为

感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根据实验中的对照原则，若要比较新蛋白A的表达效率是否提高，则需设置三组实验实验变量的处理分别为：仅含新蛋白质A的重组质粒，仅含蛋白A的重组质粒和空白对照（仅含空质粒，以排除空质粒可能产